基因芯片技术检测鉴定临床常见致病真菌的初步研究

目的为了快速、简便、高通量地鉴定临床常见致病真菌,建立了一种采用基因芯片技术对临床常见的致病真菌鉴定的分子生物学方法。方法以5.8S rDNA与28S rDNA间的内转录间区2(internal transcribed spacer-2,ITS-2)为靶标,针对待检的临床常见致病真菌设计合成一系列寡核苷酸探针,制成寡核苷酸芯片。待检真菌DNA经通用引物扩增标记后,与芯片杂交,对杂交图谱分析归纳,得到一套种特异性的典型杂交图谱。待检的样品菌与基因芯片杂交,得到的杂交结果与典型图谱比对即可判断出样品的种类。结果以涉及8个属20个种的标准致病真菌菌株对芯片的特异性、重复性、灵敏度进行考察,结果表明,该研究建立的基因芯片技术可以有效地区分20种临床常见致病真菌,特异性良好,重复性良好(信噪比CV<10%),灵敏度为15 pg/ml真菌DNA。收集从临床分离的84株致病真菌菌株对基因芯片进行试用,结果显示基因芯片的鉴定结果与常规鉴定方法的鉴定结果一致。结论这项技术的建立可以稳定、特异性地实现临床常见致病真菌的高通量鉴定,为进一步检测研究奠定了基础。     

鄱阳湖流域抗生素耐药基因分布特征及其与新型指示菌相关性研究

目的了解鄱阳湖流域抗生素耐药基因的时空分布规律,探究耐药基因与拟杆菌之间的相关性。方法选取鄱阳湖流域具有代表性的6个采样点,采集6个月的水样,通过q PCR方法定量检测五大类8种抗生素耐药基因[tet C,tet Q,erm B,sul1,sul2,bla TEM,aad A,aac(6')-1b]和2种拟杆菌(通用型拟杆菌,人特异性拟杆菌)的绝对浓度。结果 8种耐药基因均被检出,tet C,tet Q,erm B,sul1,sul2,bla TEM,aad A,aac(6')-1b的检出率分别为94.4%、66.7%、61.1%、97.2%、97.2%、97.2%、88.9%、94.4%;8种耐药基因的绝对浓度范围为0~2.9×107copies/ml,磺胺类基因检出浓度最高,是鄱阳湖流域中主要的抗生素耐药基因。tet Q和sul1基因在枯水期的绝对浓度高于丰水期(P0.05),8种耐药基因在上游河流的绝对浓度均明显高于湖泊上段和湖泊下段(P0.05),8种耐药基因与拟杆菌之间均存在较高的相关性(P0.05)。结论鄱阳湖流域磺胺类耐药基因污染较为严重,上游河流的耐药基因污染程度高于湖体,拟杆菌可能对抗生素耐药基因的污染具有一定的指示作用。     

水中银的铂/二氧化钛纳米粒子过氧化物模拟酶-快速比色测定法的建立

目的利用铂/二氧化钛纳米粒子(Pt/TiO_2NPs)的类过氧化物酶特性建立水中银(Ag~+)的快速比色半定量检测法。方法采用光催化还原法合成Pt/TiO_2NPs;基于Ag~+显著抑制Pt/TiO_2NPs的类过氧化物酶催化活性原理,裸眼观察加入不同浓度Ag~+后显色反应颜色的变化。结果合成的Pt/TiO_2NPs具有高效的类过氧化物酶活性;在优化条件下仅通过裸眼观察,Ag~+的检出限可达0.4μmol/L;其它常见金属离子对Ag~+的测定无明显干扰。结论基于Pt/TiO_2NPs类过氧化物酶催化活性的比色法简便易行,适用于水中Ag~+的半定量检测。     

镉对小鼠外周血免疫细胞线粒体功能的影响

目的探究镉体内染毒对昆明小鼠外周血免疫细胞线粒体功能的影响。方法选用20±2 g雄性昆明小鼠,适应性饲养一周,随机分为对照组、镉低剂量实验组和镉高剂量实验组,实验组分别于每周一、三、五灌胃给予不同剂量(7.5 mg/kg,15 mg/kg)的氯化镉溶液,连续6周,对照组给予同等体积的蒸馏水,于第8周提取小鼠外周血,血细胞计数仪计数外周血白细胞、淋巴细胞与红细胞数目,流式细胞仪测定外周血T、B、髄系细胞线粒体膜电位和线粒体活性氧(ROS)水平。结果与对照组相比,实验组小鼠外周血白细胞、淋巴细胞数目均显著下降(P0.05,P0.01);镉低剂量实验组小鼠与对照组相比,仅外周血髓系细胞线粒体ROS显著升高(P0.05),而镉高剂量实验组小鼠外周血髓系细胞、T细胞线粒体ROS均显著升高(P0.05,P0.01);镉高剂量实验组小鼠与对照组小鼠相比,外周血髓系细胞、T细胞线粒体膜电位均显著下降(P0.05)。结论镉体内染毒导致昆明小鼠外周血免疫细胞线粒体功能下降,且与剂量相关。     

天津市某地区自来水中抗生素耐药菌及其相关基因的调查

目的研究天津市某地区自来水中抗生素耐药菌及其相关基因的分布。方法于2015年10月—2016年1月采集天津市某地区自来水样,并采用PCR技术检测六大类27种耐药基因,同时分离培养耐药菌并进行种属鉴定。结果该自来水微生物指标合格,但是自来水样中检测出了四环素类、磺胺类、β内酰胺类和氨基糖苷类耐药菌及其耐药基因,其中磺胺类耐药菌及其耐药基因的检出率最高。磺胺类耐药菌检出率达83.33%(10/12),sul1耐药基因检出率达91.67%(345/545)。经鉴定,耐药菌主要分布于肠球菌、葡萄球菌、微杆菌、微球菌、假单胞菌、芽孢杆菌属。结论天津市该地区自来水中存在少量的耐药菌。     

遗传毒性鸡血藤水提物抗柯萨奇病毒B3作用及机制

目的:探讨鸡血藤抗柯萨奇B3病毒(CVB3)的作用和机制。方法:不同浓度的鸡血藤水提物与适量CVB3感染的Vero E6细胞共同培养,采用甲基噻唑基四唑塞唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,计算鸡血藤水提物对CVB3,CVB5,埃可病毒9(Echo virus 9,EV9),EV29和脊髓灰质炎病毒(Polio virus1,PVⅠ)这5种肠道病毒的半数抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI),并用RT-PCR检测鸡血藤水提物对CVB3侵染Vero E6细胞的RNA复制的影响。结果:鸡血藤水提物能有效抑制CVB3,CVB5,EV9,EV29和PVⅠ这5种肠道病毒引发的细胞病变,IC50分别为60.8,47.1,17.1,65.5和29.1μg.mL-1,TI分别为4.1,5.3,14.6,3.8和8.6,对肠道病毒的抑制作用存在量效关系;鸡血藤不能阻止CVB3对Vero E6细胞的吸附作用,但可干扰CVB3侵染细胞后病毒核酸的复制。结论:鸡血藤能抑制CVB3引发的细胞病变,其机制可能是抑制侵染后病毒复制的初级阶段。     

包头市牧区水环境隐孢子虫和贾第鞭毛虫调查

目的了解包头市典型牧区水环境中隐孢子虫和贾第鞭毛虫的污染状况。方法于2016年2月至2018年9月的春、夏、秋、冬四季分别采集包头市某牧区旗1处集中式供水和2处分散式供水的饮用水、2处典型地表水和当地污水处理厂进水及出水水样各1次,进行隐孢子虫和贾第鞭毛虫检测。结果共采集饮用水样品12份,均未检出隐孢子虫和贾第鞭毛虫。地表水各个季节均有不同程度隐孢子虫和贾第鞭毛虫检出,检出率分别为50%(4/8)和37.5%(3/8)。污水厂水样在春、夏、秋季检出隐孢子虫和贾第鞭毛虫,检出率分别为42.9%(3/7)和57.1%(4/7)。结论本次调查包头市典型牧区生活饮用水未发现隐孢子虫和贾第鞭毛虫污染,而地表水和污水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫污染较为普遍。     

救治急性有机磷中毒38例护理体会

急性有机磷杀虫剂中毒是农村基层医院的常见急症之一，特别是经消化道有机磷中毒更是病情凶险，往往危及患者生命，应立即展开综合救治措施。我院自1996年5月至今共收治此类病人38例(其中经口服中毒32例)，经积极治疗和护理，除3人因病情加剧或出现严重并发症而转院外，余者全部康复。笔者通过对这38例病人的治疗护理过程进行观察，重点针对护理环节中出现的几个问题分析总结，体会如下。     

链霉亲和素修饰的CdSe–ZnS量子点对聚合酶链反应的影响作用初步研究

目的:探讨链霉亲和素修饰的CdSe–ZnS量子点对聚合酶链反应的影响。方法:将链酶亲和素修饰的量子点浓度进行稀释观察其对于聚合酶链反应体系的浓度效应;反应体系中含有一定浓度的链酶亲和素修饰的量子点,在不同的退火温度下进行扩增,观察链酶亲和素修饰的量子点对退火温度的影响;将不同浓度的BSA加入到含有一定浓度的链酶亲和素修饰的量子点的反应体系中,观察BSA的影响作用;将不同公司的Taq酶与不同浓度链酶亲和素修饰的量子点组合,观察对扩增体系的影响。结果:一定浓度链霉亲和素修饰的量子点可以促进聚合酶链反应的扩增效率,拓宽PCR的退火温度范围;BSA可以逆转链霉亲和素修饰的量子点对于PCR的优化作用;量子点可能是与Taq酶相互作用,来影响PCR的扩增效能。结论:一定浓度的链霉亲和素修饰的量子点可以优化PCR的反应体系。     

不同饮用水对高脂饮食诱导的大鼠脂质代谢紊乱和肝损伤的影响

目的 探究不同饮用水对高脂饮食条件下大鼠脂质代谢紊乱和肝损伤的影响。方法 实验用水为溶解性总固体（TDS）和镁含量明显不同的自来水、纯净水、天然矿泉水1、天然矿泉水2。25只雄性Wistar大鼠随机分为5组,分组及干预如下：对照组（TN）饲喂自来水+基础饲料,自来水组（TW）饲喂自来水+高脂饲料,纯净水组（PW）饲喂纯净水+高脂饲料,天然矿泉水1组（VW）饲喂天然矿泉水1+高脂饲料,天然矿泉水2组（SW）饲喂天然矿泉水2+高脂饲料。每日记录大鼠饮水量及摄食量,每周称重1次,20w后收集大鼠血液和肝脏标本,测定大鼠肝脏重量和肝脏指数,检测血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）和谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AS...