血浆细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子、环腺苷酸反应元件结合蛋白水平与糖尿病视网膜病变关系研究

目的 检测糖尿病视网膜病变(DR)病人血浆中细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子(P15INK4b)、环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)水平,探讨P15INK4b、CREB与DR发生发展的关系.方法 选取2017年6月至2019年6月仙桃市第一人民医院收治糖尿病(观察组)198例作为研究对象,其中,非DR(非DR组)95例,DR(DR组)103例;根据病变阶段将DR病人分为非增生性糖尿病视网膜病变(NPDR)Ⅰ期组(24例)、NPDRⅡ期组(29例)、NPDRⅢ期组(26例)和增生性糖尿病性视网膜病变(PDR)组(24例);同期健康体检者(对照组)200例作为对照.采集清晨外周血提取血浆、血清,蛋白质免疫印迹(Western blotting)法检测血浆P15INK4b、CREB水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)水平;采用Pearson法分析DR病人血浆P15INK4b、CREB水平与血清TNF-α、TGF-β1、VEGF水平相关性;采用多因素logistic回归分析影响DR发生的因素.结果 观察组血浆P15INK4b、CREB水平较对照组明显升高[(3.26±1.04)比(1.71±0.55),(0.84±0.26)比(0.53±0.16),P<0.05],血清TNF-α、TGF-β1、VEGF水平较对照组明显升高(P<0.05);DR组血浆P15INK4b、CREB水平较非DR组明显升高[(4.23±1.39)比(2.21±0.72),(1.01±0.33)比(0.65±0.21),P<0.05],血清TNF-α、TGF-β1、VEGF水平较非DR组明显升高(P<0.05);随着病变阶段升级,DR病人血浆P15INK4b、CREB水平、血清TNF-α、TGF-β1、VEGF水平逐渐升高(P<0.05);DR病人血浆P15INK4b、CREB水平与血清TNF-α、TGF-β1、VEGF水平均明显正相关(P<0.05);血浆P15INK4b、CREB、血清TNF-α、TGF-β1、VEGF水平均为影响DR发生的危险因素(P<0.05).结论 糖尿病病人血浆P15INK4b、CREB水平均明显升高,随DR的发生发展均异常表达,与血清TNF-α、TGF-β1、VEGF水平均关系密切,可能通过与TNF-α、TGF-β1、VEGF相互调控影响疾病发生发展,均为影响DR发生的危险因素,可作为DR发生和严重程度的标志物.     

老年男性Ⅱ型糖尿病患者的骨代谢研究

目的 了解老年男性Ⅱ型糖尿病（T2DM）患者骨代谢的变化及影响骨代谢的相关因素,对Ⅱ型糖尿病并发骨质疏松（osteoporosis,OP）作出早期预防和诊治.方法 采用双能X线吸收法（DEXA）测定40例男性糖尿病患者和健康对照者腰2～4椎的骨密度（BMD）,同时测定骨钙素（BGP）、血清Ⅰ型前胶原羧基末端前肽（PICP）、Ⅰ型胶原降解产物（ICTP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TrACP-5b）、糖化血红蛋白（HbA1c）.结果 糖尿病患者BMD及BGP、PICP均低于非糖尿病者,而ICTP及TrACP-5b均高于非糖尿病者（P＜0.05）,BMD与糖尿病病程、ICTP、TrACP-5b、HbA1c呈显著负相关（P＜0.05）.结论 老年男性糖尿病患者存在BMD显著下降,其骨代谢特点是骨吸收增加,骨形成降低,血糖控制不良是糖尿病并发骨质疏松的危险因素之一.     

恩格列净、利拉鲁肽与二甲双胍治疗新发2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的临床疗效及对血清炎性因子、D-二聚体及肝功能的影响

目的比较恩格列净、利拉鲁肽和二甲双胍治疗新发2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)的临床疗效及对血清炎性因子、D-二聚体及肝功能的影响。方法前瞻性选取2018年2月至2019年8月长江大学附属仙桃市第一人民医院收治的126例新发2型糖尿病合并NAFLD患者,按照随机数字表法分为利拉鲁肽组、利格列汀组及二甲双胍组,各42例。利拉鲁肽组:皮下注射0.6 mg,1次/d(第1周),第2周开始及以后皮下注射1.2 mg,1次/d;恩格列净组:早上口服10 mg片剂,1次/d;二甲双胍组:口服0.5 g,进食或餐后服用,1次/d,疗程12周。比较治疗前、治疗12周后3组患者体重、体重指数(BMI)、血糖[空腹血糖(FPG),餐后2 h血糖(2 hPG)]、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)],血脂指标[胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]及血清D-二聚体和炎性因子[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平;记录3组患者用药期间不良反应发生情况。结果治疗12周后,3组患者的体重、BMI、ALT、AST、GGT、FINS、HOMA-IR、FPG、2 hBG、TG、HbAlc、血清D-二聚体、CRP、IL-6及TNF-α水平均较治疗前明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),二甲双胍组、利拉鲁肽组的LDL-C和TC水平较治疗前均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05),而恩格列奈组治疗前后的LDL-C和TC水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗12周后,3组间体重比较,差异无统计学意义(P>0.05),而恩格列净组、利拉鲁肽组的BMI、ALT、AST、GGT、FINS、HOMA-IR、FPG、2 hBG、TG、HbAlc、血清D-二聚体、CRP、IL-6及TNF-α均较二甲双胍组低,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗12周后,利拉鲁肽组的TC和LDL水平低于恩格列奈组与二甲双胍组,差异有统计学意义(P<0.05);3组的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论利拉鲁肽和恩格列净在控制新发2型糖尿病合并NAFLD患者血糖、降低体重和胰岛素抵抗、降低炎性因子水平、改善肝功能、预防血栓效果相当,均优于二甲双胍,但是恩格列净在改善血脂方面不如利拉鲁肽。     

甲巯咪唑联合普萘洛尔治疗甲亢的疗效

目的探讨甲巯咪唑联合普萘洛尔治疗甲状腺功能亢进症患者的临床疗效。方法 2013年1月—2017年1月,将在本院接受治疗的甲状腺功能亢进症患者80例作为研究对象,将其随机分为两组,每组各40例。对照组给予甲巯咪唑治疗,观察组增加甲巯咪唑联合普萘洛尔治疗,观察两组患者的治疗效果及甲状腺功能改善情况。结果观察组患者的治疗有效率为97.50%,较对照组的82.50%明显更高,差异具有统计学意义(P 0.05);治疗前,观察组与对照组患者的甲状腺功能各指标比较,差异无统计学意义(P 0.05);治疗后,观察组患者的TSH、FT4、FT3等甲状腺功能指标明显改善,且改善程度显著优于对照组,差异具有统计学意义(P 0.05);观察组患者的TPOAb、TRAb水平明显降低,与对照组比较,差异无统计学意义(P 0.05)。观察组瘙痒、白细胞减少、肝功能异常、皮疹等不良反应率为10.00%,与对照组的15.00%比较,差异无统计学意义(P 0.05)。结论针对甲状腺功能亢进症患者采用甲巯咪唑联合普萘洛尔治疗对缓解患者不良症状效果较好,促使临床指标恢复正常水平,改善甲状腺功能,治疗效果显著。     

生长分化因子11对db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞功能的保护作用及机制研究

目的探讨生长分化因子11(GDF11)对瘦素受体基因纯合突变(db/db)糖尿病小鼠胰岛β细胞的保护作用及影响机制。方法将20只8周龄的C57B/6J野生型小鼠制备为db/db糖尿病模型,并随机分为GDF11组和DM组,每组各10只;GDF11组小鼠给予GDF11重组蛋白注射,DM组小鼠给予磷酸盐缓冲液(PBS)注射,连续注射6周;并选取10只同龄正常小鼠作为对照组(NC组),给予6周PBS干预。观察GDF11对小鼠生理生化指标、胰岛β细胞功能以及胰岛Smad2、P-Smad2表达水平的影响。结果经GDF11干预后,db/db糖尿病小鼠的空腹血糖(FBS)、糖化血红蛋白(Hb A1C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)均明显低于DM组及NC组小鼠(P<0.05);db/db糖尿病小鼠的糖耐量水平显著改善,GDF11组小鼠的血清胰岛素、血清胰升糖素均明显低于DM组(P<0.05),且均高于NC组(P<0.05);GDF11组小鼠的胰岛内胰岛素的水平明显高于DM组(P<0.05),但低于NC组(P<0.05);DM组与GDF11组小鼠的胰岛内胰升糖素无显著差异(P>0.05),且均高于NC组(P<0.05);经实时荧光定量PCR检测发现GDF11组小鼠胰岛胰十二指肠同源异型盒基因(Pdx-1)、亮氨酸拉链蛋白Maf家族A(MafA)、Nk同源异型盒基因家族6.1(Nkx6.1)、Insulin2基因表达上调;小鼠的p-Smad2、Smad2蛋白水平明显高于NC组小鼠(P<0.05)。结论GDF11可控制糖尿病小鼠胰升糖素分泌水平,调节β细胞转录因子表达,改善β细胞功能和含量,促进胰岛素的分泌合成,从而延缓糖尿病的发生和发展;GDF11对胰岛β细胞的保护作用可能与胰岛Smad2信号通路密切相关。     

雷帕霉素软膏对银屑病小鼠模型的治疗作用及相关机制研究

目的探讨雷帕霉素(RAP)软膏对寻常型银屑病(PSO)小鼠皮肤的影响及相关机制。方法45只BALB/c小鼠分为3组:空白对照组、模型组和实验组,每组15只。模型组和实验组利用5%咪喹莫特乳膏建立银屑病小鼠动物模型,空白对照组不建模。实验组建模后连续给药0.1%雷帕霉素软膏涂抹14 d,其余两组给予生理盐水湿润皮肤,每日3次/d,连续涂抹14 d。三组小鼠于15 d检测血清细胞因子干扰素γ(IFN-γ),白介素4(IL-4)的表达;实时荧光定量PCR(q-PCR)检测酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)、信号转导与转录因子1(STAT1)和信号转导与转录因子3(STAT3)mRNA表达;Western blotting检测磷酸化p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组血清细胞因子IFN-γ含量上调(P<0.05),用药后实验组血清中细胞因子IFN-γ水平明显低于模型组(P<0.05),IL-4水平三组比较差异无统计学意义(P>0.05);q-PCR显示,与空白对照组比较,模型组皮损区JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达显著升高(P<0.05),用药后实验组JAK2、STAT1和STAT3 mRNA表达显著低于模型组(P<0.05);Western blotting显示,与空白对照组比较,模型组皮损区皮损区p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达显著升高(P<0.05),实验组p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达显著低于模型组(P<0.05)。结论雷帕霉素可通过抑制JAK/STAT信号通路降低银屑病小鼠炎性因子表达,从而对银屑病小鼠起保护作用。     

甲巯咪唑联合双膦酸盐对甲亢性骨质疏松大鼠骨密度的影响

目的 探究甲巯咪唑联合双膦酸盐对甲亢性骨质疏松大鼠骨密度的影响。方法 选取60只SPF级雄性SD大鼠,随机分为5组：对照组（生理盐水灌胃）、模型组（左甲状腺素灌胃）、甲巯咪唑组（左甲状腺素灌胃,甲巯咪唑治疗）、双膦酸盐组（左甲状腺素灌胃,双膦酸盐治疗）和联合组（左甲状腺素灌胃,甲巯咪唑联合双膦酸盐治疗）,每组12只。检测各组大鼠血清中甲状腺功能指标游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）含量,骨代谢指标钙（Ca）、抗酒石酸盐酸性磷酸酶（TRAP）、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（BGP）含量。检测各组大鼠骨矿物质含量、骨密度以及股骨骨折应力和压碎力。结果 与对照组比较,其余各组大鼠FT3、FT4含量均显著升高（F=18.560、35.120,P均<0.05）,Ca含量显著降低（F=4.607,P<0.05）,TRAP、ALP、BGP含量均显著升高（F=22.850、15.790、18.480,P均<0.05）,骨矿物质含量、骨密度、股骨骨折应力和压碎力显著降低（F=8.565、2.567、13.790、21.490,P均<0.05）,差异均有统计学意...     

多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1调控β-1,4-甘露糖基转移酶介导甲状腺癌细胞增殖机制

目的 探讨多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)调控β-1,4-甘露糖基转移酶(ALG1)对甲状腺癌(TC)细胞增殖/凋亡的影响及其潜在机制。方法 采用慢病毒表达载体(pLV)构建pLV-EGFP空载与pLV-ALG1过表达8305C细胞系，采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞蛋白水平表达，使用Kaplan-Meier数据库分析TC患者总生存期(OS);采用细胞计数试剂盒(CCK)-8和集落形成实验检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞凋亡情况。从TCGA数据库中筛选出TC患者中与PARP1表达呈显著相关的前1 000个差异基因，富集相关信号通路，比较这些通路的差异表达状况，并在过表达细胞系中进行相应验证。结果 PARP1在TC细胞系中表达显著增加，且与患者OS呈负相关(P<0.05)。PARP1抑制剂(NMS-P118)显著抑制8305C细胞的增殖，促进细胞凋亡(P<0.05)。TCGA数据库筛选并富集分析发现，N-糖基化修饰信号通路显著富集，NMS-P118显著抑制了β-1,4-甘露糖基转移酶(ALG1)的表达水平(P<0.05),但对p38的...