肌浆网钙ATP酶基因转导对慢性心力衰竭犬心肌蛋白质组影响的初步研究

目的 分析心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(sarcoplasmic reticulum Ca2+ ATPase 2a,SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭(HF)犬心肌蛋白质组的影响,探讨SERCA2a基因转导改善心功能的机制.方法 快速右心室起搏建立HF犬模型并随机分为HF组、HF+绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent pmtein,EGFP)组、HF+SERCA2a组.后两组分别向心肌内注射携带EGFP和SERCA2a基因的rAAV载体.于基因转导30 d时停止起搏后进行超声心动图和血流动力学检查并制备心室肌双向电泳蛋白样品和心肌双向电泳图谱,图像分析软件分析蛋白表达差异点,MALDI-TOF-MS数据库搜索鉴定蛋白质.结果 基因转导30 d时,HF+SERCA2a组犬的症状、超声心动图和血流动力学指标与HF+EGFP组相比有显著好转(P＜0.05);与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).挑选SERCA2a基因转导后表达量发生明显改变的10个蛋白点进行分析,经质谱鉴定分别为心肌收缩相关蛋白、线粒体能量代谢酶类和应激相关蛋白.结论 以rAAV为载体介导SERCA2a基因转导能够改善HF犬心脏的收缩和舒张功能,其可能的机制是恢复了心肌收缩相关蛋白正常表型或正常表达量,增加了心肌能量的产生,改变了应激相关蛋白的表达.     

LTB4诱导THP-1巨噬细胞MMP-9表达及在急性冠脉综合征中的意义

急性冠脉综合征（Acute Coronary Syndrom,ACS）包括急性心肌梗死（AMI）、不稳定心绞痛（UA）和心源性猝死,是严重冠状动脉粥样硬化性心脏病的表现形式,其病理生理机制尚未明确,炎症机制是目前研究的热点。白三烯B4（Leukotriene B4,LTB4）激活巨噬细胞产生炎症介质,与动脉粥样斑块不稳定关系密切;MMP-9（Matrix Metalloproteinases,MMP-9）降解细胞外基质而成为致斑块易损的重要炎症因子。     

循环内皮细胞和血管性血友病因子在老年高血压及冠心病中的临床意义

目的探讨老年高血压(EH)患者和老年冠心病(CHD)患者血浆循环内皮细胞数、血管性血友病因子(vWF)的临床意义。方法对34例老年EH患者(EH组)、27例老年CHD患者(CHD组)、老年健康体检者24例(对照组),检测血浆循环内皮细胞数、vWF的水平。结果EH组、CHD组循环内皮细胞数和血浆vWF水平均高于对照组(P<0.01),且CHD组的循环内皮细胞数和血浆vWF的水平均高于EH组(P<0.05)。结论EH组患者存在的血管内皮细胞受损可能参与了冠状动脉粥样硬化的发生、发展。     

运动康复护理干预对心力衰竭患者心功能及远期生存率的影响

目的 探讨运动康复护理干预对心力衰竭患者（CHF）心功能及远期生存率的影响.方法 选取我院收治的126例CHF患者,随机分为常规组（n=60,仅予以常规治疗护理）和运动干预组（n=66,在对照组基础上予以运动康复干预）,比较两组的干预效果.结果 干预3周后,运动干预组患者心率、MLHFQ评分均明显低于常规组（P＜0.05）;6 min步行距离、心脏回缩及左室射血分数（LVEF）明显高于常规组（P＜0.05）.随访一年,运动干预组ML-HFQ评分、再入院率39.4％和死亡率3％明显低于常规组60％、26.7％ （P＜0.05）.结论 运动康复护理干预可显著改善CHF患者心功能,提高远期生存率,值得临床推广.     

基质金属蛋白酶诱导因子和白三烯B4在急性冠状动脉综合征中表达

目的:研究基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)及白三烯B4(LTB4)在急性冠状动脉综合征中表达。方法:设立稳定型心绞痛组(SAP组)、不稳定型心绞痛组(UAP组)、急性心肌梗死组(AMI组)及对照组(CON组),以流式细胞计数法测定患者外周静脉血单核细胞表面EMMPRIN表达,ELISA法检测其血清LTB4水平。结果:EMMPRIN在UAP组显著高于CON组、SAP组、AMI组,在UAP<1周亚组表达明显。LTB4在AMI组显著高于CON、SAP和UAP组,其AMI<24h亚组增高显著。结论:UAP患者外周血单核细胞表面EMMPRIN表达增高,其出现高峰为胸痛1周内;AMI患者血清中LTB4表达上调,高峰为胸痛24h之内。     

心肌肌浆网Ca2+-ATP酶基因转导改善慢性心力衰竭犬心功能的研究

目的： 探讨以重组腺相关病毒(rAAV)为载体的心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭犬心功能的影响。方法: 选取成年比格犬17只，随机分为对照组4只和心力衰竭组11只。快速右心室起搏建立慢性心力衰竭犬模型并随机分为心力衰竭组4只、心力衰竭＋绿色荧光蛋白（EGFP）组4只、心力衰竭＋SERCA2a组5只(其中1只在开胸后死亡)。接受基因导入的心力衰竭犬行开胸术，分别向心肌内注射携带EGFP和SERCA2a基因的rAAV载体。于基因转导30d时停止起搏后进行超声心动图和血流动力学检查。结果: 基因转导30 d时，心力衰竭＋SERCA2a 组犬的症状及超声心动图指标与心力衰竭＋EGFP组相比有显著好转（P<0.05）；与对照组相比无显著差别。血流动力学监测发现，转导SERCA2a的犬LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax明显升高，平均值较EGFP组分别增加54.12％［(214.72±31.74)mmHg vs (139.32±36.79)mmHg］、146.81％［(6 779.43±217.58)mmHg/s vs (2 746.85±931.23)mmHg/s］和71.52％［(-4 341.42±322.02)mmHg/s vs (-2 531.14±616.15 mmHg/s)］，LVEDP则降低了63.43％［(21.86±6.95)mmHg vs (59.78±6.92)mmHg］，所有参数与对照组相比无显著差异。心力衰竭＋EGFP组犬心肌冰冻切片在激光共聚焦显微镜下可见弥漫绿色荧光。结论: 以rAAV为载体介导SERCA2a基因转导能够改善慢性心力衰竭犬心脏的收缩和舒张功能，是1种有前景的治疗慢性心力衰竭的方法。     

快速右心室起搏心力衰竭犬模型的建立

目的应用改进的快速右心室起搏的方法制备慢性心力衰竭犬模型,分析模型相应的临床和血流动力学及病理变化。方法选择比格犬12只,随机分为起搏组(7只)和对照组(5只),起搏组采用230 ppm的频率快速右心室起搏4周,之后改用180 ppm的频率维持右心室起搏4周。对照组正常喂养不处理,4周后测量相应指标。起搏组起搏前、起搏1、8周后,分别行心脏超声、血流动力学检测,之后处死取心脏做病理切片检查。结果与对照组和同组起搏前比较,起搏组犬起搏4、8周后,出现慢性心力衰竭的相应临床表现;超声心动图示各心腔内径均变大,左心室射血分数明显下降,左心导管示左心室舒张末压力增加,左心室收缩末压力及左心室内压最大上升及下降速率降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论经过改进的快速右心室起搏方法,可以产生相对稳定的慢性心力衰竭犬模型。     

Th17、IL-17 在长程持续性心房颤动中的作用机制

目的 探讨外周血中辅助性T 细胞17（Th17）及其细胞因子在长程持续性心房颤动（以下简称 房颤）中的作用机制。方法 回顾性收集2017 年1 月-2017 年12 月该院收治的长程持续性房颤患者的临床 资料,将该50 例作为观察组,选取同期健康成人50 例作为对照组。观察两组外周血中Th17 及其细胞因子表 达水平,并进一步分析长程持续性房颤患者Th17、白介素-17（IL-17）与临床特征的相关性。结果 与对 照组比较,观察组Th17、IL-17 升高（P <0.05）。合并高血压患者的Th17 水平高于未合并高血压患者（P <0.05）; 合并高血压或糖尿病房颤患者的IL-17 水平高于未合并患者（P <0.05）。长程持续性房颤患者Th17、IL-17 与左室内射血分数呈负相关（r =-0.212 和-0.209,P =0.021 和0.028）。结论 长程持续性房颤患者外周血中 Th17、IL-17 升高,与高血压、糖尿病和心功能不全有关。     

rAAV1-SERCA2a转导对慢性心力衰竭beagle犬的治疗作用

目的 研究重组1型腺相关病毒(rAAV1)介导的肌质网钙离子ATP酶2a(SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭(HF)beagle犬的治疗作用及町能的机制. 方法 经快速右心室起搏建立beagle犬的慢性HF模型.16只beagle犬分为4组:对照组(n=4),HF组(n=4),HF+EGFP组(n=4)和HF+SERA2a组(n=4).应用开胸心肌内注射术,分别将携带EGFP基因rAAW1和携带SERCA2a基因rAAV1导人HF+EGFP组和HF+SERCA2a组的beagle犬心肌,剂量为1×10 12/ml,而对照组和HF组未进行任何处理.基因转导后30d,应用超声心动图、血流动力学检测各组beagle犬的心脏收缩和舒张功能、Westem blotting检测SERCA2a蛋白表达水平,TUNEL法检测心肌细胞的凋亡指数,免疫组织化学染色检测Bax的表达. 结果 在基因转导后30d,HF+SERCA2a组SERCA2a蛋白表达水平较HF组明显增加,随着SERCA2a表达增加心功能也得到改善,左室收缩压峰值(LVSP)、左室舒张末压(IVEDP)、左室内压最大上升速率(LV+dp/dtmax)和左室内压最大下降速率(LV-dp/max)均接近对照组水平,较HF组明显改善(P＜0.05).SERCA2a基因治疗后心肌细胞凋亡指数、Bax表达比HF组显著降低(P＜0.05). 结论 SERCA2a基因转导能够治疗慢性心力衰竭,改善心功能,抑制心肌细胞凋亡.     

重组1和2型腺相关病毒载体在小鼠心脏转导研究

目的探讨重组1和2型腺相关病毒(rAAV1和rAAV2)载体向小鼠心脏转导效果。方法14只昆明小鼠应用经腹心包腔内注射术,分别将携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)、荧光素酶(LUC)报告基因的rAAV1(rAAV1-EGFP组6只,rAAV1-LUC组1只)r、AAV2(rAAV2-EGFP组6只,rAAV2-LUC组1只)分别转导入小鼠的心包腔内,使用共聚焦显微镜观察EGFP在心肌的表达,冷光CCD相机体内监测LUC在心肌表达。结果rAAV1-EGFP组绿色荧光出现于心肌组织全层;rAAV2-EGFP组绿色荧光仅局限于心外膜下少数心肌细胞。rAAV1-EGFP组小鼠心肌细胞的表达范围和强度优于rAAV2-EGFP组。rAAV1-LUC组小鼠心肌组织表达强度、持续表达时间优于rAAV2-LUC组。结论在小鼠心脏中,rAAV1是一种比rAAV2更为有效的转基因载体。