狼疮性肾炎患者肾组织Epstein-Barr病毒感染状况及其致病作用初探

并感染之间以及不同病理类型之间差异均无统计学意义(P＞0.05).肾组织EBER和EBV LMP1表达阳性的LN患者的血清中anti-Sm-Ab阳性率显著高于两标记物表达阴性的LN患者(EBER:34.3%vs 8.7%,EBV LMP1:35.3%vs 9.1%,P均＜0.05).结论 肾组织EBV感染可能参与了LN的发病,其机制可能部分与诱导机体产生自身抗体anti-Sm-Ab有关.     

二维平面足细胞相对密度测量法

目的：探索一种简便且临床实用的足细胞丢失评估方法。方法：应用免疫组化法对正常和阿霉素肾病大鼠的肾组织,以及正常肾组织和3种不同病理类型肾小球疾病患者肾组织进行Wilms′瘤蛋白免疫染色,采用手工计数和病理图像分析技术相结合的方法分别对单个肾小球内足细胞的绝对数以及单位面积肾小球内足细胞的相对密度进行测定,找出结果可靠的最低肾小球数目并检验不同测量人员所获结果的一致性。结果：在统计10个和15个大鼠肾小球时,阿霉素肾病组肾小球足细胞相对密度显著低于正常大鼠;无论统计的肾小球数目多少,两组大鼠肾小球足细胞绝对数差异无统计学意义。在统计5个和10个人类肾小球时,局灶节段性肾小球硬化组和膜性肾病组肾小球足细胞相对密度均显著低于正常组和微小病变组;局灶节段性肾小球硬化组肾小球足细胞绝对数显著低于正常组和微小病变组。人类肾小球足细胞相对密度与血肌酐（Scr）水平呈低度负相关,但与24h尿蛋白含量（24hUPQ）无相关关系;阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞相对密度与Scr、24hUPQ无相关关系。两名检测者所获结果有高度一致性。结论：这种足细胞相对密度评估法简便、快捷和可靠,且所需肾小球数目少,有望在临床实践中推广。     

基于网络药理学分析冬虫夏草防治急性肾损伤的分子机制北大核心CSCD

目的：基于网络药理学分析冬虫夏草（CS）防治急性肾损伤（AKI）的分子作用机制。方法：应用中药系统药理学数据库（TCMSP）筛选CS的有效成分和作用靶点,从DisGeNET、GeneCards、OMIM、TTD数据库筛选AKI的疾病靶点,运用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-成分-疾病-靶点”可视化调控网络,采用String在线数据库构建CS与AKI共同靶点的蛋白互作网络,DAVID数据库和KEGG数据库对共同靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,探讨其潜在分子机制。结果：CS中筛选得到有效成分9种,防治AKI的作用靶点63个。GO功能富集分析主要包括对药物的反应、信号转导、衰老、细胞增殖调控、细胞凋亡调控等。CS防治AKI的主要富集通路有PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、细胞凋亡通路、TNF信号通路、P53信号通路等。结论：通过网络药理学研究方法预测了CS防治AKI的有效活性成分及作用靶点,并通过PPI网络和KEGG富集分析推测了CS通过多条信号通路调节防治AKI,涉及细胞自噬、凋亡及炎症反应等多环节生物学过程。     

EBV LMP1和CMVpp65在肾脏疾病肾组织中的表达

目的 研究非洲淋巴细胞瘤病毒LMP1(EBV LMP1)、巨细胞病毒pp65(CMVpp65)在肾脏疾病患者肾组织中的表达情况,探讨病毒感染与人类肾脏疾病发生、发展的关系.方法 临床资料齐全的肾穿刺活检标本435例,免疫组化法检测EBV LMP1和CMVpp65在肾组织中的表达情况.结果 (1)175例(40.2%)肾组织中EBV LMP1表达阳性,狼疮性肾炎(LN)组及IgA肾病(IgAN)组与非免疫性肾病组及原发性肾炎(PGN)组比较,差异有统计学意义;170例(39.1%)肾组织中CMVpp65表达阳性,LN组与非免疫性肾病组及PGN组比较,差异有统计学意义;(2)PGN组初发患者与复发患者肾组织EBV LMP1、CMVpp65阳性率比较差异有统计学意义,其他病种则无;(3)合并感染与无合并感染患者EBV LMP1、CMVpp65阳性率比较差异均无统计学意义;(4)肾组织EBV LMP1表达阳性的LN患者血清anti-Sm-Ab阳性率高于阴性组(P<0.05,OR=6.00,95%CI:1.200～29.998);而CMVpp65表达阳性者血清anti-Sm-Ab阳性率低于阴性组(P<0.01,OR=0.156,95%CI:0.038～0.643).结论 肾组织EBV及CMV感染可能参与LN及IgAN的发病,其中EBV感染可能以分子拟态方式诱发系统性红斑狼疮.     

类风湿关节炎患者嗜碱性粒细胞与疾病活动度和Th1应答失衡的关系

目的:探讨RA患者外周嗜碱性粒细胞的活化情况和活化机制,以及与疾病活动度和Th1/Th2应答失衡的关系。方法:本研究运用流式细胞术检测类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中Th1/Th2细胞的比值和嗜碱性粒细胞数量及活化水平,用ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4水平,用Western blot法检测血清中循环的Ig E型免疫复合物(Ig E-CIC)的水平。结果:Th1/Th2细胞比值与DAS28评分呈低度线性正相关关系;RA患者血清IFN-γ水平较对照组显著升高,且和疾病活动度相关,但IL-4的水平则无差异;RA患者嗜碱性粒细胞数量较对照组显著降低,且高度活化(高表达CD203c和CD62L);RA患者外周血存在高水平的Ig E-CIC,而对照组则无。结论:RA患者外周血嗜碱性粒细胞高度活化、数量显著减少,可能会迁徙至次级淋巴组织和炎症部位,对抗外周Th1应答失衡,有望为RA的防治提供新的线索。     

成人肾病综合征患者肾小管megalin表达变化及其可能机制探讨

目的检测成人不同病理类型肾病综合征患者肾小管Megalin表达的差异,进一步探讨肾病综合征患者蛋白尿形成和肾小管损伤的发生机制。方法选取我院确诊为原发性肾病综合征患者62例,按照肾脏病理分为微小病变组(MCD)、膜性肾病组(MN)、局灶节段硬化组(FSGS)。收集各病例组临床资料以及血清、尿液等临床指标,包括患者病程、起效时间、ALB、BUN、Scr、CH、TG、HB、24小时尿蛋白定量等;应用免疫组织化学方法检测各病例组肾小管megalm的表达;各病例组行肾脏病理常规染色,并根据肾小管损伤标准进行肾小管-间质损伤程度评分。分析肾小管megalin表达量与临床和病理指标的相关关系。结果 MCD组肾小管megalin表达量与对照组比较无统计学差异,而MN组、FSGS组肾小管megalin表达均显著低于MCD组和对照组,以FSGS组降低最为显著。各病理类型亚组肾小管megalin的表达水平与临床指标无显著相关关系。全组肾病综合征、MCD亚组、MN亚组megalin的表达水平均与肾小管损伤评分存在负相关关系。结论某些病理类型肾病综合征患者肾小管megalin表达降低可能与蛋白尿毒性有关,megalin表达的下降反过来可能参与这些患者的尿蛋白形成。     

罗格列酮对阿霉素致肾小球硬化症大鼠的尿蛋白排泌量及肾小球蛋白(synaptopodin)表达的影响

目的 观察罗格列酮(胰岛素增敏药)对阿霉素致肾病大鼠的尿蛋白排泌量及肾小球蛋白表达的影响.方法 用罗格列酮治疗阿霉素诱导的局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠模型;用双缩脲法动态检测大鼠24 h尿蛋白量;分别用荧光实时定量PCR和免疫组织化学法检测大鼠肾组织synaptopodin mRNA和蛋白表达量.结果 罗格列酮能显著减缓FSGS大鼠尿蛋白排泄量的增加(P＜0.05);恢复大鼠肾组织蛋白表达量(P＜0.05),而不影响其mRNA表达量(P＞0.05);FSGS大鼠肾组织蛋白表达量与尿蛋白排泄量呈负相关(P＜0.01).结论 罗格列酮能减轻FSGS模型尿蛋白排泌量,其机制可能部分与维持足细胞足突肌动蛋白微丝骨架系统的稳定有关.     

蝉花对糖尿病大鼠肾小球沉默信息调节因子1表达的影响

目的探讨蝉花对糖尿病大鼠肾小球沉默信息调节因子1（silent information regulation 2homolog 1,SIRT1）表达的影响及其对肾脏的保护作用。方法 40只SD大鼠,随机分为对照组10只、蝉花组10只、DM模型组10只、DM＋蝉花组10只,DM模型组与DM＋蝉花组以单次腹腔注射含链脲佐菌素柠檬酸盐缓冲液60mg/kg建立糖尿病大鼠模型,对照组与蝉花组单次腹腔注射等量柠檬酸盐缓冲液。蝉花组和DM＋蝉花组给予蝉花菌丝提取液1.8g/（kg·d）灌胃治疗,对照组和DM模型组给予饮用水灌胃。治疗期间观察各组大鼠一般情况,于24周后检测各组大鼠肾功能,取肾皮质行组织病理学检查,采用RT-PCR及Western blot法检测大鼠肾小球SIRT1基因及蛋白表达情况。结果 DM模型组和DM＋蝉花组大鼠体质量、血浆胰岛素水平较对照组和蝉花组明显降低（P〈0.01）,食物摄取量、空腹血糖、糖化血红蛋白较对照组和蝉花组明显增高（P〈0.01）;DM＋蝉花组尿素氮、24h尿白蛋白、24h尿蛋白、尿白蛋白肌酐比和肾脏指数（（17.80±2.46）mmol/L、（789.00±103.20）μg/d、（18.20±3.05）mg/d、（64.50±8.34）μg/mg、8.00±1.36）较DM模型组（（22.90±3.29）mmol/L、（1 495.00±251.30）μg/d、（25.00±3.88）mg/d、（82.20±13.32）μg/mg、8.53±1.57）明显降低,大鼠肾组织系膜面积比、肾小球硬化指数及肾小球基底膜厚度（（17.80±4.87）%、56.20±17.10、（229.40±40.87）nm）较DM模型组（（26.20±6.11）%、81.00±19.48、（320.70±54.09）nm）明显减少（P〈0.05）,肾小球SIRT1mRNA和蛋白表达水平（（77.80±13.84）%、（70.60±15.17）%）较DM模型组（（36.80±12.03）%、（27.00±15.38）%）明显增高（P〈0.05）。结论蝉花可上调糖尿病大鼠肾小球SIRT1表达,可能是其延缓糖尿病肾病进展的主要机制之一。