EHEC O157:H7志贺毒素Ⅱ型A、B亚单位的表达及功能鉴定

目的 克隆、表达肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157:H7志贺毒素(Shiga toxin,Stx)Ⅱ型A、B亚单位,并鉴定其免疫学功能.方法 从EHECO157:H7基因组中克隆编码Stx Ⅱ型A、B亚单位的基因,经测序、酶切后,导入表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌Topl0F',经诱导、纯化得到谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)-A和GST-B融合蛋白.分别用A、B亚单位融合蛋白免疫BALB/c小鼠获得高免血清,观察A、B亚单位血清对小鼠进行毒素攻击的保护作用.结果 Stx Ⅱ型A、B亚单位的GST融合蛋白获得高效表达并纯化;A、B亚单位的高免血清可以保护小鼠对致死量毒素的攻击.结论 Stx Ⅱ型A、B亚单位蛋白可以作为EHEC O157:H7疫苗的候选分子,同时针对A、B亚单位蛋白的中和单抗可以对易感人群起到紧急保护作用.     

百乐眠胶囊联合艾司唑仑治疗失眠症的疗效观察

目的探讨百乐眠胶囊联合艾司唑仑治疗失眠症的临床疗效。方法选取2016-2018年到云浮市人民医院接受治疗的210例失眠症患者,根据给药不同将所有患者分为3组,每组患者70例。百乐眠组口服百乐眠胶囊,4粒/次,2次/d;艾司唑仑组晚上入睡前30 min口服艾司唑仑片,1片/次,1次/d;联合组口服百乐眠胶囊联合艾司唑仑片,相关药物服用方法同以上两组。三组患者均连续治疗2周。观察三组的临床疗效,比较三组患者匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)和不良反应发生情况。结果治疗后,百乐眠组、艾司唑仑组、联合组总有效率分别是74.28%、82.86%、97.14%,联合组总有效率显著高于百乐眠组、艾司唑仑组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,3组患者PSQI评分均有所降低(P<0.05);但治疗后,联合组患者PSQI各评分均显著低于百乐眠组、艾司唑仑组(P<0.05)。百乐眠组、艾司唑仑组、联合组不良反应发生率分别是8.57%、22.86%、10.00%,艾司唑仑组失眠症患者不良反应发生率明显高于百乐眠组、联合组(P<0.05)。结论百乐眠胶囊联合艾司唑仑治疗失眠症具有较好的临床疗效,可显著降低PSQI评分,改善患者睡眠质量,具有一定的临床推广应用价值。     

不同剂量丙泊酚预防小儿术后躁动的效果和安全性分析

目的：探讨不同剂量丙泊酚对预防小儿术后躁动的影响。方法选择2012年9月至2013年6月在泸州医学院附属中医院择期行斜疝修补术的小儿60例,分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组,3组患儿均采用七氟醚进行全身麻醉,术后分别采用0．10 mL／kg 的0．90％氯化钠注射液静脉注射、1．00 mg／kg 丙泊酚静脉注射1次和1．00 mg／kg 丙泊酚静脉注射2次,比较 3组患儿术后30 min 内躁动的发生率,并对患儿进行麻醉苏醒烦躁评分、Aldrete 改良评分和苏醒时间及出室时间比较。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组患儿30 min 内躁动发生率分别为65．00％、25．00％及15．00％,3组患儿比较差异有统计学意义（P ＜0．05）;3组患儿在麻醉苏醒烦躁评分、Aldrete 改良评分和苏醒时间比较,差异有统计学意义（P ＜0．05）,3组患儿出室时间比较,差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论术后采用1．00 mg／kg 丙泊酚静脉注射2次,预防小儿术后躁动效果明显,安全性好,具有重要的临床参考价值。     

基于上转化发光免疫层析技术建立发热伴血小板减少综合征病毒总抗体快速检测方法

目的基于上转化发光(UPT)免疫层析技术,建立发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)总抗体的现场快速检测方法。方法将SFTSV重组NP蛋白与上转化发光颗粒(UCP)偶联,制备UCP-NP免疫层析试纸条,评价该试纸条检测SFTSV总抗体的灵敏性、特异性和稳定性,并检测SFTSV血清254份,与酶联免疫法(ELISA)比较。结果该方法可在15min内完成SFTSV总抗体检测,可检测1∶500稀释度的SFTSV阳性血清,与其他出血热病毒无交叉反应,加样14d内稳定性较高。UPT免疫层析法与ELISA法检测临床血清样品一致性极高(Kappa=0.967),约登指数为0.973。结论建立了基于UPT免疫层析技术的SFTSV总抗体快速检测方法,该方法灵敏、特异,且操作简便、快速,结果稳定,适合在基层门诊和体检现场推广。     

发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒非结构蛋白NSs的原核表达及初步鉴定

目的克隆、表达发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)非结构蛋白NSs,对其功能初步鉴定。方法采用PCR法扩增经密码子优化后的SFTSV NSs基因,并克隆至PGEX-4T-2载体中,构建原核表达载体PGEX-4T-2-NSs,经酶切、测序鉴定后转化表达菌BL21(DE3),再经诱导、纯化得到谷胱甘肽S-转移酶(GST)-NSs融合蛋白,用Western Blot验证融合蛋白GST-NSs的抗原性。结果成功构建了GST-NSs融合蛋白原核表达载体,并在BL21细菌中获得高效表达;纯化后的融合蛋白具有良好的抗原性。结论实现了SFTSV重组NSs蛋白的原核高效表达,为进一步深入研究其结构与功能奠定了基础。     

2017—2019年云浮市人民医院抗菌药物不良反应分析

目的 统计云浮市人民医院2017-2019年抗菌药物不良反应（ADR）发生例数,探讨ADR发生的原因。方法 回顾性分析2017-2019年云浮市人民医院上报广东省药品不良反应监测中心的抗菌药物相关的ADR的病例,统计发生ADR的患者的一般情况,包括年龄、性别、ADR发生的时间、ADR的类型、ADR涉及的具体表现等。结果 2017-2019年本院共上报抗菌药物ADR 97例,共涉及11种抗菌药物,包括头孢菌素类、喹诺酮类、碳青霉烯类等抗菌药物,其中严重ADR 8例,上报的ADR给药途径绝大部分为静脉给药,经停药对症治疗后基本上都能好转,仅1例未见好转。结论 作为本地区最大的三甲医院,收治患者众多,抗菌药物使用量大,但本院的抗菌药物ADR上报例数相对少于国内同样规模的医院,抗菌药物引起的ADR对人体可造成不同程度的损伤,ADR值得引起重视,应加强ADR的上报工作。     

单侧唇裂红唇微结构成形

目的：提出单侧唇裂红唇微结构成形的设计原则和整复方法。材料：18例单侧孵裂患儿,年龄3-6个月,其中单侧完命唇裂6例,单侧不全唇裂12例。方法：18例单侧唇裂患儿在唇裂一期整复术时均按照红唇微结构成形的设计原则同期整复红唇。分别于术后即刻、术后1个月及术后6个月进行随访评估。评估方法包括主观视觉效果和干性黏膜高度恢复率。结果：远期红唇主观视觉效果评估,88．9％的患者为好的结果;远期干性黏膜高度恢复率为99．6％。结论：红唇微结构成形不仅可再造唇弓嵴的连续性。而且可恢复于性黏膜正常的高度及唇吻线,最理想地整复红唇结构形态。     

剖宫术产妇输葡萄糖对新生儿的影响

剖宫术术中输注葡萄糖过多会引起新生儿医源性低血糖［１］。我院对３０例健康产妇在硬膜外阻滞下剖宫产术术中输注林格氏液和不同剂量的葡萄糖时,测定胎儿脐带血血糖、胰岛素、Ｃ肽,以确定手术时输注葡萄糖的合适剂量。１　对象和方法３０例健康产妇,年龄为２０～３０岁,体重５５～７２ｋｇ,随机分为三组。甲组１０例输林格氏液,乙组１０例输１０克葡萄糖后平衡液维持,丙组１０例输２０克葡萄糖后平衡液维持,输葡萄糖者均在胎儿剖出前输完。手术时间约１小时３０分,术中输液量在１０００～１５００ｍｌ。全组均行连续硬膜外阻滞,…     

严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)人源性单链抗体文库的构建

目的构建人源性严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)单链抗体(scFv)文库,并用SFTSV颗粒对文库进行初步筛选。方法提取8例SFTS恢复期患者外周血淋巴细胞的总RNA,逆转录为cDNA;并以此为模板PCR扩增人源抗体轻链库(Vκ和Vλ)和重链库(VH),再经过重叠PCR随机拼接成scFv基因文库,最后克隆入噬菌粒载体pComb3XSS中,将重组噬菌粒电转化感受态XL1-Blue细胞,得到SFTSV抗体文库,检测文库库容及多样性,并用SFTSV颗粒作抗原对抗体文库进行初步筛选。结果构建的人源SFTSV抗体文库的库容为2.8×10~7,测序结果表明文库多样性好,经过初步筛选获得21个克隆的人源化scFv,具有与SFTSV颗粒结合的活性。结论成功构建了人源抗SFTSV的scFv文库。     

流感及H5N1亚型禽流感病毒液相检测芯片的制备

目的 建立利用液相芯片技术检测甲、乙型流感和H5N1亚型高致病性禽流感病毒的方法,并对该方法进行评价。方法 对GenBank中甲型流感病毒的NP、乙型流感病毒的HA以及高致病性禽流感病毒(H5N1)的H5、N1基因片段序列进行同源性比对,根据保守序列,设计针对各基因的简并引物和寡核苷酸探针,制备探针偶联微球,将样本核酸多重PCR扩增产物与微球进行杂交,以Bio-Plex液相芯片检测系统进行芯片检测。结果 该方法可以对甲型流感病毒的NP基因、乙型流感病毒的HA基因以及高致病性禽流感病毒(H5N1)的H5、N1基因同时进行检测,病毒核酸的最低检出量为1pg,检测特异性高。结论 成功构建了甲、乙型流感病毒和H5N1亚型高致病性禽流感病毒液相芯片检测系统,为流感、禽流感的快速检测、诊断奠定了基础。