小鼠内皮抑制素真核质粒的构建表达及其体外活性

目的构建小鼠内皮抑制素(endostatin)真核表达质粒,进行分泌性表达,研究其体外生物学活性,以进一步用于肿瘤的基因治疗。方法人工合成小鼠Igκ轻链信号肽序列,RT-PCR获得小鼠内皮抑制素编码序列,一起克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,对其进行酶切鉴定和序列分析。重组质粒经脂质体介导转染受体细胞BHK-21,ELISA检测细胞培养上清中内皮抑制素的含量。用此上清作用于经bFGF刺激的ECV304内皮细胞和HepG2肝癌细胞,MTT法检测细胞的增殖。结果经酶切鉴定及DNA测序分析,Igκ信号肽序列及内皮抑制素编码序列成功克隆到目的位点上,其转染细胞上清中可以检测到分泌出的内皮抑制素,含量为(65.5±10.9)ng/106细胞;并且可以抑制ECV304内皮细胞的增殖,抑制率约为29.2%,而对HepG2肝癌细胞增殖没有影响。结论成功构建了小鼠内皮抑制素真核质粒,其分泌性表达产物可以抑制内皮细胞的增殖,具有较好的生物学活性。     

KLF6基因在原发性肝癌中的表达

目的 通过研究潜在抑癌基因KLF6在肝细胞癌的表达,探讨KLF6基因作为肝癌抑制基因的可能性.方法 分别用荧光定量PCR、半定量RT-PCR和Western blot方法检测肝细胞癌及癌旁组织中KLF6基因在mRNA及蛋白水平的表达变化.结果 实时荧光定量PCR显示经过看家基因GAPDH标化的KLF6 cDNA 起始浓度,在配对癌旁组织约为肝癌组织的3倍.26例肝癌组织的KLF6 mRNA表达水平与配对癌旁组织相比,差异具有显著性意义(P<0.01).在肝癌细胞株HepG2及Hep3B,KLF6 mRNA的表达亦显著低于正常对照细胞L02(P<0.01).实验还发现,在肝细胞癌中KLF6蛋白表达变化与mRNA表达变化一致,即KLF6蛋白在癌组织及肝癌细胞的表达明显低于癌旁组织及L02(P<0.01).结论 KLF6表达下调可能是肝细胞癌的遗传学改变之一, KLF6基因可能为新的肝癌相关抑癌基因.     

以腹痛腰痛为主要表现的血栓性血小板减少性紫癜/溶血性尿毒症综合征一例

1 病历 患者,男性,70岁,因疼痛1周,意识障碍4 d平车入院.患者2009年4月2日起无明显诱因出现左侧腰腹隐痛,为左上腹、左侧腰部持续性隐痛,阵发性加重,至当地医院住院治疗,CT检查示左肾囊肿,诊断为＂左肾囊肿＂,予抗感染（氨苄青霉素、克林霉素）及＂曲马多＂镇痛等治疗,病情无好转,并于4月5日起出现意识障碍,不能正确回答问题或问之不应,偶尔诉头痛,当时查血红蛋白 61 g/L,分别于4月5日、6及8、9日4次输注浓缩红细胞治疗（具体不详）,于4月8日起出现尿深黄如浓茶,为求进一步诊治于2009年4月9日入本院.     

胶囊内镜诊断门脉高压性肠病并出血1例

门脉高压性肠病（portal hypertensive enteropathy,PHE）并出血临床少见。本文报道1例肝硬化合并门脉高压性肠病并出血的临床特点和内镜特征,并结合复习文献,以期提高临床医师对PHE的认识水平。     

Frequent down-regulation and deletion of KLF6 in primary hepatocellular carcinoma

Kruppel-like factor 6 (KLF6) was reported as tumor suppressor in multiple cancers. However, loss of chromosomal locus spanning KLF6 is relatively infrequent in previous published studies. To explore the role of KLF6 in hepatocellular carcinoma (HCC), we examined the gene for expression change, loss of heterozygosity (LOH) and mutation in 26 HCC samples. The expression levels of KLF6 were significantly down-regulated in HCCs, as detected by qRT-PCR. LOH occurred in 11 (52%) of 21 tumors, and all the samples ...     

内镜黏膜下剥离术在治疗直肠类癌中的价值探讨

直肠类癌是一种少见的神经内分泌肿瘤,通常在黏膜下层生长,表现为黏膜下肿物,是一种低度恶性肿瘤.随着结肠镜检查的广泛应用,其诊断率逐年升高.在治疗上,以往以外科手术为主,但手术创伤较大;内镜电切治疗仅适用于小而表浅病灶;内镜黏膜切除术(EMR)通过分块的方法来完成对病灶的切除,不能获得完整的病理学资料,且增加了肿瘤残留及复发的概率[1].我们对该类癌患者进行了内镜黏膜下剥离术(ESD)治疗,效果较好,报道如下.     

反流性食管炎

反流性食管炎是指胃十二指肠内容物反流入食管引起的食管黏膜破损。临床表现主要为反酸和烧心,也可有胸痛或吞咽梗阻等不典型食管症状甚至咳嗽、声嘶、咽炎等食管外症状。诊断依赖于胃镜检查。治疗以强力抑酸为主,有胃排空障碍者加用促动力剂可能增加疗效,疗程一般需8周。纠正不良的生活饮食习惯,加以足量足疗程的药物治疗大多可缓解症状及愈合黏膜。但本病停药易复发,需长期维持治疗,极少数疗效不佳或出现严重并发症者可考虑内镜治疗或手术治疗。