某教学医院三年间铜绿假单胞菌临床特征与耐药趋势分析

目的了解本院分离的铜绿假单胞菌临床的分布特征和耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集本院2014年1月～2016年12月住院患者中分离的474株铜绿假单胞菌,使用VITEK-2 compact进行鉴定和药敏分析,应用WHONET 5.6和SPSS16.0软件进行统计分析。结果临床分离出革兰阴性菌2 407株,其中铜绿假单胞菌474株,检出率为19.7%。主要分离自痰液362株(占76.4%),其次为伤口分泌物,占7.6%;ICU及呼吸科的铜绿假单胞菌检出率分别为21.5%和18.3%;铜绿假单胞菌在历年的分离率均为第2位,其对阿米卡星、妥布霉素的耐药性呈上升趋势,差异有统计学意义(P0.05),对其余药物3年间耐药率的差异无统计学意义(P0.05)。结论医院获得性铜绿假单胞菌感染主要分布于侵入性操作多、抗菌药物应用广、住院周期长的临床科室,以呼吸道感染为主,3年间对抗菌药物的耐药趋势并没有明显下降,应加强抗菌药物的分级管理和耐药性监测,指导临床合理使用抗菌药物。     

三种肺炎支原体检测方法的比较

目的比较3种检测肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，Mp）的方法，寻求肺炎支原体的快速、准确和特异的检测手段。方法选择198例社区获得性肺炎（CAP）患者中临床证实的45例肺炎支原体感染者的痰液、血清标本，分别经肺炎支原体培养、肺炎支原体核酸PCR扩增和血清学检测（IgM和IgG），采用Х^2检验比较3种方法的检测结果。结果3种方法检测Mp的阳性率分别为44．4％、71．1％和86．7％和，PCR法与培养法比较差异有显著性（Х^2=17．764，P〈0．001）；血清学与培养法比较差异有显著性（Х^2=6．559，P〈0．01）；PCR法与血清学比较差异无显著性（Х^2=3．269，P=0．071）。结论PCR法和血清学检测是肺炎支原体病原体诊断的有效手段。     

卵黄抗体lgY用于诊断和治疗的研究进展

鸡卵黄免疫球蛋白(egg yolk immunoglobulin)又称lgY或卵黄抗体,是用特异性抗原注射未经免疫的产蛋母鸡后,母鸡血液中的抗体转移到蛋黄中,成为蛋黄中唯一存在的抗体[1].     

结膜吸吮线虫实验室感染大绕眼果蝇

在安徽黄山地区捕捉有绕眼习性的果蝇,将结膜吸吮线虫初产蚴混于果汁中,实验室喂饲感染果蝇,常温饲养20 d后,检查果蝇的感染情况。结果显示,大绕眼果蝇（Amiota magna）和冈田绕眼果蝇（A. okadai）的阳性率分别为30%（30/100）和21.6%（55/255）,两者间的差异无统计学意义（χ²=0.058 4, P>0.05）。将采自大绕眼果蝇的结膜吸吮线虫感染期幼虫接种家兔,35 d后在兔结膜囊内检获结膜吸吮线虫成虫及其初产蚴,表明在实验室条件下,结膜吸吮线虫可感染大绕眼果蝇。     

轮状病毒SA11衣壳蛋白VP7的毕赤酵母重组表达及IgY的制备

目的 真核重组表达轮状病毒(rotavirus,RV)SA11株VP7衣壳蛋白并制备、纯化其卵黄抗体(IgY).方法 将SA11标准株在MAl04细胞中增殖,收集病毒液.从病毒液中提取RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增获得SA11株衣壳蛋白VP7的长度为978 bp的编码基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体上,进行测序.将重组体哑克隆到分泌表达载体pPICZαB中,再将重组体转化人大肠杆菌Top10中,用BstXI线性化酶切重组质粒后电转入毕赤酵母X-33中,进行测序.转染成功的菌落再用甲醇诱导表达,亲和层析法纯化重组蛋白抗原,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白免疫印迹(Western blotting)鉴定,用重组蛋白免疫罗曼母鸡,收集鸡蛋,Western blotting鉴定、纯化IsY.结果 细胞增殖液中提取的RNA银染可见11个条带,成功构建了含pPICZαB-SA11 VP7的毕赤酵母X-33,毕赤酵母X-33分泌的融合蛋白被收集、纯化.毕赤酵母X-33表达的SA11 VP7的衣壳蛋白经Western blotting验证与预测蛋白相对分子质量40 200相符.从鸡蛋中提取的鸡的IgY验证为抗VP7的抗体.纯度可达到95%,1个鸡蛋能产10.2 mg的IgY.结论 抗重组RV SA11衣壳蛋白VP7和IgY的成功制备为疫苗和诊断试剂的开发奠定了基础.     

IgY双抗体夹心ELISA法现场诊断血吸虫病的研究

目的 评价IgY的双抗体夹心ELISA法(S-ELISA)现场诊断血吸虫病的价值.方法 用Lowry法检测包被物的含量,将抗SEA的IgY包被酶标反应板,用棋盘滴定法确定最适抗体包被量以及血清稀释度,建立S-ELISA .以改良加藤厚涂片法 (Kato-Katz法) 检测结果为金标准,采用S-ELISA方法检测血吸虫病流行区部分人群血清循环抗原,并同时用SEA-IHA检测循环抗体,比较两者的敏感性和特异性.结果 检测疫区人群174例,Kato-Katz法、S-ELISA和SEA-IHA阳性率分别是6.90%、22.41%和15.52%,经χ2 检验,P＜0.01,差异有极显著性意义;S-ELISA与SEA-IHA比较,两种方法的敏感性和特异性之间的差异无显著性意义(P＞0.05).结论 S-ELISA诊断血吸虫病具有较好的敏感性和特异性,可以用于疫区筛查血吸虫病.     

基于IgY的ELISA用于日本血吸虫病循环抗原的检测

目的 以鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)替代哺乳动物来源的IgG抗体,建立双抗体夹心ELISA用于日本血吸虫病的诊断.方法 制备并纯化抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的卵黄抗体IgY和抗SEA的兔多克隆IgG抗体;以抗SEA的IgG为捕获抗体,IgY为检测抗体的双抗体夹心ELISA诊断方法,共检测血清443份,其中急性血吸虫病患者血清68例,慢性血吸虫病患者180例,正常人100例,肺吸虫感染者20例,华支睾吸虫感染者48例和钩虫感染者血清27例.探讨基于IgY的循环抗原检测的应用价值.结果 成功制备并鉴定了特异性IgY和lgG抗体,建立了双抗体夹心ELISA检测体系;检测急性血吸虫病患者和慢性血吸虫病患者血清的阳性率分别为79.4%和64.4%,最低灵敏度为9.3μg/L;正常人血清的阴性率为92%;与肺吸虫、华支睾吸虫、钩虫感染者血清的交叉反应分别为20%、20.8%、14.8%.结论 建立了基于lgY的双抗夹心ELISA检测体系,用于日本血吸虫SEA的检测具有一定特异性和较高的敏感性,可试用于日本血吸虫病的辅助诊断.     

合肥地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型及耐药性分析

目的 研究合肥市临床分离甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的SCCmec分型及药物敏感性,以了解本地区MRSA流行株的耐药表型和基因型特征。方法 从5家教学医院随机选取2016年1月-2021年12月264株非重复MRSA菌株,头孢西丁纸片扩散法筛查MRSA,PCR扩增mecA基因,多重PCR进行MRSA的SCCmec分型。WHONET5.6软件分析不同SCCmec型别MRSA菌株对抗菌药物的敏感性。结果 264株MRSA SCCmecⅡ型156株(59.1%),SCCmecⅣa型92株(34.8%),SCCmecⅢ型4株(1.5%),12株未分型(4.5%)。156株SCCmecⅡ型和92株SCCmecⅣa型MRSA对万古霉素、利奈唑胺、达托霉素和替加环素的敏感率为100%。Ⅱ型对环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和庆大霉素对的耐药性高于Ⅳa型,差异具有统计学意义。Ⅱ型和Ⅳa红霉素、克林霉素、四环素、复方磺胺甲噁唑和利福平在分型的耐药性差异无统计学意义。     

两种方法检测孕妇乙肝表面抗原的结果分析

目的分析酶免疫法与胶体金法检测孕妇乙肝表面抗原的结果,为临床提供参考依据。方法利用酶免疫法测定本院孕妇乙肝5项,收集乙肝表面抗原阳性血清与阴性血清共260例,其中阳性160例,阴性100例,采用胶体金法检测,对检测结果进行统计分析。结果酶免疫法与胶体金检测共有150例阳性结果相吻合,100例阴性结果完全相同,10例结果不符合,金标法阳性预测率为98.3%,特异性为100.0%,灵敏度为98.1%,准确度为98.2%,两者比较差异无统计学意义。结论金标法与酶免疫法检测相比,具有快速、简便等优点,能满足临产孕妇急诊检测的需要,可以用来筛查,但不能完全取代酶免疫法。     

卵黄抗体IgY用于诊断和治疗的研究进展

鸡卵黄免疫球蛋白（eggyolk immunoglobulin）又称IgY或卵黄抗体，是用特异性抗原注射未经免疫的产蛋母鸡后．母鸡血液中的抗体转移到蛋黄中，成为蛋黄中唯一存在的抗体。近年来卵黄抗体逐渐引起人们的注意，而且得到越来越广泛的应用．主要与其生物学的优势及其制备简单，保存方便等优点有关。