正交设计在确定混合血清法检测丙型肝炎抗体实验条件中的应用

目的探讨封闭温度、时间、ＢＳＡ浓度、Ｔｗｅｎ２０浓度及混合标本个数５因素各２水平对混合血清法检测抗－ＨＣＶ的影响。方法应用正交设计的方法进行实验分组，采用ＥＩＡ法检测抗－ＨＣＶ。结果封闭条件为０．５％ＢＳＡ，３７℃，３０ｍｉｎ；洗涤液为０．１５％Ｔｗｅｅｎ２０，混合标本个数为５。采用正交设计的实验方法可减少７５％的实验次数。结论在进行多因素的实验研究时，正交设计是一种高效的设计方法。     

双抗原夹心法检测抗-HIV(1+2)

抗-HIV（1+2）初筛试验大多采用间接ELISA方法，但存在部分假阳性反应。笔者以确证试验蛋白印迹法（WB）结果作对照，采用双抗原夹心法检测抗-HIV（1+2）确证阳性和初筛试验结果灰区标本，结果显示，双抗原夹心法检测抗-HIV（1+2）比间接ELISA法具有更好的准确性，更适用于抗-HIV（1+2）的初筛检测，缩短了窗口期，提高了对感染后的检出率，对于HIV感染者的早期发现，鉴别诊断具有重要的意义。现报告如下。 1 材料与方法 1.1 标本取自1995年以来本站初筛阳性的标本，其中结果不确定标本60份，确证阳性结果14份；总后卫生部及卫生部临床检验中心抗-HIV（1+2）室间质评血清40份（预期结果阳性22份，阴性18份）；抗-HIV（1+2）4Ncu/ml定值血清，由卫生部临床检验中心提供。 1.2 检测试剂间接ELISA初筛采用K、X、J 3个厂家的试剂；双抗原夹心ELISA初筛采用W及A厂家试剂。确证试验由江苏省AIDS确认中心实验室采用蛋白印迹方法（WB）检测。 1.3 实验方法各项实验均严格按照操作说明书进行。对于初筛阳性的样本，再次进行重复检测，复检时除原检测试剂外，尚需同时选择另一种初筛试剂予以复检，如均呈阳性或有一份阳性，该标本送确证实验室进一步做确证实验。 1.4 仪器设备 Perkin Elmer960型PCR分析仪（U.S.A），GBS 全自动洗板机（U.S.A），CliniBio 128型全自动绘图酶标仪（Australia）。     

20例献血员HIV的调查分析

目的：对献血员HIV感染进行调查分析。方法：采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法初筛，蛋白印迹（WB）法确证。结果：1995年－2000年共发现并确证HIV－1型感染20例（0．124‰），结论：严格进行献血员HIV感染检测是十分必要的。     

抗-HCV筛查实验设置“灰区范围”的探讨

目的通过合理设置抗-HCV筛查实验"灰区范围",使被技术认为阴性却含有较高OD值读数的可疑样本,增加一些被发现早期感染(血清阳转)的合理可信机会,避免抗-HCV漏检现象的发生。方法采用百分位数法,对阴性和阳性样本分别以单侧95%、5%计算百分数P9-5、P5+。采用极限稀释法对阳性样本进行稀释测定,绘制反应曲线图,发现抗-HCV反应规律。结果阳性样本P5+=0.588、阴性样本P9-5=0.761。稀释阳性样本Cov值随稀释位数增加而逐渐下降,在阳性和阴性结果转换期间,曲线由陡峭开始比较平坦,灰区样本Cov均值=0.731、SD=0.410。结论抗-HCV筛查实验Cov值下浮30%范围视为"灰区"较为合适,可以弥补ELISA试剂盒cut off值判断阴阳性的缺陷,可以增加被发现早期感染(血清阳转)合理可信的机会。     

RSP 200/8全自动加样器校验结果分析

目的评价RSP 200/8全自动加样器的准确度、精密度。方法应用电子分析天平称量加样针吸取蒸溜水的质量来进行校验。结果 RSP 200/8全自动加样器使用5年,每年校验1次,8根加样针加样量为10μL(10 mg),CV≤3.5%;加样量为100μL(100 mg),CV≤0.75%。结论 5次校验结果符合预期要求,能满足加样的需求,但随着使用年限的延长,要加强校验工作,确保自动加样器的准确性、可靠性。     

HIV合并HCV重叠感染20例的调查分析

目的 调查并分析人免疫缺陷病毒（HIV）与丙型肝炎病毒（HCV）重叠感染情况。方法 用ELISA法检测抗－HCV、抗－HIV其确证实验分别采用蛋白印迹法（WB）和微板核酸杂交－ELISA方法。结果 20例HIV－1型感染全部抗－HCV阳性。结论 HIV与HCV同属经血液传播,发生重叠感染的机率很高。     

不同厂家ELISA试剂盒检测抗-HIV1＋2的评价

目前,各级血站及医疗机构普遍采用间接ELISA法检测献血血清抗-HIV1 2,由于其方法学与试剂质量方面的原因,易产生假阳性与假阴性,这对于保证血液质量和及时供应均有不利的影响,因此推荐一种适合检测抗-HIV1 2的试剂盒十分迫切,为此笔对五种ELISA试剂盒进行了对比,现报道如下。     

献血者献血后皮下瘀血原因分析及护理

皮下瘀血是献血后一种常见的副反应 ,常给献血者身心带来一定痛苦。如何减少瘀血的发生 ,最大限度地减轻献血者痛苦 ,笔者对此做了调查 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　观察对象　本市街头无偿献血者 6 5 2 3名 ,年龄 18～ 5 5周岁 ,其中初次献血 3475人 ,二次或以上献血 30 4 8人。1.2　方法　用ACD B采血袋 ,按操作规程采集 2 0 0ml或 4 0 0ml全血。采血针 16G。1.3　统计　采用 χ2 检验。2　结果献血者献血后皮下瘀血原因见附表。 6 5 2 3名献血者中有 6 7名针眼周围皮下出现瘀血 ,瘀血发生率占 1.0 3%。经过积极的对症处理 ,…     

HBsAg金标试剂质量评价

目的　优选一种适宜于献血员HBsAg筛查的试验试剂。方法　采用HBsAg金标试纸法对卫生部临检中心HBsAg考核盘一套、质控定值血清 ,与本室留取ELISA法阴性标本、不同滴度的阳性标本等进行检测并做统计学处理。结果　四种厂家金标试剂特异性均为 10 0 % ,灵敏度分别为 90 .90 %、85 .71%、84 .5 0 %、76 .92 % ,总符合率分别为 95 .0 8% (116 / 12 2 )、92 .0 6 % (116 / 12 6 )、91.33% (116 / 12 7)、86 .5 6 % (116 / 134) ,第四种试剂与预期值差异具有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　不同厂家金标试剂质量存在明显差异 ,因此要选择具有特异性强、灵敏度高的试剂 ,以更加适宜于献血员的筛查 ,降低成品血液的报废率     

4种试剂检测混合血清中抗—HCV的比较

目的研究不同试剂对混合血清法检测抗－ＨＣＶ的影响。方法 每５个血清标本构成一个混合标本并保护混合血清中每个标本的稀释度与单个血清检验法相同，采用酶标免疫法检测抗－ＨＣＶ。结果 以末混合血清为对照，加拿磊试剂检测的阳性，阴性标本均与对照无差别（Ｐ〈０．０１）；亚利、科华试剂检测阳性混合血清与对照组无差别（Ｐ〉０．１０），检测阴性混合血清Ａ（ＯＤ）值虽有增高（Ｐ〈０．０１），但距ｃｕｔ ｏｆｆ值较远