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目的分子信标探针在芯片表面的固定结合是限制其在芯片技术领域运用的难题。本研究拟寻找一种将分子信标探针固定在芯片表面的新方法,同时对其中重要影响因素进行优化探讨。方法本实验设计一种带单侧延长臂分子信标探针,固定在芯片表面进行杂交、扫描等后续实验。提高杂交效率部分优化包括:分子信标探针浓度;杂交温度、杂交时间;杂交液配方;4种分子对分子信标荧光信号比较。结果较理想区分阴阳性信号强度理想的探针浓度:Cy3-BDH分子信标探针浓度约10μmol/L,FAM-DABCLYE约15μmol/L。讨论单侧延长臂分子信标特异性高、敏感性高、技术难度低,对中、高密度芯片杂交可做到“点对点杂交”。 相似文献
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目的研究运用压电石英晶体生物传感器对产气荚膜梭菌α毒素(CPα)进行检测的方法和反应条件。方法按照碱基配对的原则,设计特异的产气荚膜梭菌α毒素基因寡核苷酸探针并利用巯基自组装技术固定在石英晶体上,运用压电石英晶体生物传感器的“质量效应”对聚合酶链反应(PCR)扩增得到的产气荚膜梭菌α毒素靶基因进行杂交检测,并探讨不同pH值和不同离子强度的缓冲液对检测的影响。结果压电石英晶体生物传感器成功检测出产气荚膜梭菌α毒素;pH7.6的缓冲液和0.64mol/L的NaCl溶液最适合于检测。结论压电石英晶体生物传感器能够有效地检测产气荚膜梭菌α毒素,有望对临床上开展毒素诊断提供一种新的手段。 相似文献
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目的探讨经皮肾微造瘘输尿管镜下碎石术治疗复杂肾结石的疗效及安全性。方法对89例接受经皮肾微造瘘输尿管镜下碎石术治疗的复杂性肾结石患者的临床资料进行了回顾性分析。结果89例患者中75例成功行一期取石术,2例中转开放手术;一期手术取净结石63例,二期手术取净结石9例,三期手术取净结石2例,结石总取净率83.1%,手术时间55~150min,术中出血量30—100ml;肾造瘘管留置时间平均7d,术后平均住院8.5d,来出现严重的并发症。结论经皮肾微造瘘输尿管镜下碎石具有损伤小、恢复快、住院时间短、结石清除率高、并发症少等优点,是治疗复杂性肾结石较好的微创方法。 相似文献
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目的 设计结核分枝杆菌耐乙胺丁醇embB330codon位点分子信标,运用荧光显微镜观测分子DNA探针与embB330codon扩增产物杂交后的荧光信号,比较该位点突变株与标准株.方法 运用软件Beacon designer设计embB基因包含330codon的分子信标,应用荧光显微镜检测embB330codon扩增片段与探针杂交后荧光信号,比较扩增产物测序结果.结果 通过荧光显微镜观测到结核标准株及embB330codon突变株PCR产物与探针杂交后荧光信号差异有统计学意义;33株耐乙胺丁醇组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐乙胺丁醇组embB330codon突变检出率为3%,测序法突变检出率为3%.结论 分子信标技术可以有效检测embB330codon单碱基靶点突变,应用荧光显微镜观测荧光杂交信号非常灵敏. 相似文献
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目的 观察生物人工材料(biological artificial material,BAM)人工骨修复下肢负重骨骨缺损的临床效果. 方法 选择2008年1月- 2010年12月收治的采用BAM人工骨进行手术植入修复骨缺损的32例下肢负重骨骨缺损患者,年龄21 ~ 77岁,平均32.5岁.骨缺损体积为1.0 cm×2.0 cm×2.5 cm~3.0 cm×3.5 cm ×5.0 cm,平均15.4 cm3.骨缺损病因主要为粉碎性骨折、骨囊肿、骨纤维结构不良、慢性骨髓炎等.术后即刻及术后1,2,3,5,7,9,12,18个月进行随访,观察术后全身及切口局部反应、血钙/磷改变情况、骨缺损修复及患肢负重功能恢复情况. 结果 所有患者均得到有效随访9 ~18个月,平均10.5个月.术后至末次随访所有患者均无局部或全身移植物排斥反应.随访X线片示术后3个月BAM人工骨植入区与骨缺损周围的骨组织之间界限模糊,有新生骨形成;术后6个月BAM人工骨植入区明显有新骨长入,人工骨材料与骨组织融为一体,骨缺损已基本修复.术后患肢完全负重时间为术后2.5 ~4个月,平均3.2个月. 结论 BAM人工骨具有良好的生物相容性和骨诱导作用,其内结构可以保持一定的刚度和强度,可用于下肢负重骨骨缺损的修复. 相似文献
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目的探讨抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗角蛋白(AKA)抗体联合检测在诊断类风湿关节炎(RA)中的临床意义。方法收集169例RA患者和105例健康体检者血清标本,检测其抗CCP抗体、抗AKA抗体的浓度,并对结果进行统计分析。结果 RA组抗CCP抗体、抗AKA抗体单独检测的灵敏度分别为80.5%、48.5%,联合检测的灵敏度为91.1%;健康体检组抗CCP抗体、抗AKA抗体单独检测的灵敏度分别为8.7%、2.9%,联合检测的灵敏度为17.3%;特异性分别为91.3%、97.1%,联合检测的特异性为82.7%。结论抗CCP抗体、抗AKA抗体都是诊断早期RA的较好指标,联合检测更能提高其灵敏度,能有效提高早期RA的诊断率,降低漏诊率,但特异性偏低。 相似文献
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