CD133+细胞的干性鉴定及131I-CD133抗体对其体内外抑制作用

目的：研究CD133+细胞的干性鉴定和131I-CD133抗体在体内外对人肝癌CD133+-HepG2干细胞的抑制作用。方法：氯胺T法制备并鉴定131I-CD133抗体;免疫磁珠（magnetic-activated cell sorting,MACS）分选CD133+-HepG2细胞;流式细胞仪（flow cytometry,FCM）检测分选前后CD133表达率;体外克隆形成实验、成球实验和体内成瘤实验验证其干细胞特性;将分选出的CD133+细胞分组为CD133抗体、131I、131I-CD133抗体和131I+CD133抗体 4个组,MTT法检测不同处理后不同组中CD133+细胞生长抑制率;成功构建人肝癌CD133+-HepG2移植瘤模型;随机分4组,1次/2 d给予尾静脉用药,共14次。4周后,处死小鼠,比较肿瘤的体积、质量、计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤组织病理学改变。结果：131I-CD133抗体标记率为89.34%,放化纯度为98.21%。流式显示分选前后CD133表达率分别为（1.78±0.54）%和（98.46±0.97）%。成球实验、克隆形成实验和裸鼠成瘤实验显现CD133+细胞相对于CD133-细胞更具有干细胞特性。131I-CD133抗体治疗组体外对细胞抑制率及体内抑瘤率明显高于其余各实验组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：131I-CD133抗体在体内外均能有效抑制人肝癌CD133+-HepG2细胞的生长。     

健脾和胃合剂缓解胰腺癌伽玛刀放疗后胃肠道反应的临床观察

目的观察健脾和胃合剂缓解胰腺癌伽玛刀放疗后出现胃肠道反应的临床疗效。方法对60例行伽玛刀放疗的胰腺癌患者进行回顾性分析,采用随机分组法将患者分为实验组和对照组,伽玛刀放疗第1天起,实验组给予肌肉注射胃复安联合口服健脾和胃合剂治疗,对照组给予肌肉注射胃复安治疗。观察伽玛刀放疗过程中和放疗结束后7 d内两组缓解胃肠道反应的临床疗效。结果实验组胃肠道反应总控制率明显高于对照组(P<0.05)。结论健脾和胃合剂具有益气健脾、和胃降逆之功效,能有效缓解胰腺癌伽玛刀放疗后胃肠道反应,改善患者食欲。     

131I标记CD133单链抗体对人肝癌CD133+HepG2干细胞的抑制作用

目的：研究131I标记CD133单链抗体(single chain rariable fragment, ScFv)在体外对人肝癌CD133+ HepG2干细胞的抑制作用。方法：免疫磁珠分选HepG2细胞,流式细胞术检测分选前后HepG2细胞的CD133表达率,克隆形成实验及体内成瘤实验验证CD133+ HepG2细胞的“干性”。氯胺T法131I标记CD133 ScFv并测定标记率、比活度、放射性浓度。将分选出的CD133+ HepG2细胞分为131I-CD133抗体治疗组、131I治疗组、CD133抗体治疗组和131I+CD133抗体治疗组,MTT法检测各组中对CD133+ HepG2细胞生长抑制的最适剂量和不同药物在12、48、72 h三个时间点对CD133+HepG2干细胞的生长抑制作用,流式细胞术检测各组细胞周期的变化。结果：分选的HepG2细胞的CD133表达率显著高于未分选细胞\[（97.71±113）% vs（1.52±0.78）%,t=1.13、P=0.000\]。CD133+ HepG2细胞相对于CD133- HepG2细胞具有更强的体外成球、克隆形成能力\[（4503±1.35）% vs (74±0.54)% ;t=3.92,P=0.000\]和体内成瘤能力。131I-CD133 ScFv的标记率为88.92%,放射化学纯度为98.63%。当131I为3.7 MBq/100 μl、CD133抗体为1 μg/100 μl时,对CD133+ HepG2细胞的抑制率最高,达（89.58±074）%;在此剂量下131I-CD133 ScFv治疗组对CD133+ HepG2细胞生长抑制率显著高于其余各实验组,且呈时间依赖性。 131I-CD133 ScFv治疗组G0/G1期细胞比例为（27.50±1.12）%,较其余各组均明显减少（P<0.05）。结论：成功制备的131I-CD133 ScFv在体外能有效抑制人肝癌CD133+ HepG2干细胞的生长。     

放射性肺炎中医分期辨证论治

放射性肺炎是肺癌、食管癌和乳腺癌等胸部肿瘤的放射治疗后常见且危害较大的并发症,多由于大剂量、大面积照射引起,其发生率为29.6％～50.3％,表现为急性放射性肺炎和肺纤维化.放射性肺炎临床表现为刺激性咳嗽、气急、高热、胸闷,严重影响患者的生活质量.西医治疗本病主要采用抗菌素、激素以及抗凝血及抗组胺制剂等治疗,虽有一定疗效,但不良反应较大,因此不宜作预防性给药或长期使用.中医学认为本病属于“肺痿”范畴,《金匮要略·肺痿肺痈咳嗽上气病脉证治》云“热在上焦者,因咳为肺痿.肺痿之病,从何得之？师曰：或从汗出,或从呕吐,或从消渴,小便利数,或从便难,又被快药下利,重亡津液,故得之”.     

中西医治疗化疗药物所治周围神经病变研究进展

正化疗是恶性肿瘤综合治疗的重要方法,而化疗药物引起的周围神经病变(chemotherapy induced peripheral neuropathy,CIPN)是临床常见的并发症之一。引起CIPN的化疗药物主要包括铂类、微管蛋白抑制剂(紫杉类、长春碱类等)、烷化剂、氟尿嘧啶类等,临床大多表现为以肢体远端为主的对称性感觉、运动及自主神经功能障碍,下肢最为多见。初期常表现为肢体末梢的感觉过敏和感觉异     

中医综合外治法治疗铂类化疗药物周围神经毒性临证探讨

周围神经毒性是铂类药物化疗后常见的并发症,影响患者生活质量及治疗进程,由于其神经毒性机制尚未明确,目前尚无标准的治疗方法.中医外治法近年在防治化疗毒副作用方面成果显著.自拟方通络散浴疗联合隔物灸治疗铂类周围神经毒性避免了药物胃肠道反应及肝肾损害,简便安全,在临床应用中取得了较为满意的疗效.     

131I-CD133mAb诱导CD133+HepG2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化

目的 研究131I-CD133mAb可诱导CD133+ HepG2肝癌干细胞间质-上皮逆转分化(mesenchymal-epithelial transition,MET)及可能分子机制.方法 ①用免疫磁珠分选法分选HepG2人肝癌细胞,采用流式细胞术检测分选前后CD133的表达率,体外成球和体内成瘤实验鉴定其干细胞特性.②氯胺T法制备131I标记CD133mAb并用γ免疫计数器检测标记率、放化纯度.用不同剂量(0、2.4、4.8、9.6 MBq)的131I-CD133mAb作用CD133+ HepG2细胞,用Transwell侵袭实验检测侵袭能力,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平.结果 流式细胞术显示分选前后CD133 表达率分别为(7.21±0.05)％和(95.26±0.05)％.CD133+细胞体外成球和体内成瘤能力强于CD133-细胞.γ免疫计数器检测131I-CD133抗体标记率为86.97％,放化纯度为98.84％.Transwell侵袭实验示131I-CD133mAb各处理组(2.4、4.8、9.6 MBq)24 h细胞穿过Matrigel胶的细胞分别为(107.7±3.2)、(76.3±2.5)、(44.0±3.0)/视野,显著少于对照组(0 MBq,P＜0.01).Western blot结果显示,与对照组(0 MBq)相比,131I-CD133 mAb(2.4、4.8、9.6 MBq)处理组N-cadherin和Vimentin的蛋白表达量降低(P＜0.01),E-cadherin的蛋白表达量增加(P＜0.01).结论 在体外131I-CD133mAb作用于人肝癌CD133+ HepG2细胞可诱导间质-上皮逆转分化.     

AG490对食管鳞癌Eca-109细胞增殖、凋亡及放疗敏感性的影响

目的研究Janus激酶抑制剂AG490对食管鳞癌Eca-109细胞增殖、凋亡及放疗敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法用不同浓度(0、25、50、100μmol/L)的AG490处理Eca-109细胞,采用MTT法检测细胞增殖,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞放疗敏感性,Western blot检测各组细胞Stat3、p-Stat3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与对照组比较,AG490各浓度组(25、50、100μmol/L)在AG490作用后第1～5天Eca-109细胞增殖减慢,呈量效-时效关系(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,AG490各浓度组(25、50、100μmol/L)在AG490作用48 h后Eca-109细胞凋亡率增加,呈量效关系(P<0.01)。与对照组比较,各剂量X射线照射后50μmol/L组细胞存活率降低,放射生物学参数SF2、D0、Dq、N值均降低(P<0.05),SERD0和SERDq值增加(P<0.05)。与对照组比较,AG49050μmol/L+4Gy组和AG490 50μmol/L组p-Stat3蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,AG490各浓度(50和100μmol/L)组Bcl-2的表达降低(P<0.05)、Bax的表达增加(P<0.05)。结论 AG490抑制Eca-109细胞增殖,增加细胞凋亡,增加放疗敏感性,其机制可能是通过阻断Stat3蛋白的活化,调控凋亡蛋白(Bcl-2和Bax)的表达。