日本血吸虫酚氧化酶的组化定位研究

目的观察酚氧化酶(phenol oxidase,PO)在日本血吸虫成虫的组织学分布.方法酚氧化酶组化方法:将42 d虫龄的日本血吸虫活成虫置含25 mmol/L邻苯二酚的磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中,37℃孵育30 min后,转移虫体至载玻片上,吸去虫体表面液体,将其中一部分虫体置Olym-pus显微镜下观察酚氧化酶在虫体的组织学分布.荧光组织化学方法:经上述过程处理后,在另一部分虫体上滴加2滴含0.05%戊巴比妥钠的PBS溶液,然后置Leica荧光显微镜下观察酚氧化酶在虫体的组织学分布.结果酶组织化学方法显示,日本血吸虫酚氧化酶仅分布于雌虫卵黄腺及子宫内虫卵卵壳表面,呈现棕褐色显色反应;雌虫卵巢和雄虫均未发现酚氧化酶活性.然而,荧光组织化学方法显示,酚氧化酶除主要分布于雌虫卵黄腺及子宫内虫卵卵壳表面,呈现强荧光外,还少量分布于雄虫体壁表层,呈现弱荧光反应.结论不仅日本血吸虫雌虫含有酚氧化酶活性,而且雄虫也含酚氧化酶活性,只不过其含量少、活性低.荧光组织化学方法能更灵敏地显示日本血吸虫酚氧化酶活性,更适用于日本血吸虫酚氧化酶的组织学定位.     

5种拟钉螺酯酶同工酶酶谱的比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术，对湖北和四川两省５种拟钉螺的酯酶同工酶酶谱进行比较研究，并以湖北钉螺作对照，５种拟钉螺酯酶同工酶共分离出８条酶带，酶谱可分成３区，即ＥＳＴ－１、ＥＳＴ－２、ＥＳＴ－３，其基本特征与钉螺显著不同，很容易通过酶谱将拟钉螺与钉螺区分开，同时，５种拟钉螺的酯酶同工酶酶谱之间均存在一定的差异，说明拟钉螺种间酯酶同工酶存在多态，而种间差异程度似与地域隔离的远近有关。结果提示拟钉螺酯酶同工酶的酶谱特征既有助于拟钉螺属的鉴定，又有助于拟钉螺近缘种的区分，从而对拟钉螺的分类有较大的参考价值。     

重组人血管抑制因子Vasostatin对视网膜血管内皮细胞增殖的影响

目的 探讨重组人血管抑制因子Vasostatin对体外培养的恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF／6A)增殖的影响。方法 以bFGF刺激增殖，体外培养恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF／6A)至4代，分别加入不同质量浓度的重组人Vasostatin蛋白，并采用MTT法、^3H-TdR法检测2、4、6d时其对血管内皮细胞增殖抑制的作用，同时利用流式细胞仪对重组人Vasostatin蛋白是否诱导细胞凋亡进行了探讨。结果 MTT法、^3H-TdR两种方法均显示重组人Vasostatin蛋白以质量浓度依赖的方式抑制bFGF刺激的恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF／6A)的增殖。流式细胞仪检测显示加入重组人Vasostatin蛋白后，G0／G1期无明显的亚二倍体核形峰出现，其不是通过诱导细胞凋亡的方式来抑制细胞增殖的。结论 重组人Vasostatin蛋白在体外具有抑制bFGF诱导的血管内皮细胞增殖的作用，其有可能成为一种有效的血管新生抑制剂。     

冠状动脉微血管疾病评价技术现状与未来

正冠状动脉循环系统由三个部分组成:即近端的心外膜冠状动脉,直径从数毫米到500μm,几乎不产生对血流的阻力;中间部分的前小动脉,直径100~500μm,只对血流产生微小的阻力;远端部分的微小动脉,直径100μm,是血流阻力的主要产生部位。后两者共同组成冠状动脉微循环。冠状动脉微循环的一个重要生理特征是冠状动脉血流储备(coronary flow reserve,CFR),这一概念被定义为冠状动脉微循环接近最大程度扩张时,冠状动脉血流量(coronary blood flow,CBF)或心肌血流     

替格瑞洛对ST段抬高型心肌梗死患者PCI术后炎症和心功能的影响

目的探讨替格瑞洛在ST段抬高型急性心肌梗死(STEMI)患者行经皮冠状动脉介入术(PCI)中的疗效及对炎症、心功能的影响。方法 138例STEMI患者随机分为对照组和观察组各69例,对照组在PCI前后予以氯吡格雷,观察组在PCI前后予以替格瑞洛,均治疗30 d。比较两组手术前后心肌梗死溶栓(TIMI)分级、术后校正帧数(CFTC),心肌损伤标志物(磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(c TNT),炎症标志物[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、正五聚蛋白(PTX-3)]和心功能[左心室舒张末容积(LVEDV)、心室收缩末容积(LVESV)、左室射血分数(LVEF)、N端脑钠肽前体(NTpro BNP)],记录30 d主要心脏不良事件(MACE)和出血事件发生率。结果观察组术后7 d的hs-CRP、PTX-3分别为(22.3±4.1)mg/L、(8.1±1.6)mg/L,术后30 d的NT-pro BNP为(552.6±88.2)ng/L,均明显低于对照组的(30.4±3.8)mg/L、(12.4±1.8)mg/L和(751.6±93.1)ng/L;观察组MACE发生率为4.3%,低于对照组的18.8%(P0.05)。其余指标组间相近(P0.05)。结论与氯吡格雷相比,替格瑞洛可有效改善STEMI患者PCI术后炎症反应和心功能,降低MACE发生率。     

日本血吸虫酚氧化酶抗原诱导免疫对病鼠肝脏病理变化的影响

目的观察日本血吸虫酚氧化酶天然蛋白抗原诱导免疫对病鼠肝脏的病理变化.方法将42 d活成虫置于含0.05%戊巴比妥钠的RPMI 1640培养基中孵育8 h后洗净,匀浆,超声粉碎、低温高速离心,将含酚氧化酶的上清液进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,嗣后分别在两侧切取胶宽约1 cm进行酶染色,解剖刀准确切下相应的未染色的凝胶.冻干后碾成粉末,高速电动匀浆成浆糊状,冷浸过夜.高速离心得上清即为日本血吸虫酚氧化酶粗抗原.设立3组进行免疫实验:实验组、佐剂对照组和空白对照组.初次免疫后第2、4周,各重复1次加强免疫,最后1次免疫10 d后用新鲜逸出尾蚴(40±1)条/鼠进行攻击感染.42 d剖杀动物,观察日本血吸虫感染小鼠肝脏的病理变化.结果与对照组相比,酚氧化酶免疫实验组小鼠肝脏表面较光滑,隐约可见少量灰白色小点,肝色泽略带灰色,质地较软;压片观察小鼠肝脏内虫卵集聚数量明显减少,且以未成熟虫卵为主.肝脏内伴少量肝细胞坏死,细胞浸润不明显,可见较多未成熟卵周围无肉芽肿反应.小鼠肝组织内虫卵肉芽肿的平均直径和面积比对照组小鼠肝组织内虫卵肉芽肿的平均直径和面积明显减小,两组间差异有非常显著性(P<0.01).结论日本血吸虫酚氧化酶蛋白具抗原性,能诱导宿主一定的抗血吸虫病的免疫保护性作用.     

针刺对单纯性肥胖患者血清胰岛素的影响

目的:观察针刺加耳穴贴压与单纯药物减肥的疗效差异,探讨针刺减肥的作用机制。方法:将50例单纯性肥胖患者随机分为针刺组和药物组,每组各25例。针刺组采用电针天枢、关元、三阴交、丰隆、足三里等穴,配合耳穴贴压神门、内分泌、脾、胃、三焦、大肠等穴的方法;药物组采用口服西布曲明10mg,每日1次的方法。观察治疗2个疗程(2个月)。分别评价减肥疗效并于治疗前后检测患者血清胰岛素的含量。结果:针刺组的总有效率为88.0%,药物组的总有效率为80.0%,2组的治疗结果相近(P>0.05);2组患者治疗后血清胰岛素水平均较治疗前显著下降(P<0.01),且针刺组下降水平优于药物组(P<0.05)。结论:针刺加耳穴贴压减肥与西药减肥疗效相当,但针刺加耳穴贴压较西药能有效地改善单纯性肥胖患者的高胰岛素血症。