脊髓损伤组织匀浆通过甲酰基肽受体2促进神经元突起的生长

文题释义： 甲酰基肽受体2：甲酰基肽受体2在吞噬类细胞中的表达和作用已经进行了广泛的研究，主要是促进吞噬细胞的趋化作用。近年来，甲酰基肽受体2在非吞噬类细胞的表达和作用也有相关的报道，如间充质干细胞、神经细胞等，在这些细胞中也能观察到其趋化作用。作者首次研究观察到甲酰基肽受体2能够促进神经元轴突的生长，并被其他实验室研究证实。那么甲酰基肽受体2对脊髓损伤修复是否起作用及其机制，这是一个十分有意义的问题。 甲酰基肽受体配体：甲酰基肽受体2配体种类繁多，来源不同，不同的配体与甲酰基肽受体2结合可能导致不同、甚至相反的生物学效应，可能与受体不同的结构域发挥作用有关。然而究竟是哪些结构域在起作用，能否在此水平上来调节受体的功能，并使之产生有利作用，避免有害作用，需要具体问题具体研究。 背景：前期研究观察到神经干细胞新分化的神经元表达甲酰基肽受体2，并证实甲酰基肽受体2能促进神经干/祖细胞迁移，诱导向神经元分化。脊髓损伤组织中存在甲酰基肽受体2配体，然而不同的配体与甲酰基肽受体2结合可能导致不同、甚至相反的生物学效应。 目的：探讨脊髓损伤产生的配体与甲酰基肽受体2作用后对神经元突起生长的影响。 方法：采用酶消化法提取胎鼠大脑皮质神经元；制备SD大鼠脊髓损伤模型，提取损伤脊髓组织匀浆。①实验分组1：观察甲酰基肽受体2激活对神经元突起的影响，分组如下：对照组、甲酰基肽受体2阻断剂组(即添加WRW4)、脊髓匀浆组、脊髓匀浆+WRW4组；②实验分组2：观察甲酰基肽受体2激活后AKT和ERK信号通路阻断对神经元突起的影响，分组如下：对照组、AKT和ERK信号通路阻断剂组(即添加Ly294002+PD98059)、脊髓匀浆组、脊髓匀浆+Ly294002+PD98059组。神经元细胞贴壁24 h后，按上述分组处理7 d，免疫荧光染色共聚焦显微镜观察脊髓匀浆激活甲酰基肽受体2对神经元突起的影响；按上述分组处理30 min，Western blotting检测磷酸化蛋白水平；按上述分组处理24 h，Western blotting检测F-actin水平，观察在甲酰基肽受体2特异性阻断剂WRW4存在的情况下，对MAPK和PI3K/Akt通路中关键蛋白磷酸化的影响。 结果与结论：①脊髓损伤组织匀浆液能够使神经元突起长度、初级分枝数、分枝节点数显著增加，这种增加效应大部分被甲酰基肽受体2受体特异性阻断剂WRW4阻断；②脊髓损伤组织匀浆液能够使神经元中ERK1/2和Akt的磷酸化增加，这种效应能够被WRW4阻断；③Akt信号通路阻断剂Ly294002和Erk信号通路阻断剂PD98059能够阻断脊髓匀浆的促进作用；④脊髓损伤组织匀浆能够使F-actin表达量明显增加，这种效应能够被甲酰基肽受体2特异性阻断剂WRW4所阻断；⑤这些实验结果说明，脊髓匀浆液能够通过激活甲酰基肽受体2促进神经元突起生长，这种作用机制可能与ERK1/2和Akt的磷酸化增加相关。 ORCID: 0000-0003-1097-1874(张良) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程     

替诺福韦酯对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖、凋亡及矿化的影响

目的探讨富马酸替诺福韦酯(Tenofovir disoproxil fumarate,TDF)对体外培养小鼠胚胎前体成骨样细胞MC3T3-E1增殖、凋亡及矿化的影响。方法体外培养MC3T3-E1细胞,分为正常细胞对照组、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)对照组、TDF处理组(50 nM、500 nM、5000 nM、50000 nM、250000 nM、500000 nM),干预24 h、48 h。cell counting kit-8(CCK8)试剂盒检测细胞增殖抑制率,ANNEXIN V/7AAD凋亡试剂盒检测细胞凋亡率,茜红素染色检测钙结节形成。结果TDF对MC3T3-E1成骨细胞的增殖和凋亡的影响受TDF浓度和干扰时间的影响,即低浓度对增殖和凋亡无影响,高浓度抑制增殖并促进凋亡,并随干扰时间增加,增殖抑制率和促凋亡率增大,并抑制MC3T3-E1成骨细胞钙结节形成;结论在血药浓度(约500 nM)时,TDF对MC3T3-E1成骨细胞增殖和凋亡无影响,但抑制钙结节形成,进而影响成骨,可能是导致TDF相关性骨量减少和骨质疏松的因素之一。     

腰椎退行性疾病行后路内固定融合术后早期感染清创的危险因素分析

目的探讨腰椎退行性疾病行后路内固定融合术后早期感染清创的危险因素。方法回顾性分析行后路内固定融合术治疗腰椎退行性疾病的患者资料,将发生手术部位感染(SSI)且需行清创治疗的60例患者纳入清创组,于同期未发生SSI的患者中按照1∶4比例随机抽取240例纳入无感染组。对患者一般资料、手术相关资料、影像和实验室相关资料进行组间单因素分析,筛选出具有统计学差异的指标纳入二元Logistic回归,分析与感染清创相关的危险因素,并选取属于计量资料的因素进行受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果单因素分析结果显示,2组患者美国麻醉医师协会(ASA)评分、合并糖尿病、总住院时间、住院花费、脊柱侵袭性指数(SII)、手术时间、手术椎体数、失血量、术中输血、皮下脂肪厚度、术前血红蛋白、术前白细胞、淋巴细胞、C反应蛋白(CRP)、血清白蛋白和术前血糖比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果表明,SII、皮下脂肪厚度、血清白蛋白和术前血糖是腰椎退行性疾病行后路内固定融合术后早期感染清创的危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示SII的临界值为9.5,皮下脂肪厚度的临界值为23.5 mm,血清白蛋白的临界值为35.8 g/L,术前血糖的临界值为6.18 mmol/L。结论更高的SII、更厚的皮下脂肪、更低的血清白蛋白和术前更高的血糖会增加腰椎退行性疾病行后路内固定融合术后发生早期感染清创的风险。     

HIV/AIDS患者HAART治疗后骨密度变化的研究

目的探讨HAART治疗后人类免疫缺陷病毒感染/获得性免疫缺陷综合征(human immunodeficiency virus infection/acquired immune deficiency syndrome,HIV/AIDS)患者骨密度的变化。方法选取2014年至2015年北京地坛医院收治的170例HIV感染者,根据治疗时间将患者分为4组,未接受HAART治疗组,接受HAART治疗1年组,2年组,3年及以上组,以20名健康志愿者为对照组,收集年龄、体重、身高、骨代谢指标(包括血浆OPG、RANKL)水平,流式技术检测CD4+T细胞绝对计数,使用PCR仪检测血浆病毒载量,通过定量跟骨超声骨密度仪测量患者左足跟骨骨密度,比较不同组之间的检测结果。结果HAART治疗后患者的CD4+T细胞绝对计数、血浆RANKL水平升高。治疗3年组跟骨骨密度值显著低于未治疗组(P0.05)。治疗1~2年组BMD Z值与治疗3年组差异无统计学意义。跟骨骨密度与HAART时间呈负相关。结论青年人群中,接受HAART治疗后HIV患者骨密度降低,不同治疗时间段骨密度具有明显差异,需定期复查骨密度。