Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒的鼻咽癌细胞微小RNA表达的影响

目的:在明确Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒鼻咽癌(nasopharygycarcinoma,NPC)细胞CNE-1和CNE-2治疗作用的基础上,检测Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2细胞中差异表达的微小RNA(microRNA,miRNA)的影响,探索CNE-1和CNE-2细胞中miRNA差异表达与NPC放射敏感性差异的关系.方法:用Ad-14-3-3σ转染CNE-1和CNE-2细胞;采用Paraflo microfluidic microRNA芯片检测,用激光扫描器收集杂交的图像,经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异,根据Targetscan3.1数据库资料(http://www.targetsean.org)探索Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2中的miRNA差异表达的影响,预测其差异表达与NPC放射敏感性差异的关系.结果:Ad-14-3-3σ处理细胞以后,CNE-1与CNE-2相比较,有37个microRNA有明显差异,CNE-1中有17个上调,20个下调.其中倍数变化在3倍以上且2者检测量数量差异达到1000以上的有6个:hsa-miR-152、hsa-miR-205、hsa-miR-203、hsa-miR-7、hsa-miR-636和hsa-mjR-100.结论:Ad-14-3-3σ能够改变微小RNA(microRNA,miRNA)在CNE-1和CNE-2中的表达模式,缩小CNE-1和CNE-2之间miRNA的表达差异,而这些miRNA可能跟肿瘤的发生和放疗敏感性有关.     

驱虫斑鸠菊注射液对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨驱虫斑鸠菊对小鼠免疫功能的影响。方法:采用[3H]-TdR掺入法和脾细胞介导羊红细胞定量溶血分光光度法以及迟发型超敏反应试验等观察了驱虫斑鸠菊对小鼠兔疫功能的作用。结果:驱虫斑鸠菊在体内外均可以明显抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的增殖反应和LPS刺激的小鼠B淋巴细胞的增殖反应（P<0.01）;对小鼠胸腺指数和脾脏指数、绵羊红细胞（SRBC）诱导的正常小鼠脾抗体细胞生成反应以及小鼠皮肤迟发型超敏反应都显示出明显的抑制作用,而且上述抑制作用与药物浓度有一定的剂量效应关系。结论:驱虫斑鸠菊对机体体液免疫、细胞免疫都有明显的抑制作用。     

山茱萸总苷抗类风湿关节炎免疫作用机理的初步研究

目的：探讨山茱萸总苷抗Ⅱ型胶原（CⅡ）诱导的类风湿关节炎的免疫作用机理。方法：建立Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎（CIA）大鼠模型，对山茱萸总苷对大鼠在免疫诱导期、关节炎急性期、慢性缓解期血清中CⅡ抗体的水平、腹股沟引流淋巴结细胞IFN-γ的自发分泌和刺激性分泌以及淋巴结细胞的特异增殖能力的影响进行动态观察。结果：山茱萸总苷对类风湿关节炎有明显的防治作用，特异性抑制免疫大鼠抗CⅡ抗体的产生、腹股沟淋巴结Th1型细胞因子IFN-γ的分泌及细胞增殖。结论：山茱萸总苷抗类风湿关节炎的免疫作用机理之一是抑制CⅡ特异性体液免疫和Th1型细胞免疫。     

中药重肌灵片体内对EAMG大鼠IFN-γ、IL-4、TGF-β水平的影响

目的:探讨重肌灵片通过影响细胞因子水平治疗EAMG的作用机制。方法:用从电鳐电器官提取的含N2-AChR粗提液加完全弗氏佐剂免疫Lewis大鼠制成EAMG,ELISA法检测大鼠免疫后第7周血清及细胞培养上清中IFN-γ、IL-4、TGF-β含量以及血清中总IgG、IgG1和IgG2水平。结果:在血清及细胞培养液中:模型组与CFA组比较IFN-γ、IL-4升高(P<0.01);重肌灵大、中剂量组与模型组比较IFN-γ、IL-4含量均显著下降(P<0.01,P<0.05),而TGE-β含量均显著升高(P<0.05);在血清中:模型组与CFA组比较,血清各抗体含量均显著增高(P<0.01);重肌灵大、中剂量组总IgG、IgG1、IgG2水平均低于模型组(P<0.01或P<0.05)。结论:IFN-γ异常增高与EAMG发病相关,重肌灵通过上调TGF-β含量,抑制IFN-γ、IL-4过量分泌,从而降低抗N2-AChR总IgG、IgG1和IgG2水平。     

芩夏止哮颗粒对豚鼠支气管平滑肌的影响及平喘作用

通过离体和整体实验 ,观察芩夏止哮颗粒对以组胺和乙酰胆碱引起正常豚鼠支气管收缩和以卵蛋白诱发的致敏豚鼠支气管收缩的影响。离体实验 ,芩夏止哮颗粒 2～ 8g/L对组胺致正常豚鼠气管条收缩有明显解痉作用 ,并具明显的量效关系。芩夏止哮颗粒对正常豚鼠气管条则也有松弛作用。离体实验结果还表明芩夏止哮颗粒能松弛致敏豚鼠回肠平滑肌。整体实验 ,芩夏止哮颗粒 ,可显著延长药物引喘和卵蛋白气雾吸入引喘所致豚鼠抽搐的潜伏期。芩夏止哮颗粒能拮抗组胺刺激引起的正常豚鼠和卵蛋白引起的致敏豚鼠离体气管片的收缩 ,抑制致敏豚鼠哮喘的发生     

重肌灵对EAMG大鼠血清IL-4、IFN-γ水平的影响

观察中药复方重肌灵对EAMG大鼠血清IL－4、IFN－γ调节作用。方法：采用N2AchR加等量福氏完全佐剂，多次免疫Lewis大鼠，复制EAMG模型，并对模型进行评价。动物随机分为正常组、佐剂组、模型组、地塞米松组和重肌灵组。采用ELISA法观察各组动物血清AchRab、IL－4、INF－γ水平。结果：重肌灵、地塞米松组大鼠血清AchRab滴度、IL－4、IFN－γ水平明显降低，与模型组比较，有非常显著性差异（P＜0.01）。但两治疗组之间无显著性差异（P＞0.05）。结论：重肌灵具有良好的防治EAMG效果，可能是通过下调血清IL－4、IFN－γ，抑制AchRab产生，而起到治疗作用。     

中药复方重肌灵免疫调节作用及其机制的实验研究

目的：探讨中药复方重肌灵免疫调节作用及其机理。方法：建立Lewis大鼠EAMG模型。采用3H—TdR法检测重肌灵对Cona、脂多糖(LPS)诱导正常BALB／C小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响，及重肌灵对ConA、N2AchR诱导EAMG大鼠淋巴结细胞增殖反应的影响。ELISA法测定重肌灵对EAMG大鼠血清中N2AchRab滴度及血清中IFN—γ水平的影响。结果：重肌灵对ConA、LPS诱导正常ALB／C小鼠脾淋巴细胞增殖反应有明显的促进作用(P＜0.05)；对ConA诱导EAMG大鼠淋巴结细胞增殖反应有明显的促进作用(P＜0．01)，而对N2AchR诱导EAMG大鼠淋巴结细胞增殖反应有明显抑制作用(P＜0．01)。重肌灵对EAMG大鼠血清中N2AchR滴度及血清IFN—γ水平有明显下调作用(P＜0．01)。结论：重肌灵防治EAMG不是通过免疫抑制，而是利用它的免疫调节作用。机理可能是通过下调IFN－γ水平，而抑制N2AchR抗原诱导特异性免疫反应，而起到治疗作用。     

重肌灵片对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的影响

目的观察重肌灵片对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的影响。方法用从电鳐电器官提取的含 N_2-AchR 粗提液加完全弗氏佐剂免疫 Lewis 大鼠制成 EAMG,动物于第2次免疫后第5天开始给药,对 EAMG 大鼠的临床症状、肌力、运动能力、肌电图,血清中抗 N_2-AchR-Ab、突触后膜 N_2-AchR 的数目以及淋巴细胞转化等指标进行观察。结果重肌灵片可以改善 EAMG 大鼠的临床症状,提高该鼠体重、肌力和运动能力,抑制血清中抗 N_2-AchR-Ab,降低连续低频电刺激后出现的肌肉收缩幅度的衰减,提高突触后膜 N_2AchR 数目。抑制 N_2-AchR 诱导的 EAMG 大鼠特异性淋巴细胞增殖反应,但对 ConA 诱导的非特异性增殖反应有一定增强作用(P<0.01或P<0.05)。结论重肌灵片药理作用不同于西药的免疫抑制剂,具有选择性免疫调节作用,即下调针对 N_2-AchR 特异性病理免疫性反应,对正常免疫功能不抑制反而增强。     

芩夏止哮颗粒对哮喘小鼠T细胞活化和细胞因子水平的影响

目的 :探讨芩夏止哮颗粒对卵蛋白 (OVA)致敏哮喘小鼠T细胞活化和细胞因子水平的影响。方法 :用卵蛋白致敏和喷雾攻击复制小鼠过敏性气道炎症模型 ,观察芩夏止哮颗粒对脾细胞增殖反应和mIL 2R表达 ,以及肺泡灌洗液 (BALF)和脾细胞培养上清中IL 4、IL 5和IFN γ水平的影响。结果 :正常小鼠脾细胞自发增殖反应 ,在ConA或OVA刺激下增殖反应 ,以及脾细胞mIL 2R表达均较模型对照小鼠低 (P <0 .0 1)。芩夏止哮颗粒能明显抑制哮喘小鼠脾细胞自发增殖反应和在ConA及OVA刺激下增殖反应及IL 2R的表达 (P <0 .0 1)。模型对照小鼠肺泡灌洗液 (BALF)和脾细胞培养上清中IL 4、IL 5含量显著升高 (P <0 .0 1) ,而IFN γ模型对照脾细胞培养上清中水平低于正常小鼠。芩夏止哮颗粒则能显著降低BALF中和脾细胞分泌IL 4、IL 5的水平 ,提高IFN γ产生水平 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。结论 :芩夏止哮颗粒治疗哮喘机制与其能抑制哮喘小鼠体内T淋巴细胞的活化 ,促进Th1/Th2类细胞因子产生平衡有关     

从电鳐电器官中提取N2-AchR纯品建立EAMG模型

目的从厦门海域单鳍电鳐的电器官中提取烟碱型乙酰胆碱受体（N2-AchR）纯品,用纯化的N2-AchR免疫Lewis大鼠,建立实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）动物模型。方法参照文献报道从电鳐电器官提取N2-AchR纯品,并采用SDS凝胶电泳蛋白定性鉴定及考马斯亮兰定蛋白含量;以纯提的蛋白主动免疫Lewis大鼠,共免疫3次,于末次免疫后第3日进行EAMG大鼠临床评分及攀网时间、肌电图、血清N2-AchRab含量、突触后膜上N2-AchR数目的检测。结果纯化的蛋白含量为1.097mg/ml（标准品为1mg/ml）;EAMG模型组与佐剂组比较,攀网时间明显降低（P〈0.01）;临床评分及肌电图第五个反应幅度衰减百分率显著升高（P〈0.01）;血清N2-AchRab含量明显增加（P〈0.01）;突触后膜上N2-AchR数目显著减少（P〈0.01）。结论从单鳍电鳐电器官纯提的N2-AchR蛋白成功诱导EAMG模型,为进一步研究重症肌无力创造了良好条件。