医学免疫学教学中翻转课堂教学法的实践

为了研究翻转课堂教学法在医学免疫学教学中应用的可行性及其效果,在医学免疫学的教学中进行了翻转课堂的教学实践,采用问卷和与学生座谈的方式对这种教学法的效果和学生的接受度进行调查。经过三轮教学实践,调查结果显示,学生普遍接受这种教学方法,并对其教学效果给予了较高的评价,认为翻转课堂教学法能够激发学生的学习兴趣,加深对所学知识的理解,兼顾不同层次的学生,充分发挥自主学习的优势,说明翻转课堂教学法在医学免疫学的教学中有较高的应用价值。     

中药重肌灵片体内对EAMG大鼠IFN-γ、IL-4、TGF-β水平的影响

目的:探讨重肌灵片通过影响细胞因子水平治疗EAMG的作用机制。方法:用从电鳐电器官提取的含N2-AChR粗提液加完全弗氏佐剂免疫Lewis大鼠制成EAMG,ELISA法检测大鼠免疫后第7周血清及细胞培养上清中IFN-γ、IL-4、TGF-β含量以及血清中总IgG、IgG1和IgG2水平。结果:在血清及细胞培养液中:模型组与CFA组比较IFN-γ、IL-4升高(P<0.01);重肌灵大、中剂量组与模型组比较IFN-γ、IL-4含量均显著下降(P<0.01,P<0.05),而TGE-β含量均显著升高(P<0.05);在血清中:模型组与CFA组比较,血清各抗体含量均显著增高(P<0.01);重肌灵大、中剂量组总IgG、IgG1、IgG2水平均低于模型组(P<0.01或P<0.05)。结论:IFN-γ异常增高与EAMG发病相关,重肌灵通过上调TGF-β含量,抑制IFN-γ、IL-4过量分泌,从而降低抗N2-AChR总IgG、IgG1和IgG2水平。     

从电鳐电器官中提取N2-AchR纯品建立EAMG模型

目的从厦门海域单鳍电鳐的电器官中提取烟碱型乙酰胆碱受体（N2-AchR）纯品,用纯化的N2-AchR免疫Lewis大鼠,建立实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）动物模型。方法参照文献报道从电鳐电器官提取N2-AchR纯品,并采用SDS凝胶电泳蛋白定性鉴定及考马斯亮兰定蛋白含量;以纯提的蛋白主动免疫Lewis大鼠,共免疫3次,于末次免疫后第3日进行EAMG大鼠临床评分及攀网时间、肌电图、血清N2-AchRab含量、突触后膜上N2-AchR数目的检测。结果纯化的蛋白含量为1.097mg/ml（标准品为1mg/ml）;EAMG模型组与佐剂组比较,攀网时间明显降低（P〈0.01）;临床评分及肌电图第五个反应幅度衰减百分率显著升高（P〈0.01）;血清N2-AchRab含量明显增加（P〈0.01）;突触后膜上N2-AchR数目显著减少（P〈0.01）。结论从单鳍电鳐电器官纯提的N2-AchR蛋白成功诱导EAMG模型,为进一步研究重症肌无力创造了良好条件。     

不同辐射抗拒鼻咽癌细胞细胞周期和形态学差异比较

[目的]探索不同辐射抗拒鼻咽癌细胞CNE-2R和CNE-2细胞周期和形态学差异.[方法]细胞流式术检测细胞株CNE-2R和CNE-2在同步化前、同步化后及去同步化后24 h的细胞周期分布:透射电子显微镜观察CNE-2R和CNE-2形态学差异.[结果]撤去血清(细胞同步化)后24 h,CNE-2R和CNE-2中分别52.9%和52.1%细胞停滞于G0/G1期;加入血清(去同步化)24 h后发现,CNE-2细胞周期中G1期细胞下降到48.5%,而G2期细胞有所上升,但CNE-2R细胞中G1期细胞与同步化前相比反而增加(65.3%).与CNE-2细胞(26.5%)相比,CNE-2R处于G2期的细胞比例(8.4%)则明显减少;CNE-2R细胞s期的比例(26.3%)与CNE-2细胞(25.1%)相仿;与CNE-2细胞相比,CNE-2R线粒体数量增多、体积增大、嵴清晰;内质网扩张,呈现板层状态;可见CNE-2R细胞内微腔的形成.[结论]鼻咽癌细胞的不同辐射抗拒机制与细胞周期分布和细胞器的形态学改变有关.     

山茱萸总甙对人脐静脉内皮细胞表达α4β7整合素影响

为了进一步探讨山茱萸总甙的抗炎和免疫抑制机制。以ECV3 0 4作为研究HUVEC对象 ,研究了山茱萸总甙对HUVEC表达α4和 β7整合素影响。用rTNF α和rIL 1诱导血管内皮细胞活化 ,模拟血管内皮细胞在炎性条件下的环境 ,采用Cell ELISA方法分析α4整合素、β7整合素的表达 ,结果 ,rTNF α和rIL 1均可诱导血管内皮细胞活化而明显增加α4和 β7整合素的表达 ,地塞米松和山茱萸总甙均可抑制rTNF α和rIL 1诱导ECV3 0 4表达α4和β7整合素 (P <0 0 1)。抑制血管内皮细胞表达α4 β7整合素可能是山茱萸总甙主要抗炎和免疫抑制机制之一。     

重肌灵片对EAMG大鼠体内NO和NOS的影响

目的探讨重肌灵片对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)体内一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶(NOS)的影响.方法用从电鳐电器官提取的含N2-AchR粗提液加完全弗氏佐剂免疫Lewis大鼠制成EAMG,ELISA法检测大鼠免疫后第7周血清及细胞培养上清中IFN-γ含量.采用比色法检测血清、淋巴细胞培养液和肌肉组织中的NO和NOS.结果模型组与完全弗氏佐剂(CFA)组比较干扰素-γ(IFN-γ)、NO和NOS水平升高(P＜0.01),重肌灵组与模型组比较IFN-γ、NO和NOS含量下降(P＜0.01).结论重肌灵下调EAMG体内IFN-γ和AChRab含量导致NO和NOS合成减少,从而降低由NO引起的肌肉神经组织损伤.     

驱虫斑鸠菊注射液对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨驱虫斑鸠菊对小鼠免疫功能的影响。方法:采用[3H]-TdR掺入法和脾细胞介导羊红细胞定量溶血分光光度法以及迟发型超敏反应试验等观察了驱虫斑鸠菊对小鼠兔疫功能的作用。结果:驱虫斑鸠菊在体内外均可以明显抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的增殖反应和LPS刺激的小鼠B淋巴细胞的增殖反应（P<0.01）;对小鼠胸腺指数和脾脏指数、绵羊红细胞（SRBC）诱导的正常小鼠脾抗体细胞生成反应以及小鼠皮肤迟发型超敏反应都显示出明显的抑制作用,而且上述抑制作用与药物浓度有一定的剂量效应关系。结论:驱虫斑鸠菊对机体体液免疫、细胞免疫都有明显的抑制作用。     

Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒的鼻咽癌细胞微小RNA表达的影响

目的:在明确Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒鼻咽癌(nasopharygycarcinoma,NPC)细胞CNE-1和CNE-2治疗作用的基础上,检测Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2细胞中差异表达的微小RNA(microRNA,miRNA)的影响,探索CNE-1和CNE-2细胞中miRNA差异表达与NPC放射敏感性差异的关系.方法:用Ad-14-3-3σ转染CNE-1和CNE-2细胞;采用Paraflo microfluidic microRNA芯片检测,用激光扫描器收集杂交的图像,经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异,根据Targetscan3.1数据库资料(http://www.targetsean.org)探索Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2中的miRNA差异表达的影响,预测其差异表达与NPC放射敏感性差异的关系.结果:Ad-14-3-3σ处理细胞以后,CNE-1与CNE-2相比较,有37个microRNA有明显差异,CNE-1中有17个上调,20个下调.其中倍数变化在3倍以上且2者检测量数量差异达到1000以上的有6个:hsa-miR-152、hsa-miR-205、hsa-miR-203、hsa-miR-7、hsa-miR-636和hsa-mjR-100.结论:Ad-14-3-3σ能够改变微小RNA(microRNA,miRNA)在CNE-1和CNE-2中的表达模式,缩小CNE-1和CNE-2之间miRNA的表达差异,而这些miRNA可能跟肿瘤的发生和放疗敏感性有关.     

山茱萸总苷抗类风湿关节炎免疫作用机理的初步研究

目的：探讨山茱萸总苷抗Ⅱ型胶原（CⅡ）诱导的类风湿关节炎的免疫作用机理。方法：建立Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎（CIA）大鼠模型，对山茱萸总苷对大鼠在免疫诱导期、关节炎急性期、慢性缓解期血清中CⅡ抗体的水平、腹股沟引流淋巴结细胞IFN-γ的自发分泌和刺激性分泌以及淋巴结细胞的特异增殖能力的影响进行动态观察。结果：山茱萸总苷对类风湿关节炎有明显的防治作用，特异性抑制免疫大鼠抗CⅡ抗体的产生、腹股沟淋巴结Th1型细胞因子IFN-γ的分泌及细胞增殖。结论：山茱萸总苷抗类风湿关节炎的免疫作用机理之一是抑制CⅡ特异性体液免疫和Th1型细胞免疫。     

重肌灵片对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的影响

目的观察重肌灵片对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的影响。方法用从电鳐电器官提取的含 N_2-AchR 粗提液加完全弗氏佐剂免疫 Lewis 大鼠制成 EAMG,动物于第2次免疫后第5天开始给药,对 EAMG 大鼠的临床症状、肌力、运动能力、肌电图,血清中抗 N_2-AchR-Ab、突触后膜 N_2-AchR 的数目以及淋巴细胞转化等指标进行观察。结果重肌灵片可以改善 EAMG 大鼠的临床症状,提高该鼠体重、肌力和运动能力,抑制血清中抗 N_2-AchR-Ab,降低连续低频电刺激后出现的肌肉收缩幅度的衰减,提高突触后膜 N_2AchR 数目。抑制 N_2-AchR 诱导的 EAMG 大鼠特异性淋巴细胞增殖反应,但对 ConA 诱导的非特异性增殖反应有一定增强作用(P<0.01或P<0.05)。结论重肌灵片药理作用不同于西药的免疫抑制剂,具有选择性免疫调节作用,即下调针对 N_2-AchR 特异性病理免疫性反应,对正常免疫功能不抑制反而增强。