创伤评分软件在急诊临床中的应用

[目的]观察自行设计的创伤评分软件在急诊临床应用的可行性.[方法]采用DELPHI6.0和FOXPRO等软件,自行设计出包括院前及院内评分的软件,并收集了2001年6月至2002年4月在中山大学黄埔医院急诊科诊治的较重创伤患者226例,将患者的年龄、院前时间、CRAMS评分值和ISS评分值用-x±s表示,输人计算机分析.[结果]①创伤部位以头颅及四肢为主,合计82%以上;②CRAMS评分在生存组和死亡组间差异有统计学意义,在其它组间无统计学意义.③ISS评分在3组间均有统计学意义.④CRAMS评分≤6分、ISS评分≥20分可作为病情轻重的一个评定界限.[结论]①本院前及院内评分软件在诊治创伤患者的临床应用上具有良好的可行性,值得进一步推广使用;②在创伤病人的评估中,CRAMS评分≤6分、ISS评分≥20分可作为区分轻重的一个标志.     

猴表皮干细胞的分离和培养

目的： 探索猴表皮干细胞分离纯化和培养方法。 方法: 将猴皮肤标本剪成皮条,加入0.25％胰酶浸泡过夜；然后去除角质层，刮上皮面获取表皮细胞进行培养。取第2-4代的细胞,经消化后，用Ⅳ型胶原黏附法获得为快吸附的表皮细胞。对快吸附的表皮细胞行流式细胞仪、免疫组化和RT-PCR检测。 结果: 快吸附细胞从mRNA转录水平及蛋白表达水平均呈现表皮干细胞的特性：β1整合素、K15和α6整合素阳性，而CD71和K1/K10阴性。 结论: 所采用的分离纯化方法和培养条件适合猴表皮干细胞的分离纯化及生长。     

亚低温对实验性脑出血大鼠病死率影响的实验研究

目的观察32℃亚低温对实验性脑出血大鼠24h内病死率和脑组织钙含量的影响。方法将134只大鼠分成两组:①68只大鼠用于病死率观察;②66只大鼠用于脑组织钙含量测定。两组再分成假手术对照组、常温脑出血组及亚低温脑出血组。结果常温组24h内病死率为36.7%,亚低温组为4.6%;脑组织钙含量常温组较对照组和亚低温组为高。结论亚低温治疗能减少脑出血后脑组织钙的增加,减少钙平衡失调,显著减少实验性脑出血大鼠24h内病死率。     

应用原瓶黏附分选表皮干细胞的方法学特点

目的:探索一种简单易行的方法分离表皮干细胞,为组织工程学的进一步研究奠定基础。方法:实验于2005-07/12在中山大学眼科中心国家眼科学重点实验室完成。健康3个月龄恒河猴2只,分离与培养猴表皮细胞,获取第2～4代的细胞,消化后,将细胞重新放回原瓶中,培养箱中静置20min,获得的贴壁细胞即为快吸附的表皮细胞。①于光学显微镜下观察分选前细胞和快吸附细胞。②对20min快吸附的表皮细胞进行整合素α6和CD71流式细胞仪检测,以未经吸附分选的细胞作为对照。③20min快吸附的表皮细胞和分选后未黏附细胞分别制作3组细胞爬片,进行整合素β1、K15、和K10的免疫组织化学染色。④20min快吸附的表皮细胞和分选后未黏附细胞进行K15、整合素β1和K1(K10对应角蛋白)的mRNA反转录聚合酶链反应的检测。结果:①分选后的细胞体积较小,核浆比例较大。②流式细胞仪的结果显示快吸附细胞以干细胞为主(α6briCD71dim为82.5±1.641),也含有少量的短暂扩增细胞(α6briCD71bri为4.9±2.125),有丝分裂后细胞及终末细胞则检测不到(α6dim)。③免疫组化可见快吸附细胞呈K15和整合素β1阳性,K10阴性;分选后未黏附细胞K10为阳性,而K15和整合素β1均为阴性。④反转录聚合酶链反应示吸附分选后的快吸附细胞高表达K15和β1整合素,K10没有表达;而分选后剩余的细胞只表达K10。结论:原瓶黏附分选方法是一种简单可行的分选表皮干细胞的方法。     

颅脑重症病人施行肠内营养的临床研究

目的探讨颅脑重症病人早期肠内营养(EEF)与早期完全胃肠外营养(TPN)在摄入同等热能、同等氮量的条件下的优劣. 方法颅脑重症病人40例随机分成EEF组和TPN组,予摄入同等热能、同等氮量,于入院后第1天、14天检测体重、 24 h排出氮、血清总蛋白,评估胃肠道功能(上消化道出血、返流、腹泻、拒食、淤胆等)及意识状态(GCS评分)的变化. 结果 EEF组的返流并无增加,腹泻、苏醒后拒食、淤胆、便秘的发生率显著减少,上消化道出血发生率显著减少,EEF组24 h排出氮明显少于 TPN组,血清总蛋白等营养指标优于TPN组. 入院后第14天,EEF组体重丢失[(-1.1±2.0) kg]显著少于TPN组[(-5.2±3.2) kg],GCS评分较TPN组显著改善(14.2±0.9 Vs 12.7±1.3). 结论颅脑重症病人在摄入同等热能、同等氮量的条件下肠内营养优于肠外营养.     

应用原瓶黏附分选表皮干细胞的方法学特点

目的：探索一种简单易行的方法分离表皮干细胞，为组织工程学的进一步研究奠定基础。方法：实验于2005—07／12在中山大学眼科中心国家眼科学重点实验室完成。健康3个月龄恒河猴2只，分离与培养猴表皮细胞，获取第2-4代的细胞，消化后，将细胞重新放回原瓶中，培养箱中静置20min，获得的贴壁细胞即为快吸附的表皮细胞。①于光学显微镜下观察分选前细胞和快吸附细胞。②对20min快吸附的表皮细胞进行整合素α6和CD71流式细胞仪检测，以未经吸附分选的细胞作为对照。③20min快吸附的表皮细胞和分选后未黏附细胞分别制作3组细胞爬片，进行整合素β1、K15、和K10的免疫组织化学染色。④20min快吸附的表皮细胞和分选后未黏附细胞进行K15、整合素β1和K1（K10对应角蛋白）的mRNA反转录聚合酶链反应的检测。结果：①分选后的细胞体积较小，核浆比例较大。②流式细胞仪的结果显示快吸附细胞以干细胞为主（α6^briCD71^dim为82．5&;#177;1．641），也含有少量的短暂扩增细胞（α6^briCD71^bri为4．9&;#177;2．125），有丝分裂后细胞及终末细胞则检测不到（α6^dim）。③免疫组化可见快吸附细胞呈K15和整合素β1阳性，K10阴性；分选后未黏附细胞K10为阳性，而K15和整合素β1均为阴性。④反转录聚合酶链反应示吸附分选后的快吸附细胞高表达K15和β1整合素，K10没有表达；而分选后剩余的细胞只表达K10。结论：原瓶黏附分选方法是一种简单可行的分选表皮干细胞的方法。     

TNF-α、IFNα-1b和WY14643对鼠贮脂细胞及其表达PPAR-α的影响

目的：观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)、α干扰素(IFN-α)1b和匹立尼酸(WY14643)对鼠贮脂细胞及其表达的过氧化物酶体增生激活受体(PPAR-α)的影响。方法：选用大鼠贮脂细胞株,将培养的贮脂细胞分为对照组、TNF-α组、IFN-α1b组、WY14643组、TNF-α+IFN-α1b组和TNF-α+WY14643组。分别加入各作用因素,按照不同的时间点收集细胞标本,采用流式细胞仪观察细胞生长周期变化：透射电镜观察细胞超微结构改变;免疫组化和Western blotting检测PPARα表达情况。结果：MTT检测：TNFα在50U／mL浓度可明显导致贮脂细胞增殖激活;而IFN-α1b在50U／mL浓度对TNF-α激活贮脂细胞无影响。透射电镜观察到IFN-α1b作用组贮脂细胞有明显的凋亡现象发生,而TNF-α+IFN-α1b组贮脂细胞形态未见异常。通过免疫组化和Western blot检测,观察到PPAR-α在贮脂细胞的表达随TNF-α的作用而增加。结论：TNF-α在50U／mL即可明显激活贮脂细胞;IFN-α1b对TNF-α使贮脂细胞增殖激活的过程有抑制作用：其机制可能是通过诱导肝脏贮脂细胞凋亡而产生。从体外培养方面证实了IFN-a1b具有抗肝纤维化的作用：验证了PPARα对TNF-α具有抑制作用的观点;为临床上对肝纤维化的治疗和PPAR-α激动剂在临床上的应用提供了较好的理论依据。     

IFN-α1b对肝星状细胞形态及其CTGF表达影响的研究

目的：通过观察IFN-α1b对肝星状细胞(HSC)形态和表达CTGF的影响，探讨IFN-α1b在治疗肝纤维化中的作用机制。 方法： 采用体外培养大鼠肝星状细胞，分别加入IFN-α1b、TGF-β1,观察肝星状细胞的形态学及CTGF表达的改变。 结果： 透射电镜观察到IFN-α1b作用组肝星状细胞有明显的凋亡现象发生；RT-PCR观察到正常组和TGF-β1诱导肝星状细胞表达的CTGF mRNA随IFN-α1b的作用而减少。 结论： IFN-α1b对肝星状细胞表达CTGF的抑制作用机制可能是通过诱导肝星状细胞凋亡和抑制TGF-β1诱导肝星状细胞表达CTGF。     

重型颅脑损伤手术治疗临床分析

目的 探讨重型颅脑损伤手术治疗的原则和最佳方法。方法 通过对42例重型颅脑损伤伤员施行手术治疗的方式方法进行分析。结果 按照我院制订的手术治疗原则和方法进行治疗,本组42例,死亡5例．植物生存1例;重残2例;轻、中残4例;良好30例。抢救成功率为88％,治愈率71％。结论 重型颅脑损伤的手术原则是：1～1.5小时完成从受伤入院至开颅减压、采用大骨瓣开颅、骨窗下界平颅底、去除骨瓣、敞开硬脑膜不予缝闭、开颅前后行气管切开术。     

干扰素-α1b对激活鼠贮脂细胞的影响

目的研究干扰素(IFN)α1b治疗肝纤维化的作用机制。方法将体外培养大鼠贮脂细胞分为对照组、肿瘤坏死因子(TNF)α组、IFNα1b组和TNFα+IFNα1b组,应用免疫组织化学和透射电镜观察各组贮脂细胞形态学改变及过氧化物酶增生激活受体(PPAR)α的表达。结果肿瘤坏死因子α在50U/ml浓度时,贮脂细胞吸光度值(A)为0.401±0.27,增殖率为450.3±309.1(P<0.01);透射电镜显示IFNα1b组细胞形态改变符合凋亡的早期形态特征;免疫组织化学观察到贮脂细胞中PPARα的阳性单位值(PU)为24.69±4.88,较对照组和其余两组明显增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论IFNα1b对肿瘤坏死因子α促进贮脂细胞增殖激活的过程有抑制作用,作用机制可能是通过诱导肝脏贮脂细胞凋亡而产生。