A型肉毒毒素治疗大鼠致敏性鼻炎的实验研究

目的　研究A型肉毒毒素 (botulinumtoxin A ,BTX A)对大鼠变应性鼻炎、鼻溢是否有治疗作用及对血管活性肠肽 (vasoactiveintestinalpolypeptide ,VIP)免疫表达的延时性。 方法　用卵清蛋白 (ovalbumin)致敏健康Wistar大鼠 ,制作变应性鼻炎动物模型。将 2 0只大鼠随意分为 3组 ,即对照组 (8只 )、致敏组 (12只 )和致敏后BTX A用药组 (6只 )。观察给予BTX A前后时限大鼠鼻部症状和体征的变化。采用组织学和免疫组织化学方法观察鼻腔黏膜形态学改变以及对VIP表达的影响。结果　 (1)致敏组动物鼻分泌量明显增多。组织学结果显示 :致敏组鼻腔黏膜水肿、腺体增生、嗜酸性粒细胞增多。免疫组织化学结果显示 :致敏组腺体周围VIP纤维密集 ,呈束状。 (2 )致敏后BTX A用药组 ,鼻分泌量逐渐减少 ,致敏后BTX A用药组与致敏组相比鼻分泌量差异有显著性(P <0 0 5 )。组织学结果示 :鼻黏膜上皮完整 ,腺体明显减少 ,腺管萎缩。免疫组织化学结果示 :致敏组动物致敏后BTX A用药组腺体周围VIP纤维减少 ,未见束状VIP纤维。结论　BTX A能缓解变应性鼻炎流涕 ,VIP纤维密度、数量和免疫阳性反应减少 ,能治疗变应性鼻炎的鼻溢症状     

大蒜素对小鼠胃肠运动及血清中胃动素、生长激素释放肽的影响

目的:研究大蒜素对小鼠胃肠运动及血清中胃动素、生长激素释放肽的影响。方法:取小鼠随机分为空白对照(生理盐水)组、甲氧氯普胺(8 mg/kg)组和大蒜素高、中、低剂量(50、20、5 mg/kg)组,每组18只,禁食水24 h后ip给予相应药物,30 min后ig给予0.4 ml 2%葡聚糖蓝2000,20 min后取血处死,游离胃和小肠。测定各组小鼠胃排空率和小肠推进率,检测血清中胃动素及生长激素释放肽的质量浓度。结果:与空白对照组比较,大蒜素高、中剂量组小鼠的胃排空率、小肠推进率、胃动素和生长激素释放肽质量浓度均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);甲氧氯普胺组小鼠的胃排空率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与甲氧氯普胺组比较,大蒜素高、中剂量组小鼠的小肠推进率、胃动素及生长激素释放肽质量浓度均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);其余各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:大蒜素能促进小鼠胃动素及生长激素释放肽的分泌,进而促进胃排空及小肠推进作用。     

A型肉毒毒素降低偏头痛大鼠颈静脉血、脑干和三叉神经节的P物质含量

目的通过观察A型肉毒毒素(botulinumtoxintypeA,BTX-A)对硝酸甘油引发的偏头痛大鼠颈静脉血浆、脑干和三叉神经节中P物质(substanceP,SP)含量变化,探讨BTX-A止痛机理。方法将大鼠分为对照组(n=5)和偏头痛模型组(n=15)。偏头痛模型组造模后分别皮下注0.9%NaCl(n=5)、BTX-A5U·kg-1(n=5)、BTX-A10U·kg-1(n=5)6d后,应用放射免疫检测法测定颈静脉血浆、脑干和三叉神经节中P物质的含量。结果动物皮下注射硝酸甘油后出现偏头痛症状,例如双耳发红、前肢频繁搔头、爬笼次数增多,其评分与对照组相比有明显差异(P<0.01)。生理盐水组颈静脉血浆、脑干和三叉神经节中SP含量与对照组比较显著升高(P<0.01);BTX-A5U·kg-1组、BTX-A10U·kg-1组分别与生理盐水组比较,SP含量显著降低(P<0.05)。结论硝酸甘油导致偏头痛症状产生及SP在颈静脉血浆和延髓、脑桥和三叉神经节中的含量增加。局部皮下注射BTX-A可减轻偏头痛大鼠的症状,并能降低颈静脉血浆、脑干和三叉神经节中SP含量,结果提示BTX-A通过抑制“三叉神经血管系统”(tri-geminalvascularsystem,TVS)中SP释放而减轻偏头痛症状。     

剥夺异相睡眠导致大鼠学习记忆的能力下降的机制

目的：揭示学习记忆是否会在睡眠中得到加强和巩固，取消异相睡眠是否会导致学习记忆能力下降及其下降的机制。方法：45只雄性Wistar大鼠进行连续4d的Morris水迷宫空间记忆学习任务训练后，立即随机分为剥夺异相睡眠(paradoxical sleep deprivation,PSD)、大平台组(TC)、对照组(CC)3组，每组又分为24，48，72h3个亚组，每组各5只。其中所有的PSD组、CC组及TC组在第4天最后1次训练结束后立即分别放入睡眠剥夺箱、大平台水箱和普通鼠笼。24，48和72h后，分别将各组大鼠再次任意选取两个入水点，每个点连续两次寻找平台，来衡量空间参考记忆和空间工作记忆的变化,此时平台所处的位置与学习训练时相同。整个行为学研究过程由水迷宫测试系统记录游泳轨迹和相关参数。结果：①随着训练次数的增加，大鼠逐次各点第1次游泳潜伏期逐渐缩短，记忆得分的值逐渐增大。②PSD各组大鼠与配对的TC组及CC组相比较，其各点第1次游泳潜伏期随PSD时间延长而延长[72h时为：(88．17&;#177;875),(22.83&;#177;3.98)，(22．12&;#177;4．95)s，t=15.05、P&;lt;0.001]，记忆得分小于TC,CC组大鼠(72h时为：16．75&;#177;4.36，28．15&;#177;5.31，30.83&;#177;4.97，t=15．05，P&;lt;0．001)，其差异有显著性意义：TC，CC组大鼠之间其参数统计差异没有显著性意义(P&;gt;0.05)。结论：PSD可造成大鼠空间记忆的巩固障碍，异相睡眠与学习记忆有关。     

大豆磷脂酰胆碱提高幼年大鼠学习记忆能力及对海马CA3区突触可塑性的影响

目的：观察大豆磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine from sovbean lecithin，SB—pc)对幼年大鼠空间辨别性学习记忆能力及海马CA3区突触可塑性的影响，探讨海马突触可塑性机制及SB-pc作用机制。方法：5周龄雄性Wistar大鼠33只，随机分为SB—pc添加喂养组(11只)，迷宫对照组(11只)，正常对照组(11只)。喂养8周，SB-pc添加喂养组和迷宫对照组大鼠在Morris水迷宫中进行连续4d的空间辨别性学习记忆能力检测，计算机分析系统自动记录逃避潜伏期(escape latencv．EL)等相关参数，分析大鼠行为变化。用免疫组织化学方法检测SB-pc添加喂养组、迷宫对照组和正常对照组3组大鼠海马结构CA3区突触素(synaptophysin，SYN)的免疫表达。用电镜观察海马CA3区突触结构的变化。结果：SB-pc添加喂养组4d的EL分别小于迷宫对照组，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。SB—pc添加喂养组海马结构CA3区SYN免疫反应阳性产物的吸光度(0．5400&;#177;0．0245)高于迷宫对照组(0．4679&;#177;0．0247)．差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；迷宫对照组吸光度大于正常对照组(0．3581&;#177;0．0133)，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。SB-pc添加喂养组海马CA3区突触数密度[(104．51&;#177;9.68)个／μm^3]和突触活性区膜面积[(0．067&;#177;0．009)μm^2/μm^3]分别大于迷宫对照组[(84．97&;#177;6．53)个／μm^3，(0．047&;#177;0．005)μm^2／μm^3]，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；迷宫对照组的突触数密度和突触活性区膜面积大于正常对照组[(29．48&;#177;2．81)个／μm^3，(0．020&;#177;0．001)μm^2／μm^3]，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：添加SB-pc喂养幼年大鼠，可促进其海马CA3区突触的增长和突触活性区膜面积增加，突触素的免疫表达增强，提高了突触的可塑性，从而提高幼年大鼠的空间辨别性学习记忆能力。     

A型肉毒毒素对硝酸甘油引发偏头痛大鼠颈静脉血和脑干内降钙素基因相关肽水平的调节

目的 观察皮下注射硝酸甘油引发偏头痛大鼠模型颈静脉血浆和延髓、脑桥中降钙素基因相关肽含量变化并分析止痛机制。方法：选取成年雌性Sprague-Dawley大鼠20只，体质量（180&;#177;40）g；随机分为对照组5只和偏头痛模型组15只。偏头痛模型组又随机分偏头痛生理盐水处理组、偏头痛A型肉毒素5U／kg组和偏头痛A型肉毒素10U／kg组，每组5只。对照组不进行任何处理；偏头痛模型组给予硝酸甘油10mg／kg皮下注射于额区、颞区造模。偏头痛生理盐水处理组，造模后，偏头痛发作后2h给予生理盐水0．05mL，注射部位同上，1次／d，连续6d。偏头痛A型肉毒素5U／kg组，造模后，偏头痛发作后2h给予A型肉毒素5U／kg，注射部位同上，1次／d，连续6d。偏头痛A型肉毒素10U／kg组的注射方法和时间同上。应用放射免疫检测法测定颈静脉血浆和脑干中降钙素基因相关肽的含量。结果：①行为学变化：偏头痛模型组高于对照组（1．48&;#177;0．26，35．77&;#177;2．30，P〈0．05）。②颈静脉血浆降钙素基因相关肽含量：偏头痛A型肉毒素5U／kg组和偏头痛A型肉毒素10U／kg组明显低于对照组和偏头痛生理盐水组（55．31&;#177;14．02，57.15&;#177;14．58，51．81&;#177;13．90，93．84&;#177;13．62，P〈0．05）。③降钙素基因相关肽含量：偏头痛A型肉毒素5U／kg组和偏头痛A型肉毒素10U／kg组明显低于对照组和偏头痛生理盐水组（6．91&;#177;2．21。7.28&;#177;2.24，6．43&;#177;2．27，11．54&;#177;0．4l，P〈0．05）。结论：A型肉毒素通过抑制三叉神经血管系统中降钙素基因相关肽释放和无菌性炎症反应而减轻偏头痛症状。     

还原型谷胱甘肽对大鼠局灶性脑梗死后丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶表达的影响

目的观察还原型谷胱甘肽对大鼠短暂性局灶性脑缺血时丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法采用大脑中动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型，随机分为假手术组、缺血模型组和还原型谷胱甘肽治疗组（1200mg／kg），缺血2h再灌注6h后观测各组的神经行为变化，脑梗死体积，脑组织病理学变化，脑组织MDA含量和SOD、GSH—PX活性。结果还原型谷胱甘肽可以改善大鼠局灶性脑缺血引起的神经行为障碍，减少脑梗死体积（P〈0．05）；可以降低脑组织MDA含量，提高脑组织GSH—PX、SOD活力（P〈0．05）。结论外源性谷胱甘肽可通过提高GSH—PX、SOD活力，降低MDA含量，增强机体清除自由基的能力，及减少大鼠脑组织氧自由基的堆积而发挥对脑缺血再灌注时的保护作用。     

A型肉毒毒素对硝酸甘油引发偏头痛大鼠颈静脉血和脑干内降钙素基因相关肽水平的调节

目的:观察皮下注射硝酸甘油引发偏头痛大鼠模型颈静脉血浆和延髓、脑桥中降钙素基因相关肽含量变化并分析止痛机制。方法:选取成年雌性Sprague-Dawley大鼠20只,体质量(180±40)g;随机分为对照组5只和偏头痛模型组15只。偏头痛模型组又随机分偏头痛生理盐水处理组、偏头痛A型肉毒素5U/kg组和偏头痛A型肉毒素10U/kg组,每组5只。对照组不进行任何处理;偏头痛模型组给予硝酸甘油10mg/kg皮下注射于额区、颞区造模。偏头痛生理盐水处理组,造模后,偏头痛发作后2h给予生理盐水0.05mL,注射部位同上,1次/d,连续6d。偏头痛A型肉毒素5U/kg组,造模后,偏头痛发作后2h给予A型肉毒素5U/kg,注射部位同上,1次/d,连续6d。偏头痛A型肉毒素10U/kg组的注射方法和时间同上。应用放射免疫检测法测定颈静脉血浆和脑干中降钙素基因相关肽的含量。结果:①行为学变化:偏头痛模型组高于对照组(1.48±0.26,35.77±2.30,P<0.05)。②颈静脉血浆降钙素基因相关肽含量:偏头痛A型肉毒素5U/kg组和偏头痛A型肉毒素10U/kg组明显低于对照组和偏头痛生理盐水组(55.31±14.02,57.15±14.58,51.81±13.90,93.84±13.62,P<0.05)。③降钙素基因相关肽含量:偏头痛A型肉毒素5U/kg组和偏头痛A型肉毒素10U/kg组明显低于对照组和偏头痛生理盐水组(6.91±2.21,7.28±2.24,6.43±2.27,11.54±0.41,P<0.05)。结论:A型肉毒素通过抑制三叉神经血管系统中降钙素基因相关肽释放和无菌性炎症反应而减轻偏头痛症状。     

TBL和PBL教学模式对局部解剖学实践操作的促进作用

局部解剖学是联系基础和临床的桥梁课程,但由于局解尸体严重紧缺,学生手术操作的机会和时间大幅减少,达不到满意的教学效果。为了解决这一问题,我们采用TBL结合PBL的教学模式进行探索与实践。研究结果表明新的教学模式在一定程度上改善了局部解剖学手术操作和标本学习环节的教学效果。     

异相睡眠剥夺对大鼠空间学习记忆的影响

目的探讨异相睡眠在空间学习记忆中的作用及其可能的神经中枢胆碱能机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为异相睡眠剥夺组 (PSD组 )、大平台对照组 (TC组 )、正常对照组 (CC组 ) ,应用Morris水迷宫观察 3组动物学习能力行为活动的变化 ,应用免疫组化方法研究 3组动物学习后海马胆碱乙酰基转移酶 (ChAT)的表达。结果①从第 2天开始 ,各组的训练成绩逐渐呈不同程度的提高 ,各个入水点第一次的参数统计显示 ,PSD组的记忆获得水平明显低于其他两组 (P <0 .0 1) ,但第二次各组之间无显著性差异(P >0 .0 5 )。②海马的ChAT免疫组化结果 :PSD组海马ChAT免疫阳性神经元分布稀疏 ,高倍视野下阳性细胞数低于其他两组 (P <0 .0 5 ) ;TC组和CC组海马ChAT免疫阳性神经元数无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论剥夺异相睡眠会造成大鼠空间参考记忆的获得和巩固障碍 ,而对同一任务的空间工作记忆无影响。剥夺异相睡眠引起海马的胆碱能神经系统的活动障碍 ,可能与海马依赖性任务的学习记忆障碍有关。