中期PS1/PS2双基因敲除小鼠模型海马组织中Hnf4a基因甲基化改变

目的初步分析中期Presenilin-1/Presenilin-2双基因敲除的阿尔茨海默病小鼠模型(PS1/PS2 dKO mice)海马组织中Hnf4a基因甲基化变化。方法应用简化表观亚硫酸氢盐测序技术(RRBS)检测分析3只12月龄雌性PS1/PS2 dKO mice海马组织基因组DNA甲基化状态的改变,3只12月龄雌性同系野生型小鼠作为对照,利用相应生物软件分析结果,获得异常甲基化状态的基因。结果 RRBS甲基化测序结果显示中期阿尔茨海默病PS1/PS2 dKO mice模型海马组织中Hnf4a基因呈现高甲基化状态(P0.05)。结论 Hnf4a基因在中期阿尔茨海默病小鼠模型中的高甲基化状态提示该基因的高甲基化可能参与到了阿尔茨海默病的病程当中。     

阿尔茨海默病presenilin-1/presenilin-2双基因敲除小鼠海马Ptprd基因甲基化改变

目的探讨Ptprd基因在中期阿尔茨海默病小鼠模型(presenilin-1/presenilin-2条件性双基因敲除小鼠,d KO小鼠)海马组织甲基化改变情况。方法取12月龄雌性d KO小鼠3只和12月龄雌性CBAC57小鼠3只分别作为实验组和对照组,采用第二代高通量测序技术(简化的代表性亚硫酸氢盐测序,RRBS)检测其小鼠海马组织基因组DNA,然后将测序后的结果过滤并用Bismark(v O.7.4)软件进行比对分析以获取异常甲基化基因。结果二代高通量测序法筛选出的Ptprd基因在中期阿尔兹海默病程中呈低甲基化改变(P0.05)。结论在中期AD d KO小鼠模型中可能出现了Ptprd基因低甲基化,低甲基化Ptprd基因可能与AD的中期病程有关。     

大鼠肝癌细胞系N1不同途径造模及比较

目的观察大鼠肝癌细胞系N1经肝、脾原位接种后肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生与转移等情况,比较及筛选适宜的HCC N1发生及肺转移动物模型。方法 N1细胞进行体外培养。24只8周龄雌性BALB/c A裸鼠随机分为2组(12只/组)并分别进行N1的肝、脾原位接种,观察并比较两组间小鼠的存活率,肝、脾成瘤及肝、肺转移率等肿瘤生物及病理学特征。结果 N1细胞肝原位接种组肝成瘤率为100%,肿瘤呈结节状生长,与腹壁及周围组织有不同程度的粘连侵袭,肺及肺门淋巴结转移率分别为44%和22%,未见脾转移。N1细胞脾原位接种组脾成瘤率为64%,肝转移率为91%,肿瘤呈结节状生长,与腹壁及周围组织亦有不同程度的侵袭粘连,肺及肺门淋巴结转移率均为18%。结论 N1细胞肝、脾原位接种均易成瘤,是良好的HCC发生、发展及相关干预的动物模型,其中,肝原位接种鼠可能更适合于HCC发生与肺转移机制及药物干预等研究。     

中期阿尔兹海默病presenilin-1/presenilin-2双基因敲除小鼠海马Vps33b基因的甲基化改变

目的:探讨中期阿尔兹海默病的presenilin-1/presenilin-2双基因敲除小鼠(dK O小鼠)模型海马中Vps33b基因甲基化改变情况。方法:采用简化的表观亚硫酸盐测序技术(RRBS)检测12月龄雌性dK O小鼠和同龄雌性野生型小鼠各3只海马组织基因组DNA异常甲基化改变情况,利用相关生物软件对照分析获取异常甲基化基因,并通过重亚硫酸盐甲基化测序技术进行相应验证。结果:RRBS法筛选出Vps33b基因在中期阿尔兹海默病dK O小鼠海马中呈高甲基化状态,经重亚硫酸盐单基因测序验证Vps33b基因为高甲基化,与RRBS检测结果一致。结论:Vps33b基因在中期AD dK O小鼠海马中呈高甲基化状态,提示高甲基化的Vps33b基因可能与中期阿尔茨海默病病程相关。     

34例乳腺癌HER-2基因扩增与蛋白表达相关性研究

目的了解乳腺癌组织中人表皮生长因子受体2（HER-2）基因扩增与Her-2／neu蛋白表达的一致性与相关性。方法采用荧光原位杂交（FISH）法及免疫组化（IHC）法分别检测349例浸润性乳腺癌患者的HER-2基因扩增与蛋白表达情况,分析二者检测结果的一致性与相关性。结果FISH与IHC符合率为55．3％,结果存在一致性（Kappa=0．189,P=0．000）,呈正相关（r=0．434,P=0．000）。结论FISH与IHC两种检测结果存在一致性,但IHC（＋～＋＋＋）患者均应以FISH检测作为评价HER-2基因是否扩增的标准方法。     

乳腺癌17号染色体多体在HER-2基因状态及临床病理特征中的意义

目的分析乳腺癌17号染色体多体在HER-2基因状态及临床病理特征中的意义。方法应用荧光原位杂交(FISH)技术检测186例浸润性乳腺癌患者石蜡切片中HER-2基因扩增与17号染色体多体情况,并分析17号染色体多体与HER-2基因扩增及各临床病理特征的关系。结果 186例样本中,17号染色体多体比例为43.0%(80/186),其中HER-2基因扩增组66.3%(53/80),HER-2基因未扩增组25.5%(27/106),前者显著高于后者(x2=30.929,P=0.000);17号染色体多体与肿瘤大小及肿瘤分级显示相关(r=-0.188,P=0.001;r=0.159,P=0.03),而与年龄、Ki67、淋巴结转移﹑ER、PR表达及ER/PR状态无关。结论 17号染色体多体与HER-2基因扩增者相关;并且可能提示乳腺癌患者预后不良。     

大鼠肝癌细胞系C5F肝与脾原位接种造模及比较*

目的：建立大鼠肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）细胞系C5F肝与脾原位接种模型,并比较其在不同内环境情况下对肿瘤发生和侵袭转移等能力的影响,筛选最佳C5F大鼠HCC肺转移动物模型。方法：20只雌性BALB/cA裸鼠随机分为肝、脾原位接种2组,观察裸鼠肝与脾成瘤率、裸鼠存活率、肿瘤病理学特点及远处脏器转移率及强度。结果：肝原位接种组成瘤率90％,肿瘤呈结节状膨胀性生长,肝与周围腹壁组织有粘连与侵袭,肺转移率80％。脾原位接种组脾成瘤率为56％,肝转移率67%,肺转移率33％。肝、脾接种组相比较,其肺转移率差异有统计学意义（P<0.05）。结论：C5F肝原位接种模型更适合于HCC发生及肺转移机制及药物干预等研究。     

349例乳腺癌HER-2基因扩增与蛋白表达相关性研究

目的了解乳腺癌组织中人表皮生长因子受体2(HER-2)基因扩增与Her-2/neu蛋白表达的一致性与相关性。方法采用荧光原位杂交(FISH)法及免疫组化(IHC)法分别检测349例浸润性乳腺癌患者的HER-2基因扩增与蛋白表达情况,分析二者检测结果的一致性与相关性。结果 FISH与IHC符合率为55.3%,结果存在一致性(Kappa=0.189,P=0.000),呈正相关(r=0.434,P=0.000)。结论 FISH与IHC两种检测结果存在一致性,但IHC(+~+++)患者均应以FISH检测作为评价HER-2基因是否扩增的标准方法。