高通量测序分析人诱导性多能干细胞分化为神经干细胞后microRNAs的表达变化

目的 筛选出人诱导性多能干细胞(hiPSCs)分化为神经干细胞(NSCs)后差异表达的microRNAs,为采用microRNAs调节hiPSCs诱导分化为NSCs的实验研究提供依据.方法 采用添加TGF-β信号通路抑制剂的单层贴壁培养法,将hiPSCs向NSCs进行为期7 d的诱导分化,收集并提取未分化的hiPSCs及诱导第7天的hiPSCs源性NSCs的总RNA,进行microRNAs高通量测序,生物信息学分析法筛选出hiPSCs分化为hNSCs后差异表达的mi-croRNAs,qPCR验证microRNAs的差异表达结果.结果 经过为期7 d的神经方向诱导,hiPSCs能高比例的转化为巢蛋白Nestin阳性、底板细胞Foxa2阳性及PAX6阳性的神经干细胞,经microRNAs高通量测序差异表达分析发现:hiPSCs分化为NSCs后具有统计学差异表达的microRNAs有429个(P<0.05),具有显著差异表达的microRNAs有343个,其中表达上调的microRNAs有186个,下调的157个.与调节hiPSCs向NSCs分化的关键信号通路TGF-β进行相关性分析发现miR-1247-3P、miR-34b-5p及miR-210-5p等20余个差异表达的microRNAs.结论 抑制TGF-β信号通路可以促进hiPSCs向Nestin阳性的NSCs的诱导分化,分化后的NSCs的microRNAs表达谱较hiPSCs有明显差异,提示有望通过调节与TGF-β信号通路相关的microRNAs的表达促进hiPSCs向NSCs的诱导分化.     

中西医综合治疗腰椎间盘突出213例

中西医综合治疗腰椎间盘突出２１３例胡允梅杨小穗何坤叶国生深圳市中医院麻醉科深圳５１８０３３关键词腰椎间盘突出；中西医综合治疗；硬膜外阻滞；中医推拿腰椎间盘突出是骨科的常见病及多发病，是腰腿痛的常见原因。常因扭伤、用力不当或劳累后发病，少数患者无外伤史...     

钢丝环形加"8"字内固定治疗髌骨骨折32例

目的探讨采用钢丝环形加“8”字内固定治疗髌骨骨折的临床疗效。方法从2001年3月至2006年8月采用钢丝环形加“8”字内固定方法治疗32例闭合性髌骨骨折。结果随访1～16个月，采用陆裕朴等评定标准评价疗效，优良率为93．7％。结论钢丝环形加“8”字内固定方法治疗髌骨骨折具有固定效果确切、临床疗效满意、操作简单、易于推广的优点。     

动力髋螺钉加空心螺钉治疗股骨粗隆间骨折

目的探讨动力髋螺钉加空心螺钉治疗股骨粗隆间骨折的方法和疗效。方法对45例股骨粗隆间骨折患者应用动力髋螺钉加空心螺钉治疗。结果 45例患者均随访6～22个月,平均12个月。术后10～16周经X线摄片及临床检查均显示骨折临床愈合,除2例轻度髋内翻畸形外,43例均恢复生活自理能力,无钢板螺钉断裂、松脱及骨折端移位等并发症。优32例,良11例,差2例,优良率为95.6%。结论动力髋螺钉加空心螺钉治疗股骨粗隆间骨折显著增加骨折处稳定性,有效地控制局部旋转,有利于骨折的早期愈合及早期功能锻炼,减少并发症的发生。     

MiR-125a-5p靶向APC激活经典WNT信号通路促进hiPSCs分化为多巴胺能神经前体细胞

目的通过调节miR-125a-5p的表达实现人诱导性多能干细胞(hiPSCs)向多巴胺(DA)能神经前体细胞及DA能神经元的高效转化。方法应用MicroRNAs高通量测序与分析,miR-125a-5p的筛选、靶基因(APC)的预测与验证;miR-125a-5p前体miR-125a慢病毒载体的构建与包装,miR-125a-5p过表达hiPSCs细胞株的构建、筛选及其向多DA能神经前体细胞与DA能神经元的诱导分化;免疫细胞化学、实时定量PCR(qRT-PCR)及蛋白印迹(WB)法检测miR-125a-5p过表达hiPSCs与对照hiPSCs向DA能神经前体细胞及DA能神经元诱导分化过程中神经前体细胞标志物Nestin、底板细胞标志物Foxa2、DA能神经前体细胞标志物En1、DA能神经前体细胞分选标志物Corin、神经元标志物Tuj1及DA能神经元标志物TH的表达。结果 MiR-125a-5p在hiPSCs向DA能神经前体细胞及神经元诱导分化过程中的表达呈递增趋势,miR-125a-5p靶向调节经典WNT信号通路关键因子APC,稳定过表达miR-125a-5p的hiPSCs细胞株能向DA能神经前体细胞及DA能神经元分化,其诱导分化效率与对照hiPSCs相比在神经前体细胞(NPCs)阶段FOXA2、EN1、CORIN的表达明显增高,神经元阶段TH、DAT和Nurr1的表达明显增高,提示过表达miR-125a-5p的hiPSCs具有更好的向DA能神经前体细胞及DA能神经元的诱导分化潜能。结论 MiR-125a-5p能通过靶向下调APC的表达激活经典WNT信号通路活性,促进hiPSCs向DA能神经前体细胞及DA能神经元的诱导分化。     

氯胺酮麻醉101例临床分析

我院1984年9月～1989年8月应用氯胺酮麻醉,取得较好的效果,但也有并发症发生。本文对101例氯胺酮麻醉及其并发病进行分析、讨论。材料与方法一、麻醉前用药术前30分钟肌注阿托品0.5mg(小儿0.01～0.02mg/kg)和鲁米那0.1克(小儿2～4 mg/kg)。二、麻醉用药与方法氯胺酮组(Ⅰ组):氯胺酮静脉分次注射,首次2mg/kg,以后每10～15分钟1mg/kg;氯胺酮首次肌注5mg/kg,20～30分钟后每10～15分钟1mg/kg静注,部分病人辅助用杜冷丁、非那根少量。氯胺酮复合麻组(Ⅱ组):小儿用2.5％SP(硫     

细胞替代治疗帕金森病研究进展

<正>帕金森病(PD)是最常见的神经系统退行性疾病之一，主要表现为静止性震颤、运动迟缓、肌僵硬等运动功能紊乱症状，常发生于老年人群，患病风险随年龄增大而增高。研究表明，PD的病因尚不明确，但与基因遗传和环境因素密切相关，如携带有富含亮氨酸重复的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Lrrk)2、葡萄糖脑苷脂基因(Gba)等致病基因，