Cripto-1基因沉默对人肝癌MHCC-97H细胞侵袭、迁移能力的影响

 目的: 探讨Cripto-1蛋白在人肝癌组织和肝癌细胞系中的表达,研究沉默Cripto-1基因后对肝癌细胞MHCC-97H侵袭和迁移能力的影响及可能的机制。方法: 采用Western blot检测11对肝癌组织及相应的癌旁组织和不同肝癌细胞株中Cripto-1蛋白的表达;收集80例肝癌石蜡标本,免疫组织化学方法检测Cripto-1蛋白的表达情况;Cripto-1 siRNA转染肝癌细胞MHCC-97H细胞后,real-time PCR和Western blot分别检测转染效率;Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blot分别检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白的表达。结果: Western blot检测结果显示肝癌组织中Cripto-1蛋白的表达明显高于对应的癌旁组织,Cripto-1蛋白在各肝癌细胞系中均有表达,且表达量高于对照细胞,其中高侵袭性肝癌细胞MHCC-97H表达量最高;免疫组织化学结果显示Cripto-1蛋白在88.7%的肝癌组织中表达;Cripto-1 siRNA转染MHCC-97H细胞后能显著降低Cripto-1 mRNA和蛋白的表达水平,并且能降低其侵袭和迁移能力;Western blot结果表明,Cripto-1基因沉默后能抑制MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结论: Cripto-1在肝细胞癌中的高表达可能与肝癌的发生发展密切相关,下调Cripto-1的表达可以抑制肝癌细胞侵袭和迁移能力,其机制可能与下调MMP-2、MMP-9的表达有关。     

肝切除术治疗肝内胆管结石术后发生并发症的危险因素分析

目的 探讨肝切除治疗肝内胆管结石术后并发症的危险因素.方法 对中山大学附属第一医院近4年来择期行肝切除术的肝内胆管结石363例病人的临床资料进行回顾性分析.根据术后是否发生并发症分成两组,A组为并发症组(n=110);B组为无并发症组(n=253).对可能引起并发症的因素进行单因素和多因素统计分析.结果 本组因并发症病死2例,手术病死率为0.6%.110例病人术后出现并发症,发生率为30.3%.术后并发症包括:伤口感染/液化42例(11.6%)、胸腔积液41例(11.3%)、膈下积液36例(9.9%)、胆漏21例(5.8%)、腹腔积液/感染13例(3.6%)、消化道出血3例(0.8%)、胆道出血2例(0.6%)、肝功能衰竭1例(0.3%).多因素分析结果 显示,既往胆道手术史(P=0.042,OR=0.617,95%CI:0.388～0.982)和手术时间(P=0.0001,OR=0.994,95%CI:0.991～0.997)是术后发生并发症的独立危险因素.结论 既往胆道手术史与手术时间的长短是影响肝内胆管结石肝切除术后并发症发生的独立危险因素.对既往有胆道手术史的病人充分的术前准备,提高手术技巧,仔细分离,尽量缩短手术时间是防止肝切除术后出现并发症的关键因素.     

前入路右半肝切除术与传统右半肝切除术治疗大肝癌的对比观察

Objective To compare the outcomes between anterior versus conventional approach right hepatectomy for large hepatocellutar carcinoma(HCC).Methods A total of 188 consecutive patients with large HCC(≥5 cm)undergoing right hepatectomy were reviewed retrospectively.Among them,92patients received anterior approach right hepatectomy(anterior group)while the other conventional right hepatectomy(conventional group).Their clinicopathologic data and survivals were compared.Results There were five surgical deaths(2.7%),two in the anterior group and three in the conventional group.The biochemical and tumor pathological data(except for tumor size) of these two groups were comparable.The mean intranperative blood loss,the number of patients with massive hemorrhage(＞3000ml)and the volume of blood transfusion of the anterior group were markedly less than those of conventional group.The 1-,3-year disease-free survival rates of the anterior group were significantly better than those of the conventional group anterior group were also markedly higher than those of conventional group.The Cox regression model indicated that tumor size[P=0.014,odd ratio(OD):1.074] and surgical procedure(P:0.009,OD=0.468) were independent risk factors correlated with disease-free survival.And the surgical procedure(P=0.003,OD=0.369) was the only independent risk factor for postoperative cumulative survival.Conclusion Anterior approach right hepatectomy can significantly decrease intraoperative blood loss.The postoperative survivals of large HCC patients are significantly improved by anterior approach right hepatectomy.     

缺血预处理减轻大鼠肝缺血再灌注损伤的免疫机制研究

目的探讨大鼠肝缺血再灌注损伤(HIRI)的免疫机制和缺血预处理(IPC)的保护作用。 方法80只大鼠被随机分为假手术组(A组)、肝门阻断20 min组(B组)、30 min组(C组)、40 min组(D组)以及肝门阻断30 min前预处理组(E组),每组再分为再灌注2 h亚组和24 h亚组,各8只。检测再灌注后2 h、24 h的血丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白细胞介素10、12(IL-10、IL-12)以及外周血T淋巴细胞亚群的水平,观察再灌注后2 h、24 h时的存活率及肝脏病理情况。 结果随着肝门阻断时间的延长,ALT、AST显著升高,肝内炎症细胞浸润增加,24 h存活率逐渐降低。D组再灌注2 h时,CD8+ T淋巴细胞显著升高,CD4+/CD8+比值下降,调节性T淋巴细胞显著减少,血清IL-10显著降低,而IL-12水平显著升高。再灌注后24 h,B组大鼠各项指标逐步恢复至假手术组水平,而D组大鼠CD4+T淋巴细胞、CD4+/CD8+比值尤其是Treg显著升高,且IL-10水平显著升高,IL-12水平明显降低。与C组相比,E组阻断30 min后无一例死亡,再灌注2 h的ALT、AST水平显著降低,Treg和IL-10水平显著升高,IL-12水平明显降低,再灌注24 h后各项指标恢复并接近假手术组水平,肝脏病理损伤较轻。 结论肝缺血再灌注引起肝脏损伤甚至死亡,可能与诱导T淋巴细胞尤其是Treg和细胞因子的紊乱有关。缺血预处理可以增加再灌注早期的Treg细胞,有效纠正免疫紊乱,减轻损伤。     

Glypican-3在原发性肝细胞癌中的表达及其对预后的影响

目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测了59例HCC组织及其癌旁组织、10例肝内胆管细胞癌组织、11例肝硬化肝组织、14例正常肝组织(肝血管瘤旁)中GPC3的表达。应用Kap lan-M e ier法进行生存分析;Cox比例风险回归模型进行患者术后无瘤生存的独立危险因素分析。结果:GPC3 mRNA在HCC组织中的阳性率为83.1%(49/59),明显高于癌旁组织的35.6%(21/59)(2=27.53,P0.01)。GPC3蛋白在HCC中的阳性率为78.0%(46/59),也明显高于在癌旁组织的阳性率32.2%(19/59)(2=24.97,P0.01)。而GPC3在肝内胆管细胞癌(ICC)、肝硬化和正常肝组织中不表达。Kap lan-M e ier生存分析显示在HCC组织中GPC3(+)组病人的1年无瘤生存率明显低于GPC3(-)组(33.6%vs72.7%,P0.05);癌旁组织GPC3(+)组病人的1年无瘤生存率也低于GPC3(-)组(23.5%vs40.1%,P0.05);随着GPC3在HCC组织中表达强度的增加,患者的无瘤生存率也明显降低。Cox风险回归模型分析结果显示,肿瘤AFP阳性[优势比(OR)]=0.372,95%置信区间(CI):0.140-0.900,P0.05]、肿瘤大小(OR=5.215,95%C:I 1.737-15.656,P0.01)、癌旁组织GPC3表达(OR=0.226,95%CI:0.085-0.599,P0.01)、肿瘤GPC3表达的强度(OR=1.946,95%C:I 1.080-3.507,P0.05)是影响患者术后无瘤生存率的独立危险因素。结论:GPC3在肝细胞癌组织中高表达,而在肝内胆管细胞癌组织、肝硬化组织和正常肝组织不表达。癌旁组织GPC3表达、肿瘤GPC3表达的强度是影响HCC患者术后无瘤生存率的独立危险因素;但对患者1年总体生存率无明显影响。     

前入路右半肝切除术与传统右半肝切除术治疗大肝癌的对比观察

Objective To compare the outcomes between anterior versus conventional approach right hepatectomy for large hepatocellutar carcinoma(HCC).Methods A total of 188 consecutive patients with large HCC(≥5 cm)undergoing right hepatectomy were reviewed retrospectively.Among them,92patients received anterior approach right hepatectomy(anterior group)while the other conventional right hepatectomy(conventional group).Their clinicopathologic data and survivals were compared.Results There were five surgical deaths(2.7%),two in the anterior group and three in the conventional group.The biochemical and tumor pathological data(except for tumor size) of these two groups were comparable.The mean intranperative blood loss,the number of patients with massive hemorrhage(＞3000ml)and the volume of blood transfusion of the anterior group were markedly less than those of conventional group.The 1-,3-year disease-free survival rates of the anterior group were significantly better than those of the conventional group anterior group were also markedly higher than those of conventional group.The Cox regression model indicated that tumor size[P=0.014,odd ratio(OD):1.074] and surgical procedure(P:0.009,OD=0.468) were independent risk factors correlated with disease-free survival.And the surgical procedure(P=0.003,OD=0.369) was the only independent risk factor for postoperative cumulative survival.Conclusion Anterior approach right hepatectomy can significantly decrease intraoperative blood loss.The postoperative survivals of large HCC patients are significantly improved by anterior approach right hepatectomy.     

肝内胆管结石患者胆汁的细菌谱及临床意义

目的探讨肝内胆管结石患者胆汁细菌谱以及其对肝切除术后感染并发症发生的关系。方法回顾性分析我院2007年8月至2009年3月有完整胆汁细菌培养结果并行择期肝切除术的肝内胆管结石患者162例,分析胆汁中细菌谱,通过单因素和多因素分析引起术后感染并发症的危险因素。结果肝内胆管结石患者胆汁细菌培养阳性率为77．2％,革兰阴性菌占61．7％。前3位菌属分别是大肠埃希杆菌属（30．5％）、粪肠球菌属（29．8％）和单胞菌属（14．9％）。本组无手术死亡,感染并发症发生率为29．0％,最常见的并发症为切口感染、胆漏和腹腔感染。Logistic多因素分析表明胆汁细菌培养阳性（P=0．026,OR=8．560）和手术时间（P=0．04,OR=1．007）是引起肝内胆管结石肝切除术后感染并发症发生的独立危险因素。结论肝内胆管结石患者胆汁细菌种类繁多,以大肠埃希杆菌属、粪肠球菌属和单胞菌属为主,胆汁细菌培养阳性是引起术后感染并发症发生的危险因素。     

双侧规则性肝段/叶切除术治疗复杂性肝内胆管结石

 【目的】 探讨双侧规则性肝段/叶切除术治疗复杂性肝内胆管结石的短期和远期效果&;#65377; 【方法】 回顾性分析我院近10年来行左右双侧规则性肝段/叶切除术治疗复杂性肝内胆管结石的101例患者,分析其短期和远期效果&;#65377; Cox风险比例模型分析影响结石术后复发的危险因素&;#65377; 【结果】 本组病例无手术死亡,术后并发症发生率为28.7%&;#65377;肝切除术后结石清除率为84.2%(85/101),经术后胆道镜取石,最终的结石清除率为95.0%(95/101)&;#65377;结石复发率为7.9%,术后胆管炎发生率为6.5%(中位随访时间为54个月)&;#65377;Cox风险比例模型结果显示肝切除范围 < 结石分布的范围是结石术后复发的独立危险因素:P = 0.015,危险度(OR) = 2.152, 95%可信区间(CI):1.624 ~ 4.721&;#65377;【结论】 双侧规则性肝段/叶切除术治疗复杂性肝内胆管结石是安全的,术后短期和远期效果良好,肝切除的范围是影响术后结石复发的独立危险因素&;#65377;     

中晚期肝癌多纳非尼联合抗PD-1单抗、HAIC治疗成功转化1例

肝癌是一种临床常见的严重威胁人类健康的消化系统肿瘤。2020年肝癌发病率位居恶性肿瘤第6位,死亡率位居癌症相关死亡第3位[1]。肝癌早期缺乏典型症状,治疗效果较差,靶向治疗、免疫治疗和介入治疗是中晚期肝癌系统治疗的重要组成部分[2]。国内一项Ⅲ期临床研究显示,索拉非尼联合FOLFOX 4方案肝动脉灌注化疗(hepatic artery infusion chemotherapy,HAIC)可将合并门静脉癌栓肝癌患者的生存期延长近一倍[3]。我院收治的1例中晚期肝癌患者经多纳非尼联合抗PD-1单抗、FOLFOX方案HAIC治疗3个月转化成功,现将该病例治疗经过报告如下。     

血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3蛋白测定在肝细胞癌诊断中的价值

目的检测血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3,GPC3)的浓度,探讨其对原发性肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法用酶链免疫吸附试验(ELISA)对67例HCC患者、41例肝硬化患者、30例健康者血清中GPC3进行测定,化学发光法检测甲胎蛋白(AFP)。结果 HCC患者血清GPC3平均浓度为(10.85±0.58)μg/L;肝硬化患者血清GPC3平均浓度为(2.45±0.61)μg/L;健康者血清GPC3平均浓度为(1.14±0.22)μg/L。HCC患者血清GPC3浓度明显高于肝硬化患者和健康者(H=327.000,P=0.0001),肝硬化患者与健康者差异无统计学意义(Z=0.792,P=0.429)。当以3μg/L为诊断界值时,GPC3对HCC的敏感性和特异性分别为88.1%和85.9%。当AFP以20μg/L为诊断界值时,其对HCC的敏感性和特异性分别为65.7%和76.2%。GPC3对HCC的敏感性显著高于AFP(χ2=10.995,P=0.001)。在23例AFP阴性的HCC患者中有17例GPC3阳性,阳性率为73.9%(17/23)。GPC3的ROC曲线下面积大于AFP(0.898vs0.814)。结论血清GPC3对HCC有很高的敏感性和特异性,可作为一种新的肿瘤标志物用于HCC的诊断。