人巨细胞病毒抑制粒-单及红系祖细胞的体外增殖及干预研究

探讨人巨细胞病毒 (HCMV)抑制脐血粒 -单系祖细胞的 (CFU GM)、红系爆式祖细胞 (BFU E)及红系祖细胞 (CFU E)的体外增殖和黄芪注射液与更昔洛韦(GCV)对此的干预作用 ,采用造血祖细胞体外培养、聚合酶链反应 (PCR)技术 ,培养、观察、计数CFU GM、BFU E及CFU E集落产率、抑制率、提高率 ,集落峰值时间和集落维持时间 ,并用PCR检测集落细胞内HCMV DNA。结果显示 :①HCMVAD169对CFU GM、BFU E及CFU E均有抑制作用 ,其抑制作用与HCMV浓度有关 ,高浓度 ( 1∶1 0 ,1 1 0 0 )感染组与对照组比较集落产率明显下降 (P <0 0 1 ) ,集落维持的时间明显缩短 (P <0 0 1 ) ,集落峰值时间无明显差异 (P >0 0 5) ,而低浓度组 ( 1∶1 0 0 0 )无此作用 ;②PCR检测发现在HCMV感染的造血祖细胞内存在HCMV DNA ;③在 1∶1 0感染组中 ,加入黄芪注射液与更昔洛韦后 ,HCMVAD169感染的CFU GM、BFU E及CFU E集落产率明显增加 (P <0 0 1 )。结论 :①造血祖细胞是HCMVAD169的宿主细胞之一 ,HCMVAD169能直接感染造血祖细胞 ;②在体外HCMVAD169对CFU GM、BFU E、CFU E的生长 ,集落形成有明显的抑制作用 ;③黄芪与更昔洛韦有抗HCMV作用 ,能促进受HCMV感染的造血祖细胞集落增殖     

人巨细胞病毒潜伏—激活及其对造血系统的影响

人巨细胞病毒（HCMV）感染在人群中相当普遍，通常呈潜伏感染，外周血单核细胞和骨髓造血祖细胞是HCMV主要潜伏部位，经过细胞分化、免疫抑制、细胞因子作用等潜伏－激活机制可致严重疾病。近10年来，随着免疫低下状态人群（艾滋病，器官移植和恶性肿瘤等患者）的增多，HCMV感染及其引发的严重疾病逐渐增加，造血系统常受累，其中骨髓抑制和血小板减少症常见。     

人巨细胞病毒对人脐血红系祖细胞生长的影响及作用机制研究

人巨细胞病毒 (humancytomegalov irus ,HCMV)感染在我国发生率达 80 %～ 90 % [1 ] ,大多数是潜伏感染。造血系统是其感染的主要受累部位之一 ,引起各系血细胞减少 ,其机制尚未明了 ,本文旨在探讨HCMV对人脐血红系祖细胞生长的抑制和其作用机制。　　脐血标本 :2 0例脐血标本由本院产房提供 ,取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。其母亲健康 ,HBsAg阴性 ,每份标本常规ELISA检测抗CMV IgG ,PCR检测HCMVDNA均为阴性 (共筛查 2 5例标本获得 )。病毒 :HCMV毒株为HCM VAD169,购自同济医科大学同济医院 ,感染滴度为 10 …     

人巨细胞病毒对粒-单及红系祖细胞体外增殖的影响

目的：探讨人巨细胞病毒(HCMV)对脐血粒—单系祖细胞(CFU—GM)、红系爆式祖细胞(BFU—E)及红系祖细胞(CFU—E)体外增殖的抑制作用。方法：采用造血祖细胞体外半固体培养技术，研究HCMV—ADl69株对脐血CFU—GM、BFU—E及CFU—E集落生长的影响；用聚合酶链反应(PCR)技术检测集落细胞中HCMV—ADl69 DNA。结果：①HCMV—ADl69对CFU—GM、BFU—E及CFU—E均有抑制作用。②其抑制作用与HCMV浓度有关，高浓度(1：10，1：100)感染组与对照组比较集落产率明显下降(P＜0.01)，集落维持的时间明显缩短(P＜0.01)，而低浓度组(1：1000)无此作用。③经PCR检测发现病毒感染组CFU—GM、BFU—E及CFU—E集落细胞中有HCMV—ADl69 DNA存在。结论：①HCMV—ADl69可抑制CFU—GM、BFU—E及CFU—E集落的生长。②造血祖细胞是HCMV—ADl69的宿主细胞之一，HCMV—ADl69能直接感染造血祖细胞。HCMV感染患儿出现的粒细胞减少和贫血可能与此有关。     

人类巨细胞病毒感染对脐血造血祖细胞体外增殖的影响

目的:探讨人类巨细胞病毒(HCMV)感染对脐血造血祖细胞(CFU-Gm、CFU-E、BFU-E、CFU-Mix及CFU-Mk)体外增殖的抑制作用及其机制。方法:采用造血祖细胞体外半固体培养技术,培养、观察HCMV-AD169株对脐血CFU-Gm、CFU-E、BFU-E、CFU-Mix及CFU-Mk集落数、抑制率、集落峰值时间和集落维持时间;并用聚合酶链反应(PCR)技术检测集落细胞内HCMV-DNA。结果:①HCMV-AD169株的不同感染滴度[103、104及105空斑形成单位(PFU)/ml]均能明显抑制CFU-Gm、CFU-E、BFU-E、CFU-Mix及CFU-Mk集落的形成,集落数随病毒感染滴度的增高而明显减少;②与对照组比较集落的抑制率分别是a.105PFU感染组依次为40.9%、47.9%、53.3%、55.2%、42.1%(均P<0.01);b.104PFU感染组32.7%、30.2%、36.1%、35.1%、29.7%(均P<0.01);c.103PFU感染组8.0%、6.9%、8.2%、20.3%、14.5%(CFU-Gm、CFU-E、BFU-E与对照组比较差异无统计学意义,余均P<0.01),显示抑制程度与病毒感染滴度呈剂量依赖关系;③集落维持时间感染组较对照组明显缩短(P<0.05);④PCR检测感染组发现CFU-Gm、CFU-E、CFU-Mix及CFU-Mk集落细胞内均有HCMV-AD169DNA存在。结论:HCMV-AD169能直接感染CFU-Gm、CFU-E、BFU-E、CFU-Mix及CFU-Mk造血祖细胞,并抑制造血祖细胞的增殖,此可能与HCMV感染患儿出现粒细胞减少、血小板减少和贫血等造血功能紊乱有关。     

维生素A缺乏对肠粘膜细胞因子免疫应答的影响

目的研究维生素A缺乏(vitamin A deficiency,VAD)对大鼠肠粘膜细胞因子免疫应答的影响,探讨VAD降低粘膜免疫力的机制。方法在建立VAD大鼠模型的基础上,给予鼠伤寒沙门氏菌灌胃诱导肠道感染。取新鲜回肠组织,采用ELISA和RT-PCR法,从蛋白和基因水平测定IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10和IL-12的变化。结果VAD大鼠肠粘膜主要由树突状细胞产生的细胞因子IL-12的表达显著增高,[蛋白(lg ng/g mucosal tissue)VA正常组4.07±0.15,VAD4.41±0.02,基因(lg copies/50ng total RNA)VA正常组4.99±0.18,VAD5.53±0.15,伴有肠道感染时IL-12的产生进一步升高,蛋白和基因两者分别为:4.59±0.15和5.78±0.26];Th1细胞因子:IFN-γ降低两者分别为蛋白:VA正常组3.15±0.34,VAD2.67±0.15;基因:VA正常组3.15±0.34,VAD2.67±0.15,和VA正常组5.36±0.26,VAD5.19±0.27,均(P<0.01);Th2细胞因子IL-4在肠道感染后显著降低(蛋白VAD组为2.29±0.13,VA正常组2.39±0.20),尤其是VAD大鼠IL-4水平更低(蛋白2.13±0.17);IL-6mRNA在肠道感染时都明显下降(感染后VA正常组5.45±0.3,感染后VAD组5.44±0.3,VA正常组5.85±0.31)(P<0.01),IL-10mRNA在未感染VAD大鼠也降低(VAD5.10±0.14,VA正常组5.78±0.26)(P<0.01),在肠道感染时降低更为显著(4.56±0.33)(P<0.01)。结论对肠粘膜局部细胞因子产生水平的调节可能是VAD影响粘膜免疫功能的重要机制。     

维生素A缺乏对肠粘膜树突状细胞的影响

目的研究维生素A缺乏(vitamin A deficiency,VAD)对大鼠肠粘膜树突状细胞(dendritic cell,DC)数量、成熟度和抗原识别的影响,及其在肠道感染时的变化,探讨VAD调节肠粘膜抗感染免疫的机制。方法在建立VAD大鼠模型的基础上,给予鼠伤寒沙门氏菌灌胃诱导肠道感染。取新鲜回肠组织,采用免疫组化和RT-PCR法,观察肠粘膜DC数目(OX一62阳性细胞数)、成熟度(CD80、CCR7的阳性面积);抗原识别受体表达水平(TLR2和TLR4的阳性面积)和信号转导(MyD88的基因转录水平)。结果 VAD与VA正常大鼠比较,肠粘膜DC的数目显著增加,当合并感染时不仅DC数量而且成熟分化标志CCR7也明显增加。肠集合淋巴小结中TLR2、TLR4的蛋白表达都明显升高,在合并感染后TLR2的表达上调更明显,MyD88 mRNA水平上调。结论 VAD大鼠粘膜DC的增多和活化可能是诱导炎症反应增强,导致粘膜损伤的重要机制之一。     

人巨细胞病毒潜伏-激活及其对造血系统的影响

人巨细胞病毒（HCMV）感染在人群中相当普遍,通常呈潜伏感染,外周血单核细胞和骨髓造血祖细胞是HCMV主要潜伏部位,经过细胞分化、免疫抑制、细胞因子作用等潜伏-激活机制可致严重疾病。近10年来,随着免疫低下状态人群（艾滋病,器官移植和恶性肿瘤等患者）的增多,HCMV感染及其引发的严重疾病逐渐增加,造血系统常受累,其中骨髓抑制和血小板减少症常见。