P2RX7和组蛋白修饰变化在曲古抑菌素A缓解烟草烟雾暴露所致小鼠卵巢损伤中的作用

目的 探索P2RX7和组蛋白修饰变化在曲古抑菌素A（TSA）抑制NLRP3缓解烟草烟雾（CS）暴露所致的 小鼠卵巢损伤过程中的作用。方法 通过CS暴露30 d方法制备小鼠卵巢损伤模型,给予TSA进行治疗;HE染色观 察各组小鼠卵巢组织形态;Western blot技术检测各组小鼠卵巢组织组蛋白去乙酰化酶（HDAC）1、HDAC2、NLR家族 Pyrin域蛋白3（NLRP3）、P2RX7、Zeste同源物增强子2（EZH2）表达以及H3K4me1、H3K4me2、H3K27me3和H3K9ac总 的修饰水平变化。结果 与control组相比,CS组小鼠卵巢总体积减小,卵泡总数减少,卵巢皮质发生萎缩,TSA可有 效抑制CS暴露引起的小鼠卵巢组织形态结构改变。CS组小鼠卵巢组织中HDAC1、HDAC2、NLRP3和P2RX7表达水 平较control 组明显升高,TSA 有效抑制了CS 暴露激活的小鼠卵巢组织HDAC1、HDAC2及焦亡相关蛋白NLRP3和 P2RX7的表达（P＜0.05）。CS暴露后小鼠卵巢组织总H3K4me1、H3K4me2和H3K9ac表达水平明显升高,TSA有效抑 制了CS暴露诱导的小鼠卵巢组织总H3K4me1、H3K4me2和H3K9ac的表达上调（P＜0.05）。结论 P2RX7和组蛋白 修饰变化参与CS暴露所致的卵巢NLRP3炎性小体的激活以及TSA缓解卵巢损伤的过程。     

干扰素-γ对脂肪间充质干细胞免疫调节相关基因表达的影响

目的探讨IFN-γ对脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)免疫调节相关基因表达的影响。方法体外分离培养ADSCs,应用流式细胞术对3代细胞表面抗原CD14、CD34、CD45、CD90、CD105和HLA-DR进行检测;并将细胞置于骨和脂肪诱导分化培养基中进行诱导分化,检测其多向分化潜能。实验分为正常对照组和IFN-γ处理组(IFN-γ浓度1000 u/ml),处理24h后,通过实时定量PCR方法检测各组细胞免疫调节、趋化因子、粘附分子以及生长因子相关基因的表达情况。结果 IFN-γ处理后,显著上调2种免疫调节因子基因(IDO-1和HLA-G5)在ADSCs表达水平,显著上调2种粘附分子基因(ICAM-1和VCAM-1)表达水平,显著上调3种趋化因子基因(CXCL9、CXCL10和CXCL11)表达水平(0.01)。结论 IFN-γ刺激可以上调ADSCs部分免疫调节因子、粘附分子和趋化因子基因表达,对生长因子基因表达影响不大。     

Smad2/3/4和TGF-β1在先天性巨结肠症组织中的表达

转化生长因子-β(TGF-β)是许多具有共同生物学特性的信号分子组成的大家族,称为TGF-β超家族(transforming growth factor-beta superfamily),TGF-β1是其中一员.TGF-β1是一类具有多种功能的多肽类生长因子[1-2],主要功能是抑制细胞生长,促进基质形成,与多种疾病的发生发展密切相关.TGF-β1主要作用包括调节细胞增殖和分化,参与胚胎发育调节,促进细胞外基质形成和抑制免疫反应等[3].此外,参与细胞周期、细胞生长、骨骼发育和蛋白氨基酸磷酸化,在疾病发生发展中起到免疫抑制的作用.[4].     

体积分数95%乙醇建立薄型子宫模型大鼠子宫内膜中波蛋白和血管内皮生长因子的变化

BACKGROUND: Ethanol chemical damage method can be used to establish thin endometrium rat model. Expression of proliferation-related proteins is decreased in thin endometrium animal model, which contributes to the study of thin endometrium-related mechanism and provides guidance for clinical treatment. OBJECTIVE: To explore the changes in vimentin and vascular endothelial growth factor expression in rat models of high concentrations of ethanol-induced thin endometrium.  METHODS: 0.3 mL 95% ethanol was slowly injected in the right uterus of female Sprague-Dawley rats to establish rat models of thin endometrium. An equal volume of physiological saline was injected into the left uterus as control sides.  RESULTS AND CONCLUSION: The thickness of endometrium in the injured uterus was significantly thinner than the control ones. Number of glands reduced, structure became disorder, and vimentin and vascular endothelial growth factor expression markedly diminished. These results suggest that 95% ethanol injury can effectively establish rat models of thin endometrium. Proliferation-related protein expression altered in the thin endometrium.      

宫内生长受限仔鼠肾脏发育和细胞外信号调节激酶的表达与活性

目的研究宫内生长受限(IUGR)仔鼠肾组织中调控输尿管芽分支发生的关键因子细胞外信号调节激酶(ERK1/2)及下游基因Wnt4的表达与活性,探讨其与肾脏发育不良和高血压发生的关系。方法孕鼠随机分为对照组(n=30)和IUGR组(n=30),孕期低蛋白饮食法建立IUGR模型,自然分娩后部分新生仔鼠(0 d)处死取其双肾称重,其他仔鼠常规饲养。测定3周龄和8周龄仔鼠的肾指数、肾小球数目、肾功能和血压,采用蛋白印迹法测定出生0 d和3周仔鼠肾脏中ERK1/2和Wnt4蛋白水平和磷酸化水平,荧光定量反转录(RT)-PCR法检测其肾脏Wnt4 mRNA水平。结果新生和3周龄IUGR仔鼠体质量和肾质量均低于对照组,8周IUGR仔鼠体质量超过对照组,但肾指数依然降低,肾小球数目明显减少(Pa<0.05)。8周IUGR仔鼠血压升高、内生肌酐清除率(CCr)减低,且肾小球数目与血压呈负相关(Pa<0.05)。出生0 d和3周时IUGR仔鼠肾组织中ERK1/2磷酸化水平降低(Pa<0.05),Wnt4的表达水平始终低于同龄对照组(Pa<0.05)。结论在肾单位发生和生长成熟阶段,宫内蛋白营养不良的子代肾组织ERK蛋白活性降低及诱导Wnt4表达异常可能是肾小球数目减少、成年肾滤过率降低引发高血压易感的机制之一。     

双向电泳-飞行时间串联质谱对先天性脊柱裂大鼠脊髓差异表达蛋白的鉴定

  应用双向电泳-飞行时间串联质谱技术筛查反式维甲酸致先天性脊柱裂大鼠脊髓组织与正常发育胚胎的差异表达蛋白,初步探讨先天性脊柱裂神经功能损伤的可能机制。     

胚胎期骨髓间充质干细胞移植对先天性脊柱裂大鼠脊髓NGF和BDNF的表达及细胞凋亡的影响

目的 研究胚胎期骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)移植对显性脊柱裂胎鼠脊髓组织中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达及细胞凋亡的影响.方法 建立全反式维甲酸致畸的显性脊柱裂大鼠模型,妊娠16d通过胎仔外科与显微注射相结合的方法将BMSC移植入胎鼠脊髓缺损部位,待胎鼠成活至妊娠21 d取脊髓,免疫荧光染色检测移植BMSC后脊髓缺损部位NGF和BDNF的表达,同时TUNEL染色法检测细胞凋亡的变化.结果 显性脊柱裂胎鼠BMSC移植后脊髓内BDNF、NGF的表达增强,而且BMSC移植区表达升高最显著,TUNEL染色显示BMSC移植组细胞凋亡明显减少.结论 胚胎期BMSC移植后改变脊柱裂病变区微环境,可能通过上调神经营养因子的表达,抑制细胞凋亡,从而促进脊柱裂神经损伤的修复.     

TNF-α对肠上皮细胞PIgR、NF-κB亚单位表达影响

目的:研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对Caco-2细胞表达多聚免疫球蛋白受体(pIgR)和核因子-κB(NF-κB)亚单位RelA/RelB的影响。方法:采用Real-time PCR方法检测肠上皮细胞表达pIgR、RelA和RelB的变化。结果:与无TNF-α刺激比较,用不同浓度TNF-α刺激后pIgR、RelA和RelB基因的表达明显增加(P<0.01)。结论:TNF-α促进肠上皮细胞表达pIgR、NF-κB亚单位基因表达,TNF-α通过NF-κB通路激活pIgR基因的转录。     

宫内生长受限子鼠肝脏脂肪代谢关键酶表达的研究

目的 通过检测胎儿宫内生长受限(intrauterine growth restriction,IUGR)子鼠肝脏中脂肪代谢关键酶及可促进脂肪合成的核转录因子固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)的表达,探讨IUGR个体发生脂肪性肝病的分子机制.方法 通过孕期低蛋白饮食法复制大鼠IUGR模型,采用定量逆转录-聚合酶链反应和Western blotting技术检测孕20 d(E20)胎鼠和12周成年子鼠(A12)肝脏中SREBP1c的mRNA和蛋白含量,同时检测肝脏脂肪酸合酶(FAS)和肝脂肪酶(HL)的表达变化.结果 IUGR成年子鼠肝脏三酰甘油浓度增加(P＜0.01).IUGR胎鼠和成年子鼠肝脏SREBP1和FAS的mRNA和蛋白表达均明显高于同龄对照,且FAS与SREBP1c的mRNA水平成正相关(均P＜0.05).IUGR胎鼠肝脏HL表达正常但成年后表达增高(均P＜0.05).结论 “胎儿程序化”影响使IUGR子代自围产期至成年肝脏中脂肪合成的调控因子SREBP1表达增加,诱导生脂酶FAS的表达,可能是成年肝脏脂质堆积及脂肪性肝病高发的机制之一.     

先天性巨结肠的SEMA3A基因单核苷酸多态性分析

目的探讨SEMA3A基因单核苷酸多态性（SNP）与先天性巨结肠发生的关系。方法应用PCR扩增后直接测序的方法．分析119例先天性巨结肠患者和93例正常人群中SEMA3Ars7804122、rs7978212个SNP位点基因型。结果SEMA3A基因rs797821位点的等位基因频率和基因型频率在先天性巨结肠组和正常对照组的分布差异无统计学意义（P〉0．05）。rs7804122位点的G等位基因（26．9％）和GG（5．0％）,AG（43．7％）基因型在先天性巨结肠组中的频率明显高于正常对照组（12．9％、1．1％、23．7％,P〈0．05）。结论SEMA3A基因是先天性巨结肠重要的易感基因．其rs7804122位点G等位基因是先天性巨结肠发病的危险因素。