长链非编码RNA与组蛋白乙酰化关系的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNAs, lncRNAs)是一类长度大于200个核苷酸且不具有编码蛋白质功能的RNA分子,参与基因转录调控,包括染色质修饰和直接的转录调控表达,同时也调控转录后事件。组蛋白乙酰化是表观遗传修饰形式,lncRNAs参与组蛋白乙酰化的调节过程,促进或抑制多种肿瘤的进展。本文就lncRNAs与组蛋白乙酰化关系的研究进展作一综述。     

糖原合酶激酶3β抑制剂TDZD-8对急性肝细胞损伤中自噬及NLRP3炎性小体的影响

目的 探讨糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)抑制剂TDZD-8在急性肝细胞损伤衰竭模型中对细胞自噬及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing 3,NLRP3)炎性小体的影响。方法 体外培养人正常肝细胞L02细胞, CCK-8法测定不同浓度TDZD-8对L02细胞活性的影响;将细胞分为3组(对照组、模型组、TDZD-8组),经处理后,试剂盒检测细胞上清液中游离DNA(cell-free DNA,cf-DNA)及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量;免疫荧光法检测3组细胞第9位丝氨酸磷酸化的GSK3β(p-GSK3β,Ser9)表达含量;Western blot法检测3组细胞中NLRP3、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、IL-1β、UNC－51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK-1)、Beclin1及p62蛋白水平变化。结果 CCK-8结果显示,在TDZD-8浓度≤20μmol/L时药物对细胞活性无明显影响。3组细胞经处理后,与对照组比较,模型组p-GSK3β(Ser9)荧光强度明显减弱,GSK3β被激活,同时上清液中cf-DNA和LDH水平明显升高,NLRP3、IL-18和IL-1β蛋白水平也明显升高,而自噬相关蛋白ULK1和Beclin1蛋白水平明显下降,p62水平升高,自噬水平受到抑制(P<0.05)。经TDZD-8处理后,与模型组比较,细胞p-GSK3β(Ser9)荧光强度明显增强,上清液中cf-DNA和LDH水平显著降低,NLRP3、IL-18和IL-1β蛋白水平也明显降低,而自噬水平显著升高(P<0.05)。结论 TDZD-8在急性肝细胞损伤衰竭的模型中能够抑制NLRP3炎性小体活化同时激活细胞自噬起到保护作用。     

自噬激动剂LYN-1604在肝细胞炎性损伤中的保护作用

目的 探讨在肝细胞炎性损伤模型中自噬激动剂LYN-1604对肝细胞L02的保护作用。方法 体外培养人正常肝L02细胞,由肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和D-氨基半乳糖(d-galactosamine,D-Gal)诱导肝细胞炎性损伤细胞模型。实验分为5组,即正常组、肝细胞炎性损伤模型组(模型组)、低剂量LYN-1604组、中剂量LYN-1604组和高剂量LYN-1604组。CCK8法测定不同浓度梯度LYN-1604对正常L02细胞活性的影响。Western blot法检测UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK1)相对含量,酶联免疫吸附测定法检测细胞培养物上清的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)含量,免联免疫吸附法及免疫荧光法检测细胞内苹果酸脱氢酶1(malate dehydrogenase 1,MDH1)含量。结果 在LYN-1604浓度≤10μmol/L时,药物对L02细胞活性无显著影响。LYN-1604在肝细胞炎性损伤细胞模型中能通过激活ULK1,降低细胞培养物上清中的LDH含量,提高细胞内MDH1的水平,且作用在一定范围内随药物剂量的增大而增强。结论 LYN-1604在肝细胞炎性损伤细胞模型中能通过激活ULK1,降低细胞培养物上清中的LDH含量,提高细胞内MDH1的水平。其保护肝细胞的机制可能是通过激活ULK1促进线粒体自噬从而改善细胞能量代谢来实现的。     

急性肝衰竭小鼠血清与组织中PTX3、HBP、PCT及 IL-6、IL-1β、TNF-α的变化及诊断价值

目的 探讨急性肝衰竭(acute liver failure, ALF)小鼠血清与组织中正五聚蛋白3(pentraxin 3, PTX3)、肝素结合蛋白(heparin-binding protein, HBP)、降钙素原(procalcitonin, PCT)及白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平的变化及诊断价值。方法 将32只雄性小鼠随机分为正常组和模型组,每组16只。用D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭模型。12h后处死小鼠,检测两组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平,取肝组织进行HE染色观察肝脏病理形态学改变。采用ELISA法检测小鼠血清及肝脏、脾脏、小肠组织中的PTX3、HBP、PCT及IL-6、IL-1β、TNF-α的水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标的诊断价值。结果 ALF模型组小鼠较正常组小鼠肝组织结构破坏程度明显增加,炎性细胞浸润明显增多;血清 AST、ALT、TBIL 水平显著升高。模型组小鼠血清及肝脏、小肠组织中PTX3与正常小鼠比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),但脾脏组织中PTX3水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组小鼠比较,模型组小鼠血清及肝脏、脾脏、小肠组织中HBP、PCT及IL-6、IL-1β、TNF-α均有升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析PCT的诊断效能最高,其曲线下面积(area under the curve, AUC)为0.941,cut-off值为35.2pg/ml,敏感度为93.8%,特异性为87.5%;PTX3其次,AUC为0.859,cut-off值为475.4pg/ml,敏感度为81.3%,特异性为87.5%;TNF-α的诊断效能最低,其AUC为0.695,cut-off值为54.5pg/ml,敏感度为68.8%,特异性为62.5%。结论 PTX3、HBP、PCT可用于早期急性肝衰竭的辅助诊断,且较IL-6、IL-1β、TNF-α诊断效能高。     

西比灵治疗椎基底动脉供血不足的TCD和rCBF研究

目的：研究椎基底动脉供血不足（ＶＢＩ）患者服用西比灵治疗后脑血流动力学和脑血流量变化。方法：２２例ＶＢＩ患者西比灵治疗前及治疗４周后分别行经颅多普勒（ＴＣＤ）和１３３氙吸入法局部脑血流量（ｒＣＢＦ）检测。结果：西比灵治疗后椎基底动脉系统血流速增快,但与治疗前相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）;治疗后全脑血流量增高,其中脑干、小脑区脑血流量明显高于治疗前（Ｐ＜０．０５）。结论;西比灵能改善ＶＢＩ患者脑循环,治疗ＶＢＩ安全有效。     

SIRT2抑制剂AGK2对硫代乙酰胺诱导的L02细胞线粒体保护作用

目的探讨沉默信息调节因子2(SIRT2)的选择性抑制剂AGK2对硫代乙酰胺(TAA)诱导的L02肝细胞的线粒体保护作用及相关机制。方法体外培养人源性肝细胞系L02细胞, 以不同浓度SIRT2抑制剂AGK2作为干预药物, CCK8检测不同浓度的AGK2对L02细胞活性的影响, 选取适宜的浓度为AGK2干预组。正常组不予以任何药物干预;造模组给予90 mmol/L TAA进行造模;低、中、高剂量AGK2组在造模2 h前分别加入1、2、4 μmol/L AGK2。CCK8检测各组细胞活性。倒置光镜下观察细胞形态变化。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内异柠檬酸脱氢酶(IDH1)、苹果酸脱氢酶(MDH1)、SIRT2和裂变蛋白1同系物(FIS1)的蛋白相对表达量。共聚焦激光扫描显微镜下观察各组细胞SIRT2的表达情况。荧光显微镜下观察各组细胞线粒体膜电位。结果当AGK2的浓度为1、2、4 μmol/L时, 细胞的存活率分别为98.05%、95.76%、91.65%, 与正常组相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。当AGK2浓度为8、16、32、64、128 μmol/...     

肝细胞癌中表观遗传改变对免疫治疗的影响

摘 要：肝细胞癌是最常见的恶性肿瘤之一,早期诊断困难,致死率高,相对于其他恶性肿瘤而言欠缺有效的治疗方法。近年来,表观遗传机制被广泛研究,与基因突变不同,表观遗传改变是动态的、可靶向修正的,且表观遗传失调对肿瘤免疫也产生影响。靶向修正表观遗传能够改善肿瘤免疫,增强免疫治疗效果,为探索新型联合治疗带来希望。全文主要讨论肝细胞癌发生发展过程中表观遗传的主要变化以及表观遗传对肿瘤免疫的影响,探索联合靶向表观遗传和免疫治疗新疗法。     

肝衰竭营养代谢特点及营养支持的研究进展

肝脏是机体进行物质代谢的主要场所，在多种因素引起严重肝损伤时，其合成、代谢以及生物转化功能会出现明显障碍。总结了肝衰竭时糖、氨基酸、脂质等营养物质代谢的特点，以及营养不良的评估和临床干预的措施。对于肝功能衰竭患者应尽早识别并及时纠正营养不良，以改善能量代谢及炎症状态，提高患者生存率。     

HDAC2抑制剂CAY10683通过自噬对急性肝衰竭小鼠的保护作用

目的:探究HDAC2抑制剂CAY10683在急性肝衰竭小鼠模型中的保护机制。方法:将C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、CAY10683组、自噬抑制剂MRT68921组和CAY10683/MRT68921联合组。D-氨基半乳糖和脂多糖诱导建立急性肝衰竭小鼠模型,获取小鼠血清及肝脏标本。检测血清中丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶含量;一部分肝组织用于HE染色和电镜下观察,另一部分肝组织用于生化检测,蛋白质印迹法检测自噬蛋白UNC-51样激酶1和苹果酸脱氢酶1(MDH1)的相对含量,生化试剂盒检测组织中葡萄糖、丙酮酸、乳酸和乳酸脱氢酶含量。结果:CAY10683可增加急性肝衰竭小鼠模型中肝脏内的自噬水平,对小鼠肝脏具有一定的保护作用,CAY10683可降低急性肝衰竭小鼠模型中肝组织内的葡萄糖、丙酮酸、乳酸和LDH含量,增加肝组织内MDH1含量;MRT68921则相反;CAY10683一定程度上可拮抗MRT68921的作用。结论:HDAC2抑制剂CAY10683在小鼠肝衰竭进程中可能通过提高自噬水平改善肝脏内代谢,对肝脏起到一定的保护作用。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤常见致病信号通路及其靶向药物的研究进展

弥漫性大B细胞淋巴瘤是亚洲人最常见的淋巴肿瘤亚型,经过R-CHOP方案治疗后仍有相当一部分患者表现为难治或复发。弥漫性大B细胞淋巴瘤的常见致病信号通路有B细胞受体、Toll样受体4/髓样分子因子88/核因子-κB、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路,靶向药物包括Bruton酪氨酸激酶抑制剂、来那度胺、硼替佐米、凋亡蛋白抑制剂抑制剂、磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂、蛋白激酶B抑制剂、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂。阐述了弥漫性大B细胞淋巴瘤中常见致病信号通路及其遗传学改变,并总结了相关通路常见的靶向药物的研究进展。