张应力对小鼠蝶枕软骨联合细胞增殖及低氧诱导因子- 1α表达的影响

目的:了解循环张应力对小鼠颅底蝶枕软骨联合细胞(SOSCs)增殖及低氧诱导因子-1α表达的影响。方法:采集1 d龄小鼠的SOSCs进行体外培养,对第三代细胞加载牵张形变率分别为3%、6%、9%,频率为1 Hz,持续时间为1 h的循环张应力;用流式细胞术测算细胞增殖指数,用蛋白免疫印迹技术分析Hif-1α的表达水平。用按相同条件培养但不加力的细胞作为对照。结果:各实验组细胞的增殖指数和Hif-1α相对表达量都高于对照组(P<0.05);其中,6%牵张形变率组的细胞增殖指数和Hif-1α相对表达量较对照组增加最多。结论:适宜强度的循环张应力对体外培养小鼠SOSCs的增殖和Hif-1α表达具有促进作用。     

miR-335-5p对人关节软骨细胞的影响

目的探究miR-335-5p对人关节软骨细胞蛋白多糖(ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)、Ⅹ型胶原蛋白(CollagenⅩ)、基质金属蛋白酶(MMP)13的调节作用。方法通过取人创伤后截肢的膝关节软骨,分离并提取软骨细胞。miR-335-5p模拟物(mimics)、抑制剂(inhibitor)、mimicsNC、inhibitorNC分别转染至软骨细胞,利用qRT-PCR和Western印迹分别检测各组ACAN、CollagenⅡ、CollagenⅩ、MMP13的表达情况。结果与mimicsNC组相比,mimics组显著下调ACAN、CollagenⅡmRNA和蛋白表达水平,显著上调MMP13、Collagen X mRNA和蛋白表达水平(P0.05);与inhibitorNC组比较,inhibitor组显著上调ACAN、CollagenⅡmRNA和蛋白表达水平,显著下调MMP13、Collagen X mRNA和蛋白表达水平(P0.05)。结论 miR-335-5p能够抑制ACAN、CollagenⅡ并促进MMP13、Collagen X mRNA转录及蛋白合成,对OA的发病起到潜在的推进作用。     

龙胆碱对膝骨关节炎的影响

目的观察龙胆碱对软骨细胞的活性及对膝骨关节炎大鼠的影响。方法培养软骨细胞,采用脂多糖诱导软骨细胞建立体外炎症模型,将软骨细胞分为正常组、模型组(LPS 8μg/m L)、龙胆碱组(LPS 8μg/m L+龙胆碱100μmol/L),MTT法检测各组软骨细胞存活率。SD大鼠膝关节腔内注射木瓜蛋白酶制备膝骨关节炎动物模型,随机分为正常组、模型组、双氯芬酸钠组(5 mg/kg)、龙胆碱(20 mg/kg)组、龙胆碱(40 mg/kg)组,1次/d,连续给药21 d。排水法测定各组大鼠的足跖肿胀体积,ELISA法测定大鼠血清及关节液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平,HE染色观察膝关节滑膜组织病理损伤。结果与正常组比较,模型组软骨细胞存活率降低(P<0. 01),龙胆碱干预后增加(P<0. 01)。龙胆碱干预后,膝骨关节炎大鼠足跖肿胀减轻,血清及关节液中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低(P<0. 01),膝关节滑膜组织病理损伤减轻。结论龙胆碱可降低膝骨关节炎大鼠血清及关节液中炎症因子水平和滑膜炎症,减轻足跖肿胀的症状,对膝骨关节炎大鼠有显著的治疗作用。     

火针膝周密刺对膝关节骨性关节炎鼠关节形态及软骨LOXL2的影响

目的:探讨火针膝周密刺对膝关节骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)大鼠行为学、关节形态及软骨中赖氨酰氧化酶相关蛋白2(LOXL2)影响性。方法:选择30只健康雄性大鼠,10只作为对照不作任何处理。20只大鼠建立KOA模型,成模后随机分成2组,分别予普通针刺和火针膝周密刺,1次/3 d,连续6次。观察各组大鼠Leauesne MG评分、关节软骨细胞情况,外周血及关节软骨转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、LOXL2水平变化。结果:治疗后火针组Leauesne MG评分中的局部疼痛刺激反应、步态、关节活动范围、关节肿胀度较对照组、模型组差异有统计学意义(P<0.05)。血清及关节软骨MMP-3、TGF-β1、TNF-α含量水平显著低于模型组(P<0.05),LOXL2显著高于模型组(P<0.05)。火针组电镜下软骨细胞形状规则、细胞核完整且饱满,微绒毛少量存在,内质网丰富,有散在的染色质。结论:火针膝周密刺能减轻K0A关节软骨损伤,降低炎性反应,改善软骨LOXL2水平,这可能是火针治疗KOA一个作用机制。     

姜黄素抑制硝普钠诱导的大鼠软骨细胞凋亡机制研究

目的 探讨姜黄素抑制硝普钠(SNP)诱导的大鼠软骨细胞凋亡的机制研究。 方法 每组取4只SD大鼠关节软骨，细胞进行原代培养，将软骨细胞分成6组，分别为空白对照组(A组)，SNP损伤组(B组)，SNP+5 μmol/L姜黄素组(C组)，SNP+10 μmol/L姜黄素组(D组)，SNP+20 μmol/L姜黄素组(E组),SNP+30 μmol/L姜黄素组(F组)。用CCK8法检测不同浓度的姜黄素对软骨细胞增殖的影响，同时检测各组中软骨细胞的活性；用RtPCR检测软骨细胞MMP-13、caspase-3、Bax和Bcl-2基因的表达情况；用Hoechst 33342染色观察软骨细胞核凋亡情况；Western Blotting检测线粒体凋亡途径相关蛋白的表达情况。 结果 ①当姜黄素的浓度为20 μmol/L时，姜黄素对软骨细胞的促增殖作用最为明显；②CCK8法检测各组细胞的活性率从大至小依次为A组＞E组＞D组＞C组＞F组＞B组；③RtPCR检测软骨细胞caspase-3、Bax和Bcl-2表达量经姜黄素处理后均有显著变化；④Hoechst 33342染色结果表明姜黄素能改善SNP诱导的软骨细胞核染色质的损伤，减少软骨细胞中的线粒体膜电位；⑤Western boltting检测各组软骨细胞中caspase-3、Bax、蛋白的表达情况，表达量依次为B组＞E组＞A组；Bcl-2蛋白的表达情况，表达量依次为A组＞E组＞B组。 结论 姜黄素通过抑制线粒体凋亡途径，从而减少SNP诱导的大鼠软骨细胞的凋亡。      

多多关照你的关节软骨吧

膝关节是人体负担最重、使用最频繁的关节,活动中其软骨更易受损伤。软骨组织里的软骨细胞,从出生到30岁相对稳定。30岁过后,人的关节纤维变性,弹性减弱,关节软骨的延伸能力逐渐弱化,恢复原状的能力减弱。再加上关节液减少,关节软骨变得干燥。     

关节腔渗透压调控骨关节炎的研究进展

骨关节炎是一种慢性、进行性、不可逆性的关节退行性疾病,是一种中老年人的常见疾病,被认为是全球致残率较高的疾病之一。近年来,随着经济发展和人口老龄化,骨关节炎的患者数量在不断增加,这也让骨关节炎在临床上得到了极大的重视。而临床上治疗骨关节炎的一个关键性问题是关节软骨的丢失和难以自我修复。渗透压可以通过调节细胞体积和调控离子通道影响软骨细胞的生理代谢,从而影响关节软骨的损伤和修复。这一过程可能在骨关节炎发生发展中起到了重要作用。本文就离子通道、渗透压和骨关节炎三者间的相关性作一综述。