GC-MS分析王不留行、决明子、酸枣仁炒制前后脂肪油成分的变化

目的:分析和鉴定王不留行、决明子、酸枣仁3种药材炒制前后脂肪油类成分的变化,为探索种子类药材"逢子必炒"的炮制机制奠定基础。方法:以石油醚为溶剂,采取索氏提取器提取脂肪油,甲酯化后用气相色谱-质谱联用技术(GCMS)分离、鉴定其组成和相对质量分数。HP-5毛细管柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),载气99.999%高纯氮,流速1 mL·min~(-1),采用程序升温方式(初始温度50℃,以5℃·min~(-1)升至170℃,停留4 min,5℃·min~(-1)升至190℃,0.5℃·min~(-1)升至200℃,10℃·min~(-1)升至240℃,保持4 min),进样量1μL,电子轰击离子源(EI),离子源温度220℃,电子能量70 eV。结果:王不留行、决明子、酸枣仁3种药材生品脂肪油提取率分别为3.34%,6.16%,20.66%,炒制品脂肪油提取率分别为4.67%,7.40%,26.35%。王不留行生品鉴定出7个化合物,炒制品鉴定出10个化合物;决明子生品鉴定出8个化合物,炒制品鉴定出9个化合物;酸枣仁生品鉴定出10个化合物,炒制品鉴定出14个化合物。结论:炒制能提高脂肪油的提取效率,炒制后3种药材脂肪油的组成出现了一些共性变化。     

两基原中药决明子UPLC指纹图谱研究

目的建立两基原(决明、小决明)中药决明子的UPLC指纹图谱,为决明子药材质量控制和评价提供依据。方法采用Agilent ZORBAX EP C18(100 mm×3.0 mm,1.8μm)色谱柱;以乙腈-0.01%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.4 m L/min,检测波长285 nm,柱温30℃,进样量为1μL。结果首次建立了决明子UPLC指纹图谱共有模式,运用相似度评价软件标定了20个共有峰,结合保留时间和紫外光谱分析,指认了7个峰;20批决明子药材相似度均大于0.9;聚类分析结果为当欧式距离平方和为5时,20批决明子样品可分为4类;主成分分析降维得到3个主成分,根据主成分得分将样品进行划分归类,与聚类分析结果一致;通过拟合归纳第一主成分的载荷因子模型,筛选出红链霉素-6-O-β-龙胆二糖苷等具有评价决明子质量优劣的特征峰。结论决明与小决明共有化学成分存在共性差异,该方法可以用于决明子药材质量控制和评价。     

降压片质量标准提高研究

目的:建立降压片的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对降压片中决明子、山楂进行定性鉴别;HPLC法测定黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温为30℃;流动相为甲醇(A)-0.2%磷酸溶液(B),梯度洗脱;流速为1.0 m L·min-1;检测波长为278 nm。结果:TLC斑点清晰、分离度好,阴性无干扰;黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素分别在0.118 0~2.360 0μg(r=0.999 9)、0.046 6~0.932 0μg(r=0.999 8)、0.048 7~0.974 0μg(r=0.999 9)、0.039 7~0.794 0μg(r=0.999 9)与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.58%(RSD为1.14%,n=6)、98.48%(RSD为0.83%,n=6)、98.99%(RSD为0.77%,n=6)、99.28%(RSD为0.78%,n=6)。结论:本方法简便、准确,能有效控制降压片的质量。     

3种中药成方制剂中何首乌、虎杖、决明子薄层鉴别方法的建立

目的建立中药成方制剂中含有何首乌、虎杖、决明子等药材的特异性成分的鉴别方法。方法采用薄层色谱法,何首乌以二苯乙烯苷、虎杖以虎杖苷、决明子以橙黄决明素为成分鉴别指标,对乙肝扶正胶囊、舒胆片、脂降宁片进行了药材鉴别研究,并与原方法进行了比较。结果新建立的薄层图谱成分斑点清晰,阴性样品无干扰。结论改进后的方法操作简单,结果稳定,特异性强,重复性好,可用于此3种中药成方制剂的质量控制。     

滋肾清肝代平方中7种成分血药浓度的测定及其在大鼠体内的药代动力学分析

目的:建立UPLC-MS-MS同时测定大鼠血浆中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,1-脱氧野尻霉素和决明子苷、红镰霉素龙胆二糖苷、橙黄决明素、甲基钝叶决明素、白藜芦醇的分析方法,研究大鼠服用滋肾清肝代平方后的药代动力学特征。方法:采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱,流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,采用电喷雾电离源,扫描方式为多反应离子监测。结果:7种成分在大鼠血浆中线性关系良好,提取回收率94.83%~106.58%,日内、日间精密度和准确度良好。7种成分在模型组大鼠中的药时曲线下面积、末端半衰期、达峰时间、清除率、表观分布容积、药峰浓度分别为(326.65±26.66)μg·L-1·h-1,(3.64±1.69)h,0.33 h,(60.56±5.32)L·h-1·kg-1,(325.13±167.18)L·kg-1,(169.25±18.02)μg·L-1。结论:该方法特异、快速、准确、灵敏,可用于滋肾清肝代平方在大鼠体内的药动学研究。     

炮制对决明子中萘并吡喃酮苷及蒽醌苷元类成分含量的影响

目的:比较炮制对决明子中主要活性成分萘并吡喃酮苷和蒽醌苷元类成分的影响。方法:采用高效液相色谱法检测决明子中3个萘并吡喃酮苷和3个蒽醌苷元的含量,并比较其炮制前后的含量变化。结果:炮制后决明子中3种萘并吡喃酮苷类成分含量均有明显下降,其中红镰霉素龙胆二糖苷下降约21%,决明子苷下降约60%,决明子苷C下降约87%;3种蒽醌苷元变化情况为,橙黄决明素和甲基钝叶决明素的含量变化没有显著性差异,钝叶素的含量升高48%。结论:炮制对决明子主要活性成分萘并吡喃酮苷和蒽醌苷元类的含量均会产生显著影响,其中炮制后萘并吡喃酮苷类成分整体下降,蒽醌苷元类成分有部分含量升高。     

HPLC测定决明子中6种游离蒽醌含量

目的建立决明子中6种游离蒽醌类成分的HPLC含量测定方法,为决明子的质量评价提供参考方法。方法采用HPLC法同时测定决明子中6种游离蒽醌类成分的含量,分别为橙黄决明素,大黄酸,决明蒽醌,大黄素,大黄酚,大黄素甲醚。色谱柱为DiamonsilTMC18色谱柱(5μm,250 mm×4.6mm);乙腈(B)-0.1%磷酸(A)梯度洗脱;流速1.0 m L/min;检测波长285 nm;柱温为室温。结果 6种游离蒽醌类成分在相应的线性范围内均呈良好的线性关系。平均回收率均在98.0%~99.6%范围内,RSD<2.0%。结论该方法准确、灵敏、高效,可用于决明子中游离蒽醌类成分的含量测定。     

决明子水提液微滤过程中膜通量和膜污染阻力的影响因素研究

目的探究陶瓷膜微滤决明子Cassia Semen水提液影响膜通量(J)和膜污染阻力(R_f)的因素。方法以决明子水提液为研究对象,在单因素试验的基础上,采用正交设计,以R_f和J的综合加权评分为评价指标,优化无机陶瓷膜微滤过程的最佳工艺参数;并对膜微滤过程中4个主要工艺参数与R_f和J的相关性进行分析。结果最佳膜微滤工艺条件:无机陶瓷膜孔径为0.2μm、料液质量浓度50.0 g/L、跨膜压差0.1 MPa、膜面流速3.32 m/s;微滤膜孔径对R_f和J的影响具有显著性。结论工艺条件对决明子水提液膜微滤过程中的J和R_f具有重要的影响;4种工艺参数对膜微滤过程R_f与J的影响主次顺序为膜孔径跨膜压差料液质量浓度膜面流速。     

决明子“轻身延年”作用对家蚕整体能量特征的影响

目的:在前期研究结果决明子有延长家蚕寿命的基础上,进一步探讨决明子对家蚕整体能量特征的影响及饥饿应激状态的耐受能力变化,以深究决明子"轻身延年"的作用及其机理。方法:取龄期相同生长整齐的三眠蚕随机分为5组,即空白对照组,决明子水煎液0.65g/ml剂量组、0.33g/ml剂量组、0.16g/ml剂量组,维生素E 0.0015g/ml剂量组,每组400头。使用涂抹法将不同浓度药液涂抹于新鲜桑叶上,4龄期内喂食5次,5龄期内喂食6次,在四龄期末休眠后进行耐饥饿处理,收集四龄、五龄末家蚕蚕体及蚕砂测定能值,五龄期第三天,每组各取15头家蚕取血淋巴,测Na+-K+-ATP酶活性。结果:决明子各给药组家蚕耐饥饿时长显著降低,且体水含量越多,耐饥饿时长越久,二者成正相关关系。在四龄期,决明子给药组食桑量、蚕体能值显著降低,蚕砂重量、蚕砂能值及蚕砂总能量支出有明显增加,且随给药剂量的增加而减少;在五龄期,决明子给药组的食桑量、蚕砂重量与蚕砂总能量支出均有明显增加(P0.05),但随给药剂量增加而增加,与蚕体能值变化趋势相反,但家蚕蚕砂能值变化不大。同时,各给药组血淋巴与肠管组织中Na+-K+-ATP酶活性有显著降低。结论:决明子影响了家蚕整体能量特征,泻下作用使蚕砂能值及蚕砂总能量支出增加,使食物摄入减少,可能与其"轻身延年"的作用相关,但导致了家蚕对饥饿应激的耐受能力降低,本实验为决明子的合理开发和临床应用提供了新的视角和观点。     

决明子不同部位提取物的调血脂作用

目的:决明子不同部位提取物对高血脂动物总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平的调节作用。方法:实验于2003-05/2006-04在兰州大学生命科学学院和甘肃政法学院公安分院实验中心完成。①选用普通级20周龄大耳白兔50只,雌雄不拘,体质量1.8～2.0kg。按随机数字表法将动物分为5组,每组10只:水提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组、对照组和模型组。对照组动物喂基础饲料50g/(kg·d),其余各组均喂等量由质量分数0.8基础饲料,质量分数0.15蛋黄粉,质量分数0.005胆固醇,质量分数0.05猪油组成的高脂饲料进行建模。建模成功后,水提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组灌胃相应决明子提取物5.4g/(kg·d),由兰州大学生命科学学院完成决明子提取,将决明子(购自甘肃省医药材公司),加蒸馏水回流煮沸,过滤,滤液浓缩后,分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取。分成乙酸乙酯层、正丁醇层和水层3个部分,即为相应的提取物;对照组和模型组灌胃等量蒸馏水。连续给药28d。②于建模前、建模后、给药后14,28d用日立7020全自动生化分析仪测定总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平。③采用DUNNETT单因素方差分析对数据进行统计处理。结果:日本大耳白兔50只均进入结果分析。①建模后,动物血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇比建模前显著升高(P<0.01),建模成功。②给药14d后,水提取物组动物血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇含量比建模后分别降低了42.5%,58.3%,42.5%(P<0.01);乙酸乙脂提取物组分别降低了45.8%,66.7%,45.0%(P<0.01);正丁醇提取物组分别降低了56.7%,75.0%,52.9%(P<0.01)。给药组之间,正丁醇提取物组血总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇含量比水提取物组分别降低了24.6%,40.0%,28.3%(P<0.01);比乙酸乙酯提取物组分别降低了20.0%,25.0%,25.0%(P<0.01)。③给药28d后,水提取物组血总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平比建模后分别降低了68.3%,69.2%,75.0%(P<0.01);乙酸乙脂提取物组分别降低了77.5%,85.0%,78.8%(P<0.01);正丁醇提取物组分别降低了85.8%,90.8%,80.7%(P<0.01)。给药组之间,正丁醇提取物组血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平比水提取物组分别降低了55.3%,70.1%,50.0%;比乙酸乙酯提取物组分别降低了37.0%,39.0%,41.2%(P<0.01)。结论:决明子提取物具有降低高脂血症模型兔血脂水平的作用,且正丁醇提取物的降血脂作用优于水提取物和乙酸乙脂提取物。