叶生小皮伞联合温针对偏头痛大鼠神经递质及ET-1蛋白水平的影响及其作用机制

目的 探讨叶生小皮伞联合温针对偏头痛大鼠神经递质及内皮素(Endothelin,ET)-1蛋白水平的影响及其作用机制。方法 用随机法将40只大鼠分为5组,每组8只,空白组[Blank(BL)组,假手术组]、模型组[Model(MO)组,建立偏头痛大鼠模型]、给药组[Drug(DR)组,给予叶生小皮伞治疗]、温针组[Warm needle(WN)组,给予温针治疗]、联合组[Joint(JO)组,给予叶生小皮伞联合温针治疗]; 采用苏木精-伊红(Hematoxylin eosin,HE)染色观察脑组织神经细胞形态学变化; 采用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血浆ET-1、降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP)水平,硝酸还原酶法测定一氧化氮(Nitric oxide,NO)水平; 用ELISA检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、中性粒细胞趋化因子-1(Cytokine-induced neutrophil chemoattractant-1,CINC-1)水平及脑组织中神经递质多巴胺(Dopamine,DA)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)水平; 免疫印迹(Western blot,WB)检测海马组织脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸激酶受体B(Tyrosine kinase receptor B,TrkB)蛋白水平。结果 BL组脑组织神经细胞染色质均匀分布在细胞核内,细胞未发生固缩、肿胀、坏死等病理现象; 与BL组比较,MO组神经元周围出现空泡,细胞萎缩; 与MO组比较,WN组、DR组、JO组神经细胞形态得到一定修复,且JO组神经细胞的形态修复较好,空泡减少。与BL组比较,MO组大鼠血浆NO,ET-1,CGRP水平均明显升高(P<0.05); 与MO组比较,WN组、DR组、JO组中NO,ET-1,CGRP水平均降低(P<0.05); 与WN组、DR组比较,JO组NO,ET-1,CGRP水平,且JO组降低的最明显(P<0.05)。与BL组比较,MO组TNF-α,IL-6,CINC-1水平均显著升高(P<0.05); 与MO组比较,WN组、DR组、JO组TNF-α,IL-6,CINC-1水平均显著降低; 与WN组、DR组比较,JO组各项水平均降低,且JO组降低最为显著(P<0.05)。与BL组比较,MO组5-HT,DA水平明显降低; 与MO组比较,WN组、DR组、JO组5-HT,DA水平均升高; 与WN组、DR组比较,JO组5-HT,DA水平明显升高。与BL组比较,MO组BDNF,TrkB表达水平均较高(P<0.05); 与MO组比较,WN组、DR组、JO组BDNF,TrkB表达水平均有不同程降低; 与DR组、WN组比较,JO组BDNF,TrkB表达水平显著降低(P<0.05)。结论 叶生小皮伞联合温针可以降低偏头痛大鼠ET-1蛋白水平,促进5-羟色胺等神经递质的表达,其机制可能与降低BDNF,TrkB表达水平有关。     

丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的观察丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法用体外细胞培养方法,培养乳鼠心肌细胞,复制心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。分别在缺氧和复氧阶段将细胞培养液换成含药培养液以进行药物干预,研究丹皮酚和芍药苷的作用时,各设100、75、50和25mg/L4个剂量组,研究二者配伍作用时设芍药苷40mg/L和20mg/L组、丹皮酚40mg/L和20mg/L组、以及芍药苷20mg/L+丹皮酚20mg/L5个剂量组,模型组只造模不进行药物干预,而正常对照组则不造模。分别测定缺氧2.5～5h后及复氧2h后细胞培养上清液中的肌酸肌酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)漏出量,计算缺氧/复氧过程中各指标总漏出量及漏出抑制率。结果与正常对照组比较,模型组缺氧2.5h后MDA漏出量增加,缺氧3、5h后、复氧2h后CK、LDH和MDA漏出量、漏出总量均增加,各指标漏出抑制率均降低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,丹皮酚高剂量组及芍药苷高、中剂量组缺氧后LDH、MDA漏出量及复氧2h后各指标漏出量、漏出总量均减少(P<0.01,P<0.05),各指标漏出抑制率均升高(P<0.01,P<0.05);而丹皮酚低、极低剂量组仅复氧2h后CK漏出量及漏出总量减少(P<0.01,P<0.05),CK漏出抑制率升高(P<0.01)。芍药苷极低剂量组仅复氧2h后LDH漏出量及漏出总量均减少(P<0.01),LDH漏出抑制率升高(P<0.01)。配伍组各指标与丹皮酚、芍药苷各组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹皮酚、芍药苷及二者配伍对体外培养大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤均具有保护作用,二者配伍作用强度与同剂量单味药物作用强度相当,未见显著配伍增效作用。