参丹胶囊辅助治疗非小细胞肺癌的Ⅱ期临床研究

目的：对参丹胶囊对非小细胞肺癌化疗减毒增效的有效性和安全性作出客观评价，同时以此为例探讨了近些年中医肿瘤辅助用药研究的进步与不足。方法:本试验采用随机、双盲、安慰剂对照的多中心研究方法。202例非小细胞肺癌化疗患者入组，均为明确病理诊断，且具备中医脾虚痰瘀证侯。随机分为试验组和安慰剂对照组。对两组患者的瘤体反应率、中医证候、卡氏评分、体重、免疫功能、血象及肝肾功能等安全性指标进行观察。结果：试验组与对照组相比，明显提高瘤体缓解率，改善中医脾虚痰瘀证候，提高生活质量中的卡氏评分，明显提高患者机体IL-2水平的作用。未见与两组有关的不良事件发生。结论：参丹胶囊辅助治疗非小细胞肺癌（脾虚痰瘀证）安全、有效。在评价中药化疗辅助用药的疗效的同时，应建立具有中医特色的疗效评价体系。     

氧化苦参碱干预MCF-7细胞系肿瘤干细胞样细胞生物学行为的实验研究

目的研究中药单体氧化苦参碱(oxymatrine,OM)对人乳腺癌细胞系MCF-7肿瘤干细胞样细胞生物学行为的干预作用及分子水平作用机制。方法以MCF-7为研究对象,采用侧群分选法(side population,SP)分离富集MCF-7细胞系肿瘤干细胞样细胞(SP细胞);MTT技术检测SP细胞和非肿瘤干细胞样细胞(non-side population cells,non-SP细胞)的增殖特性;以及不同浓度顺铂(cisplatin,DDP)和OM对于不同细胞亚群的增殖干预作用;利用流式细胞技术、细胞免疫荧光技术检测细胞中β-catenin基因、蛋白表达水平。结果 (1)不同浓度OM对MCF-7细胞的不同亚群细胞增殖抑制作用不同,其中对non-SP细胞的增殖抑制作用最弱,未分选的细胞次之,对SP抑制作用最强;不同浓度DDP对non-SP的增殖抑制作用最强,未分选的细胞次之,对SP细胞抑制作用最弱;(2)浓度为0.25、0.50、1.00mg/mL的OM作用SP细胞后,其在细胞总数中所占比例分别为3.1%、1.7%、0.2%;经过OM处理过的SP细胞磷酸化β-catenin表达率为(42.62±2.62)%,与未经OM处理过SP细胞的表达率[(22.81±1.66)%]比较,差异有统计学意义(P0.01);(3)与未经OM处理过的SP细胞比较,经过OM处理过的SP细胞中β-catenin的表达明显减少,而且特异性地分布在细胞膜下,核转位现象明显减少。结论 OM可能通过抑制Wnt/β-catenin信号转导通路的活性来干预人乳腺癌MCF-7细胞系中肿瘤干细胞样细胞的生物学行为。     

运用气机升降理论治疗肿瘤探析

气机升降理论是指导临床诊治疾病的基本理论之一,受到历代医家推崇并将其贯穿在诊疗和学术思想之中。肿瘤作为一种机体整体失衡性疾病,基本内在机制可能是气机升降失衡所致。临床上应用气机升降理论治疗肿瘤疾病往往受到较好的临床疗效。因而,笔者从气机升降理论的历史地位、学术价值、病案示例以及临床常用体现升降理论治疗肿瘤的经方进行阐述,以便为肿瘤临床工作者的用药提供借鉴。     

肺瘤平膏含药血清对巨噬细胞共培养条件下A549细胞EMT相关mRNA及蛋白表达的影响

目的观察肺瘤平膏含药血清对A549细胞与巨噬细胞共培养条件下上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)相关mRNA及蛋白表达的影响。方法制备肺瘤平膏含药血清,建立A549细胞与巨噬细胞的共培养体系,将细胞分为A549加空白血清组(A549+NRS组)、共培养加空白血清组(共培养+NRS组)及共培养加肺瘤平膏含药血清组(共培养+FLP组)。采用荧光定量PCR、免疫荧光法比较各组A549细胞EMT相关基因(SNAIL1、SNAIL2、ZEB1、CDH1、CDH2、VIM、TJP1、CLDN1、CTNNB1、FLRT1)及E-cadherin、N-cadherin、ZO-1、Vimentin蛋白表达水平的影响。结果共培养条件下,A549细胞变为间充质细胞样。加入肺瘤平膏含药血清后,部分A549细胞形态恢复为上皮细胞样。与A549+NRS组比较,共培养+NRS组A549细胞SNAIL1、ZEB1、CTNNB1、FLRT1、CDH2、VIM mRNA表达上调,TJP1 mRNA表达下调(均P0.05);与共培养+NRS组比较,共培养+FLP组SNAIL2、TJP1、CLDN1、CDH1、VIM mRNA表达上调,CTNNB1、FLRT1及CDH2 mRNA表达下调(均P0.05)。免疫荧光结果显示,E-cadherin表达于细胞膜和胞浆内,以细胞膜为主;N-cadherin表达于细胞膜和胞浆内,以细胞浆为主;Vimentin表达于胞浆内;ZO-1表达于细胞连接处为主,部分细胞膜染色亦呈阳性。与A549+NRS组比较,共培养+NRS组A549细胞E-cadherin蛋白表达下调,N-cadherin及Vimentin蛋白表达上调(P0.05);肺瘤平膏含药血清可上调E-cadherin表达,下调N-cadherin及Vimentin蛋白表达(均P0.05)。结论肺瘤平膏可抑制共培养条件下A549细胞EMT的形成。     

苏木含药血清对人肺癌PG细胞增殖周期影响的对比研究

目的探讨苏木含药血清对人肺癌PG细胞株的周期阻滞作用及其分子机制。方法将肺癌PG细胞分为空白组、苏木组、苏木加顺铂组、顺铂组4组,分别用20%空白血清的1640培养液、20%苏木含药血清的1640培养液、20%苏木含药血清的1640培养液加1 μg/mL顺铂、20%空白血清的1640培养液加1 μg/mL顺铂培养PG细胞,采用光镜和激光共聚焦显微镜观察各组PG细胞学形态,流式细胞仪检测细胞周期,PCR法检测Rb1、P16 mRNA的表达。结果光镜和激光共聚焦显微镜下苏木组PG细胞的凋亡程度明显,但低于顺铂组和苏木加顺铂组。与空白组比较,苏木组PG细胞的G0/G1和S期比例增加（P〈0.05）,G2/M期降低（P〈0.01）;顺铂组和苏木加顺铂组的S和G2/M期比例增加（P〈0.05, P〈0.01）,G0/G1期降低（P〈0.01）。与苏木组比较,顺铂组和苏木加顺铂组的S期和G2/M期比例增加（P〈0.05,P〈0.01）,G0/G1期降低（P〈0.01）。苏木加顺铂组PG细胞的各期与顺铂组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。与空白组比较,苏木组P16、Rb1 mRNA表达增加,顺铂组和苏木加顺铂组亦增加且优于苏木组（P〈0.05）;与顺铂组比较,苏木加顺铂组P16、Rb1 mRNA表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论苏木含药血清通过上调P16、Rb1 mRNA转录水平引起PG细胞 G0/G1、S期阻滞,从而诱导细胞凋亡,这与顺铂通过cyclinB1使细胞停滞在G2/M、S期不同。     

人参皂苷Rg3和PEG-PLGA-Rg3纳米微粒对Lewis肺癌小鼠的作用及其机制

目的：观察并比较20(R)-人参皂苷Rg3［20(R)-ginsenoside Rg3,Rg3］和聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）-聚乳酸羟基乙酸（poly lactic-co-glycolic acid,PLGA）-Rg3纳米微粒（Rg3-N）对Lewis肺癌荷瘤小鼠的影响,探讨它们体内抗肿瘤作用的机制。方法： 建立小鼠Lewis肺癌动物模型,60只小鼠随机分为人参皂苷Rg3纳米微粒组（Rg3-N）、PEG-PLGA纳米载体组（PEG）、20(R)-人参皂苷Rg3单体组（Rg3）、生理盐水组（NS）和空白对照组（C）,每组12只,灌胃给药共14 d。每隔2 d测量小鼠的体重并绘制小鼠体重变化曲线,观察各组小鼠毛色、活动和精神状态等一般情况。实验结束当天处死小鼠,计算抑瘤率和肿瘤质量与体重比值;免疫组织化学法CD31抗体标记来计算微血管密度（microvessel density,MVD）,以评价Rg3和Rg3纳米缓释微粒的体内抗血管生成作用,并通过实时定量PCR、免疫组织化学和Western blot法检测基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、Ki-67等血管新生和细胞增殖相关因子水平,以探讨其体内抗肿瘤作用的分子机制。结果： NS组和PEG组小鼠的体重呈现先升后降的趋势,而其余3组小鼠的体重则呈现逐渐上升并保持稳定的趋势。相对于NS组,Rg3组和Rg3-N组小鼠的毛色更亮,精神状态更好,更加活跃,一般状况较好。PEG组、Rg3组和Rg3-N组的肿瘤质量与NS组相比差异无统计学意义,但Rg3组和Rg3-N组的肿瘤质量与体重比值和微血管密度明显下降,与NS组之间差异有统计学意义（P＜0.01）,Rg3组和Rg3 N组之间差异无统计学意义。与NS组相比,Rg3组和Rg3-N组的VEGF mRNA、MMP-9、HIF-1α、VEGF的蛋白表达显著下降,且Rg3-N组上述各指标相对于Rg3组有进一步降低的趋势,PEG组、Rg3组和Rg3-N组Ki-67的表达均未见明显差异。结论： 人参皂苷Rg3和PEG-PLGA-Rg3纳米微粒能抑制Lewis肺癌小鼠VEGF、MMP-9和HIF-1α的表达,从而间接地发挥它们的抗肿瘤作用,并改善小鼠的一般状况;此外,PEG-PLGA纳米微粒包埋可以增强Rg3的体内抗肿瘤作用。     

晚期原发性肺癌血瘀证评分与临床指标相关性研究

目的观察晚期原发性肺癌血瘀证量化评分与临床指标相关性。方法选择晚期原发性肺癌患者63例,分为中药组(31例)和化疗组(32例),中药组以中药注射液联合桃红四物汤加减治疗;化疗组以常规方案化疗,21天为1个周期,连续治疗2周期;分别测定治疗前后46项常用临床指标及用拟定量化标准得出的血瘀证量化值,观察血瘀证量化值的改变与临床指标改变的相关性。结果血瘀证量化值的改变与与营养不良相关因子(HGB、ALB、GLB、TP、HCT、MCV)、凝血指标(AT-Ⅲ、D-Dimer、FIB、APTT、FDP)、血脂指标(TC、LDLC、HDL-C)、炎症因子(LYMPH#、PDW、CRP)、部分肿瘤标志物(SA)、Cr及部分免疫相关因子(CD3~+、CD4~+/CD25~+、CD8~+/CD28~+、NK)的改变呈正相关(P0.01,P0.05),而与其他免疫相关因子(CD3~+/CD4~+、CD3-/CD19~+)、SOD及肿瘤标志物(CEA、CA125)的改变呈负相关(P0.01,P0.05)。结论晚期原发性肺癌血瘀证量化评分与多个常用临床指标密切相关。     

外周血常见炎性反应指标与非小细胞肺癌预后相关性的研究进展

肺癌是一种发病率高、预后差的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌占多数。瘤体除发生解剖学变化之外，可在体内出现其他的进展指征，通过监测这些指征可及早了解病情。炎性反应与非小细胞肺癌的发生发展密切相关，以常见的外周血细胞及C反应蛋白为基础的炎性反应指标具有较好的预后价值。本文通过针对临床外周血常见炎性反应指标在非小细胞肺癌患者中的预后价值进行文献梳理，科学、全面、客观地了解其研究现状，为临床决策提供一定的证据支持。