代谢活化系统在人细胞转化模型中的应用

【目的】 探讨不同的代谢活化系统在人细胞转化模型中潜在的应用价值｡ 【方法】 在永生化人肝细胞L02中导入第12密码子突变的H-RAS癌基因(L02-R细胞),使其处于恶性转化前的易感状态｡选择具有代表性的间接致癌物黄曲霉毒素B1 (aflatoxin B1, AFB1) 作用于永生化和转化前期细胞株,采用三种代谢系统:高表达代谢酶P450 CYP1A2,低剂量底物诱导和加入经典的大鼠S9代谢辅助系统,通过软琼脂克隆形成试验和裸鼠皮下成瘤试验来比较在不同的代谢活化系统下,间接致癌物诱导细胞转化的效能｡ 【结果】 蛋白印迹验证H-Ras稳定高表达的转基因细胞株构建成功｡通过Ames试验,蛋白印记和CYP1A2酶活性等方法比较三种代谢系统酶活性｡在未加代谢系统的条件下,经AFB1染毒后第17周L02-R细胞发生转化,而对照组细胞L02-V在染毒20周未能发生转化｡而加入S9代谢系统时,AFB1诱导L02-R细胞在第8周发生转化,比未加代谢系统缩短了9周;经低剂量0.1 μmol/L AFB1诱导和高表达CYP1A2均使L02-R的转化间期缩短6周,于第11周发生转化｡ 【结论】 三种代谢系统都能够促进间接致癌物AFB1的代谢活化,缩短细胞转化的时间,提高细胞转化效率｡与传统的S9代谢活化系统相比,低剂量诱导作为新的代谢活化的方法在细胞转化试验中有着良好的应用前景｡     

代谢活化系统在人细胞转化模型中的应用

【目的】探讨不同的代谢活化系统在人细胞转化模型中潜在的应用价值。【方法】在永生化人肝细胞L02中导入第12密码子突变的H-RAS癌基因（L02-R细胞）,使其处于恶性转化前的易感状态。选择具有代表性的间接致癌物黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）作用于永生化和转化前期细胞株,采用三种代谢系统：高表达代谢酶P450 CYP1A2,低剂量底物诱导和加入经典的大鼠S9代谢辅助系统,通过软琼脂克隆形成试验和裸鼠皮下成瘤试验来比较在不同的代谢活化系统下,间接致癌物诱导细胞转化的效能。【结果】蛋白印迹验证H-Ras稳定高表达的转基因细胞株构建成功。通过Ames试验,蛋白印记和CYP1A2酶活性等方法比较三种代谢系统酶活性。在未加代谢系统的条件下,经AFB1染毒后第17周L02-R细胞发生转化,而对照组细胞L02-V在染毒20周未能发生转化。而加入S9代谢系统时,AFB1诱导L02-R细胞在第8周发生转化,比未加代谢系统缩短了9周;经低剂量0.1μmol/LAFB1诱导和高表达CYP1A2均使L02-R的转化间期缩短6周,于第11周发生转化。【结论】三种代谢系统都能够促进间接致癌物AFB1的代谢活化,缩短细胞转化的时间,提高细胞转化效率。与传统的S9代谢活化系统相比,低剂量诱导作为新的代谢活化的方法在细胞转化试验中有着良好的应用前景。     

五根散治疗四肢闭合性骨折

我所从1985年7月至1987年12月,在中西医结合治疗骨折的基础上,配合使用五根散治疗四肢闭合性骨折194例,取得了良好疗效。这种疗法,具有消肿止痛快、骨折愈合时间短、功能恢复好、病人痛苦少、价格低廉、使用安全等特点。现报告如下。