抗SARS-CoV病毒N蛋白的单链抗体(scFv)筛选

目的筛选出抗SARS-CoV病毒N蛋白的单链抗体。方法利用原核表达所获得的SARS病毒N蛋白,筛选人源单链抗体噬菌体展示库,经特异性的检测,以期得到抗SARS-CoV病毒N蛋白的特异单链抗体。结果获得了8个抗SARS病毒N蛋白的候选克隆。经测序,获得了编码抗体可变区的基因序列,并进行了原核表达。结论筛选得到的抗SARS-CoV病毒N蛋白单链抗体具有高度的特异性,可以用作临床实验或研究SARS病毒过程中快速检测SARSN蛋白或SARS病毒粒子的候选抗体。     

HLA-B基因rs1058026和rs3819299位点单核苷酸多态性与女性强直性脊柱炎易感性的关系

目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)-B基因rs1058026和rs3819299位点单核苷酸多态性与女性强直性脊柱炎(AS)易感性的相关性。方法 选取108例女性AS患者(病例组)及129例体检正常女性(对照组)。比较两组研究对象的一般资料,以及HLA-B基因rs1058026和rs3819299位点基因型和等位基因分布频率。使用Logistic回归模型分析上述基因位点基因型和等位基因与女性AS易感性的相关性。结果 病例组AS家族史比例及HLA-B27阳性比例均高于对照组(均P<0.05),而两组吸烟史比例、饮酒史比例差异均无统计学意义(均P> 0.05)。HLA-B基因rs3819299位点的等位基因G增加女性的AS发病风险(OR=16.172,P<0.05),相比于基因型TT,rs3819299位点的基因型GT增加女性的AS发病风险(OR=113.877,P<0.05);HLA-B基因rs1058026位点的等位基因和基因型与女性的AS发病风险无关(均P>0.05)。结论 HLA-B基因rs3819299位点单核苷酸多态性与女性AS易感性相关,rs38...     

万向夹立体式外固定架治疗重度开放性胫腓骨骨折

重度开放性胫腓骨骨折因其创伤严重,伤情较复杂,部分病人濒临截肢,治疗难度大,尽管目前清创及骨折固定技术不断进步,抗生素不断更新,但是骨折畸形愈合,骨不连及感染等并发症发生率仍较高,是骨伤治疗中较棘手的问题.我科2004年3月至2005年11月,采用万向夹立体式外固定架治疗新鲜Ⅲ度开放性胫腓骨骨折31例,共33侧患肢,取得满意疗效,报道如下.     

后纵韧带切除在颈椎前路手术中的应用初探

脊髓型颈椎病脊髓致压的因素包括"软性"组织如突出的椎间盘、增生肥厚的黄韧带或后纵韧带和"硬性"组织如增生的骨赘、骨化的黄韧带及后纵韧带等.外科治疗的目的是去除致压物,解除脊髓和神经根的压迫,促使神经功能的恢复.减压是获得良好疗效的关键,减压的原则为彻底去除致压物,但又应尽可能地保留椎节本身结构.切除硬性致压物在颈椎前路减压中的作用已达成共识,但对软性致压因素如增生肥厚的后纵韧带的切除仍有争议.我科2000年12月至2005年1月在颈椎前路切骨减压的基础上对术前、术中发现有后纵韧带增生者进行切除来扩大减压治疗脊髓型颈椎病,取得了较好的疗效.现将术中后纵韧带切除的指征、方法和注意事项探讨如下.     

miR-9和miR-9*在SAMP8小鼠衰老中的功能及机制

目的 探讨miR-9和miR-9*在SAMP8小鼠衰老中的功能及机制。方法 选取4-、8-、12-月龄快速老化倾向小鼠(SAMP8)作为研究对象,并以同月龄快速老化抵制小鼠(SAMR1)为对照,每组3只,取脑,切片进行原位杂交检测miR-9和miR-9*的表达;分别以miR-9和miR-9*的模拟物和抑制物转染N2a细胞,采用流式细胞术检测过表达和敲低miRNA对细胞周期的影响;生物信息学预测miR-9和miR-9*靶基因并进行双荧光素酶报告基因实验验证。结果 miR-9和miR-9*在SAMP8小鼠海马区的表达低于SAMR1小鼠。敲低miR-9和miR-9*都可以增加N2a细胞G1期细胞在群体中的比例,减少S期细胞在群体中的比例,过表达则相反。生物信息学预测并通过文献筛选miR-9的靶基因有PSEN1、SCN2B、MAP3K3和BACE1,miR-9*的靶基因有CDKn1c。荧光素酶报告基因实验证实miR-9的靶基因是MAP3K3,miR-9*的靶基因是CDKn1c。结论 miR-9和miR-9*可能是分别通过其靶基因MAP3K3和CDKn1c在SAMP8小鼠衰老进程中发挥重要作用。     

RNA结合蛋白作为氯福克酚药靶的机制初探

目的探索氯福克酚靶向RNA结合蛋白的抗胶质瘤机制。方法Biotin pull-down实验检测RNA结合蛋白N-ras上游蛋白(UNR)与靶基因Krüppel样因子13(KLF13)mRNA各片段的结合,以及氯福克酚对UNR与下游靶基因KLF13 mRNA片段结合能力的影响;氯福克酚靶点稳定性的药物亲和反应(DARTS)样品质谱检测结果与转录组芯片分析相结合,筛选其他RNA结合蛋白作用靶点,并对其他下游靶基因进行预测分析。结果氯福克酚可以增强UNR与KLF13 mRNA片段的结合;氯福克酚还可与其他RNA结合蛋白相互作用,参与mTOR信号通路以及由肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)激活的凋亡信号通路。结论氯福克酚可通过作用于RNA结合蛋白而起到抗胶质瘤的效果。     

动力髋螺钉治疗股骨粗隆部骨折126例临床分析

目的探讨动力髋螺钉(DHS)治疗股骨粗隆部骨折的手术适应证、手术方法及并发症的防治。方法采用DHS手术内固定治疗股骨粗隆部骨折126例。结果全部病人随访6~24个月,平均13个月,并发症包括内固定失败2例,下肢旋转畸形2例,髋内翻4例,下肢静脉血栓3例;其余骨折全部愈合,关节功能良好。结论运用DHS治疗股骨粗隆部骨折,能取得较好的效果;并发症的原因有手术时机延误、操作不规范、术后康复指导不当。应尽早手术,规范操作,科学康复指导以减少和避免并发症的发生。     

Polycomb家族基因Nspcl在斑马鱼早期发育的表达

目的 探讨Polycomb家族基因Nspel在模式生物斑马鱼发育早期的表达模式.方法 根据GenBank中斑马鱼Nspcl的cDNA序列设计Nspcl原位杂交探针片断,并制备地高辛标记的探针.收取单细胞期、双细胞期、胚芽期及不同时间点的体节期斑马鱼胚胎,用制备好的探针作原位杂交,显微镜下拍照,获得信号适当的杂交结果.结果 在斑马鱼体节期前,Nspcl在全身表达;从体节期开始,其表达逐渐表现出特异性,主要在头部的神经系统中表达.结论 Nspcl在模式生物斑马鱼的早期发育、尤其是神经系统发育的过程中可能扮演重要角色.