脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞基因表达谱分析

目的　利用基因芯片技术分析脂多糖 (LPS)活化的小鼠腹腔巨噬细胞基因表达谱 ,以更全面地了解LPS诱导的巨噬细胞反应。方法　以未刺激的和用 1mg/LLPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞制备3 3 P标记的cDNA探针 ,分别与含有 1176个已知基因的小鼠cDNA芯片杂交。结果　活化组和未刺激组间的 2倍差异表达基因为 118个 ,3倍差异表达基因为 6 9个 ,其中 4 4个上调 ,2 5个下调。转录因子、细胞内信号调节蛋白、炎症细胞因子和细胞凋亡相关基因的转录发生明显的调节变化。结论提供了LPS活化的巨噬细胞综合基因表达信息 ,并筛选出一些新的可能与LPS活化相关的基因。     

一种改良小鼠脓毒症模型的建立

目的 建立一种模拟外科临床实际,早期致死率低,用于脓毒症综合治疗研究的小鼠模型.方法 小鼠随机分为3组,即对照组、盲肠结扎穿孔(CLP)组和改良组.对照组行假手术;CLP组行盲肠结扎穿孔术;改良组通过CLP后8 h行盲肠切除和腹腔生理盐水冲洗建立脓毒症模型.观察各组动物出现死亡时间及24、48、72 h累计死亡率;术后4、12、24 h分别处死动物,检测外周血白细胞计数(VC-BC),血清内毒素、肿瘤坏死因子(TNF)水平及肺、肝病理.结果 改良组动物出现死亡时间较CLP组明显延迟,术后48、72 h累计死亡率虽明显低于CLP组(P＜0.05),但仍分别高达53.3%、80%;术后各时间点WBC较CLP组与假手术组明显升高(P＜0.05);血清内毒素和TNF-α水平明显高于假手术组,但低于CLP组;光镜下见肺泡间隔增宽,间质充血、水肿、大量炎性细胞浸润,肝细胞水肿伴散在点状坏死,肝窦扩张伴间质大量炎性细胞浸润.结论 该脓毒症改良模型具有良好的外科临床相关性,早期致死率低,可重复性好.     

以胶原凝胶为支架原位构建可注射型工程化肝

背景：为了解决肝移植供体的不足，最具潜力的肝组织工程技术悄然兴起，为肝组织的修复与功能重建开辟了新的前景。 目的：探索一种以新生大鼠肝细胞为种子细胞，以胶原凝胶为支架材料，可原位注射的工程化肝组织构建方法。 设计、时间及地点：以动物为观察对象的实验方法探索，于2007-03/2008-02在解放军总医院普通外科研究所完成。 材料：成年雌性SD大鼠及出生24 h以内的雄性新生SD大鼠。 方法：以胰酶消化法获取新生大鼠肝细胞，以PKH26标记后与液态胶原复合，采用注射方法植入大鼠肝脏。 主要观察指标：于肝细胞/胶原凝胶复合物植入当天及植入后第3，7天序贯取样、切片，分别行苏木精-伊红染色和白蛋白免疫组织化学染色后对“类肝组织”进行形态学观察，并观察植入细胞的示踪荧光。 结果：①以胶原为基质构建的工程化肝组织能方便地植入到肝脏。②荧光显微镜观察到移植区域主要由PKH26阳性细胞组成。③苏木精-伊红染色显示，移植区域肝细胞在胶原凝胶中可存活、生长。④免疫组织化学染色证实植入肝细胞能够表达白蛋白。 结论：以新生大鼠肝细胞/胶原凝胶为基础构建可原位注射的工程化肝组织是可行的，这种方法对于发展以组织工程为基础的原位肝脏重建具有良好的应用前景。     

小鼠再生肝浸出液体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞样分化的研究

目的应用小鼠再生肝浸出液体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞样分化。方法利用2／3肝部分切除术后36h小鼠再生肝组织浸出液定向诱导小鼠骨髓间充质干细胞，在倒置显微镜下观察细胞形态，应用免疫荧光法鉴定细胞性质。结果骨髓间充质干细胞经小鼠再生肝浸出液诱导7d后，呈肝细胞样圆形，1～2周后免疫荧光染色可见细胞表达肝细胞标记物CK8、CK18和清蛋白。结论小鼠再生肝浸出液可诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞方向分化。     

内毒素活化巨噬细胞早期和晚期基因表达的cDNA芯片分析

目的　利用 c DNA芯片技术分析内毒素活化的小鼠腹腔巨噬细胞早期和晚期基因表达 ,以更全面了解内毒素在感染、创伤反应中通过巨噬细胞介导的炎症和免疫反应。方法　以未刺激的和用 1mg/ L脂多糖 ( L PS)分别刺激 2 h(早期 )和 2 4 h(晚期 )的小鼠腹腔巨噬细胞制备 33P标记的 c DNA探针 ,并分别与小鼠 c DNA表达芯片 (含 1176个已知基因 )杂交。结果　巨噬细胞活化早期的 3倍差异表达基因为 6 9个 ,其中4 4个上调 ,2 5个下调 ;巨噬细胞活化晚期的 3倍差异表达基因中有 11个上调 ,2 6个下调 ;只有 8个基因同时出现于活化早期和晚期的差异表达基因中。许多转录因子、细胞内信号转导调节蛋白、炎症细胞因子和细胞凋亡相关基因的表达均发生了明显的调节变化。发现 BTB和 CNC同源 1( BACH1)、早期生长反应蛋白 2( EGR2 )、E4 7反应蛋白 1( EIP1)、Ngfi A结合蛋白 2 ( NAB2 )、成髓细胞白血病癌基因样蛋白 ( MYBL2 )、神经纤维癌蛋白基因 1( NF1)、睫状神经营养因子 ( CNTF)和 Sema4 A等一些以前未曾报道与 L PS诱导的巨噬细胞活化相关的基因。结论　采用 c DNA芯片技术了解内毒素诱导的巨噬细胞活化早期和晚期的综合基因表达信息 ,有助于更好地了解感染、创伤后细菌内毒素诱导的炎症免疫反应     

肝十二指肠韧带内注射利多卡因减轻大鼠肝脏的热缺血/再灌注损伤

肝脏的缺血预适应(Ischemicpreconditioning ,IP)能有效地减轻肝脏缺血/再灌注(ischemia/reprefusion ,I/R)损伤,但其在临床的使用尚受到限制[1] 。李晓立等[2 ] 的初步研究表明,肝脏I/R损伤前,肝十二指肠韧带内注射普鲁卡因预处理能明显减轻肝脏I/R后早期的微循环障碍,可能是一种更方便临床使用的减轻肝脏I/R损伤的方法。本实验采用肝十二指肠韧带内注射利多卡因的方法,进一步探讨该方法对肝脏I/R损伤的影响及其减轻I/R损伤的有效性。材料和方法一、实验方法及分组5 8只雄性SD大鼠(2 5 0～30 0g) ,随机分成4组。腹腔内注射6 %水合氯…     

脾蒂血管束法构建工程化肝组织

目的 通过在脾蒂血管束内注射工程化肝组织凝胶,探讨一种体内植入较大尺度组织工程化肝脏的新方法.方法 2×107新生大鼠肝细胞与1ml生物蛋白胶混合构建工程化肝组织凝胶.切除SD大鼠的脾脏,并远端结扎、近端套圈后形成血管束.将凝胶注入血管束内,形成体积≥1 cm3的球形组织;同法构建肝组织凝胶植入大腿皮下作为对照.术后2周行大体观察,组织切片苏木素-伊红(HE)染色.结果 皮下组残留组织块较小,直径(1.63±0.55) mm,其内血管组织少.实验组形成了较大的组织块,直径(7.33±2.40) mm,内有大量血管形成.结论 在脾蒂血管束内构建工程化肝组织可以形成血管化的较大尺度类肝组织.     

挤压端提整复器的研制及临床应用

挤压端提整复器的研制及临床应用河北省晋州市中医院（０５２２６０）邵亚平，刘巨超，张福贵，张彦来主题词挤压端提整复器／仪器和设备，力学分析挤压端提手法是骨科临床常用的手法，运用得当，每获良效。然而一些整复难度较大的骨折如跟骨骨折、胫骨髁骨折、踝关节骨折...     

双特异性单链抗体介导的CIK细胞对结肠癌的体内杀伤作用

目的 观察双特异性单链抗体介导的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)细胞在体内杀伤结肠癌细胞的作用.方法 将SW1116细胞种植裸鼠后,建立裸鼠结肠癌模型,分为3组分别经尾静脉注入生理盐水、CIK细胞及CIK细胞+双特异性抗体,每周治疗1次,共4周,取出肿瘤组织称重,并计算出各组的抑瘤率.结果 在体内,CIK组和CIK+双抗组均可抑制肿瘤生长,抑瘤率分别为29.70%和65.02%,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).CIK组和CIK+双抗组的瘤体积、瘤重、抑瘤率比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 CIK细胞本身可以抑制肿瘤细胞的生长,在加入抗CD3抗癌胚抗原(CEA)双特异性单链抗体后抑瘤作用明显增强.

Abstract：

Objective To investigate the killing effect of cytokine-induced killer cell (CIK) mediated by bispecific single-chain antibody in vivo on colon cancer cells. Methods The colon cancer model in nude mice was established with SW1116 cells. The mice were divided into 3 groups, which were injected with normal saline, CIK cells and CIK cells + bispecific antibody, respectively, once a week for 4 weeks. The tumors were removed and weighed, and the tumore inhibition rate in each group was calculated. Results The CIK cells and CIK cells with bispecific single-chain antibody could both inhibit tumor growth in vivowith the tumor inhibition rate being 29. 70% and 65.02% respectively ( P ＜ 0. 05 ). There was significant difference in tumor inhibition rate between CIK cells and CIK cells with bispecific single-chain antibody ( P ＜ 0. 05 ). Conclusion CIK cells alone can inhibit tumor cell growth, CIK cells in combination with bispecific single-chain antibody can exert more significant antitumor effect.