喉咽清制剂的体外抑病毒作用的实验研究

实验用材料 实验用样品：1—4号样品分别为4个处方药材采用70％乙醇回流提取，回收乙醇至浓度为1ml/g(即1ml药液相当于1g生药)。由哈医大二院药研所提供。样品处方组成：1号样品主要由山豆根、桔梗、薄荷、五味子、陈皮、乌梅、甘草等组成。2号样品主要由桔梗、山豆根、五味子等组成。3号样品主要由桔梗、山豆根、五味子、陈皮等组成。4号样品主要由桔梗、山豆根、陈皮、甘草等组成。实验用病毒：柯萨奇病毒3、5型(CB3、CB3)，腺病毒3、7型(AdN3、AdN7)，合胞病毒(RSV)，流感病毒、副流感病毒均由黑龙江省病毒所提供。其它材料：日本株式会社的MEM培养基丹麦产96孔培养板，日本产CO2孵箱，无菌操作台，普通显微镜。     

复方中药喉咽清水蜜丸的研制及其体外溶出度的研究

目的;研究喉咽清水蜜丸的制剂工艺及质量标准,并通过体外溶出度探讨自研样品处方和工艺的可行性。方法：按照中药制剂方法研制水蜜丸,照中国药典１９９５年版要求测定溶出度,用二阶导数光谱法测橙皮苷含量来确定水蜜丸的溶出曲线。结果：所制水蜜丸符合药典要求。结论：喉咽清水蜜丸的处方和工艺是可行的。     

非洲爪蟾卵非细胞翻译体系的建立及应用

目的　当前人类基因组研究的重心正在由“结构”向“功能”转移。而基因功能的研究离不开基因的表达 ,这就迫切需要一种操作简便 ,适用范围广的表达工具来表达有功能的蛋白质。方法　非洲爪蟾注射HCG催卵 ,2 %半胱氨酸去胶膜 ,高速离心制备卵提取物 ,即为非洲爪蟾卵非细胞翻译体系。通过亚克隆技术将TFAR1 9基因克隆到体外转录质粒中 ,通过酶切线性化模板 ,体外转录 ,加帽合成cRNA ,将其加入到制备的蛙卵提取物中进行体外翻译。结果　用Westernblot鉴定 ,获得了高效翻译 ,并且加入亚精胺和ATP再生系统可以提高翻译的效率。结论　非洲爪蟾卵非细胞翻译体系为表达有功能的蛋白提供了一种极有应用前景的表达工具     

氢溴酸右美沙芬咀嚼片在正常人体内的生物利用度

 目的 建立反相高效液相色谱法测定人血浆中氢溴酸右美沙芬的浓度。方法 采用Nova-Pak C₁₈色谱柱,以乙腈-水-36%乙酸(50∶49∶1),用三乙胺调pH至4.3,流速：1 ml·min^-1,荧光检测,激发波长280 nm,发射波长310 nm。结果 氢溴酸右美沙芬约1.95 min达高峰浓度,c_max为(6.20±1.32)ng·ml^-1。结论 本法简便、灵敏、专属性好,适用于氢溴酸右美沙芬血药浓度测定及药代动力学研究。     

噁丙嗪胶囊的药物动力学及相对生物利用度

目的:测定噁丙嗪的体内过程,作出相对生物利用度评价,为临床合理用药提供可靠的依据.方法:10名男性健康志愿者,随机自身交叉po单剂量噁丙嗪胶囊或片剂,采用HPLC法测定不同时间的血药浓度,经3P87软件拟合处理,并计算药物动力学参数.结果:噁丙嗪胶囊和片剂血药浓度-时间曲线均符合一房室模型,体内药物达峰时间分别为(3.95±0.89)和(4.13±0.93)h;c_(max)分别为(52.84±3.12)和(53.74±2.32)μg/ml;T_(1/2)分别为(29.36±1.69)和(28.73±2.27)h;AUC分别为(2453.54±150.78)和(2486.71±187.38)(mg/L)·h,噁丙嗪胶囊的相对生物利用度为98.93%.结论:两种制剂具有生物等效性.     

非洲爪蟾卵非细胞体系在药物筛选方面应用初探

目的　为寻找具有分子水平、特异、快速、可用来筛选具有调节凋亡作用药物的方法 ,非洲爪蟾卵非细胞体系 (XS 2 0 0 )作为一种药物的筛选平台 ,研究其作为筛选药物方法的可能性。对体系内凋亡过程的影响进行了初步的研究。方法　药物 (激素 :雌激素及其部分拮抗剂 ,中药提取物 :灵芝三萜和多糖 ,小分子药物 :阿司匹林、水杨酸钠和乙酰唑胺 ,维生素C及重组蛋白rhTFAR19)预先与XS 2 0 0共孵育 ,然后加入阈剂量 (0 .0 6 2 5 μmol·L- 1)的细胞色素C和小鼠肝细胞核 ,提取总DNA进行电泳鉴定。结果　rhTFAR19对XS 2 0 0凋亡过程有直接的促进作用 ,而其他药物则无明显作用。结论　XS 2 0 0可以成为一个良好的分子水平的药物筛选平台 ,特异筛选具有调节凋亡作用的药物。     

非洲爪蟾卵无细胞凋亡体系的建立

目的：建立一种简便、高效的无细胞凋亡体系，探讨外源性细胞核在其中的凋亡过程及z-VAD-fmk对其的抑制作用。方法：超速离心制备非洲爪蟾卵无细胞体系，用细胞色素C激活为凋亡体系。应用荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳、ApoAlert Caspase-3 Colorimetric Assay等方法检测外源细胞核在无细胞凋亡体系中的凋亡过程及z-VAD-fmk的抑制作用。结果：制备的爪蟾卵无细胞体系可由细胞色素C激活为凋亡体系，外源加入的细胞核呈现典型的形态学变化，总DNA特异降解形成DNA ladder。体系内内源特异核酸酶被激活。z-VAD-fmk可抑制DNA ladder的形成。凋亡特异蛋白酶XCPP32活性明显升高。结论：本实验建立的无细胞凋亡体系可以高效的诱导外源细胞核凋亡，重现体内过程。     

布洛芬缓释胶囊的体内血药浓度及体外溶出度的相关性研究

 目的测定布洛芬缓释胶囊中布洛芬的血药浓度,通过布洛芬缓释胶囊的体外溶出度实验,利用统计学方法研究其体内外参数的相关性、并提供质控方法。方法采用高效液相色谱法测定血药浓度。溶出度采用中国药典1995年版二部附录XC第一法测定,用美国Hanson Research生产的全自动溶出度测定仪操作。结果布洛芬体外溶出度累积百分率与体内吸收百分率建立一元线性回归方程：F=6.2205x+1.0901(r=0.9755),线性范围4.6～24.6 μg·mL^-1。结论布洛芬的体内外参数间有明显的相关性。     

固相萃取-反相高效液相色谱法测定全血环孢素A

目的：采用快速固相萃取反相高效液相色谱法测定全血环孢素Ａ。方法：全血用水溶血,用乙腈和水混合液沉淀蛋白后,用ＳＰＥ固相萃取柱萃取,５０％甲醇冲洗杂质,９５％甲醇洗脱,挥干,乙腈重组,正己烷进一步除去杂质,重组液上机。本法采用柱温为７０℃的Ｃ１８反相色谱柱,以乙腈∶甲醇∶水（３∶１∶１,Ｖ∶Ｖ）为流动相,检测波长２１０ｎｍ。结果：本法最低检出浓度为２０ｎｇ·ｍｌ－１。至少在４０～１５００ｎｇ·ｍｌ－１范围内呈线性。平均方法回收率１０２．９％,ＲＳＤ均在１０％以内。结论：本法灵敏,特异,既适合临床常规检测又适合ＣｓＡ的药动学研究。     

环孢素A在健康人体内的药物动力学

目的:测定环孢素A(CsA)在健康人体的药物动力学参数.方法:10名健康志愿者单剂量po CsA 150mg后,固相萃取HPLC法测定其血药浓度,所得数据采用3P87程序拟合,求出有关药物动力学参数.结果:C_(max)=(815.35±210.72)ng/ml,t_(max)=(1.36±0.25)h,T_(1/2a)=(0.98±0.20)h,T_(1/2p)=(6·82±1.30)h.结论:CsA在健康人体内呈二房室开放模型分布,药物动力学参数个体差异大.