细胞因子检测的方法及其临床应用

本简介了几种与白细胞介素密切相关的临床疾病，概述了目前常用的细胞因子检测方法，对细胞因子的应用作了首要的评价。     

细胞固定技术在两种细胞共同培养研究中的应用

目的探讨细胞固定对鉴别支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞两种细胞共同培养过程中细胞代谢产物来源的作用及其机制。方法用1％多聚甲醛固定嗜酸粒细胞和支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞；通过锥虫蓝、伊红细胞染色，观察多聚甲醛固定对细胞形态、结构、活力和与正常细胞接触培养过程中与正常细胞黏附能力的影响；用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法定量分析固定细胞与正常细胞共同培养过程中对白细胞介素（IL）-6释放的影响。结果多聚甲醛固定后支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞均变为死亡细胞，但其形态、结构及嗜酸粒细胞中颗粒着色无明显变化；多聚甲醛固定的BEAS-2B细胞与正常及固定的嗜酸粒细胞接触培养仅有极少量细胞发生黏附，而多聚甲醛固定的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞接触培养则有较大数量的细胞发生黏附，但黏附细胞数量少于两种正常细胞的共同培养；固定后的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞共同培养过程中可诱导BEAS-2B细胞释放IL-6。但与嗜酸粒细胞单独培养比较，固定后BEAS-2B细胞与正常嗜酸粒细胞共同培养对细胞培养上清液中IL-6浓度无明显影响。结论经多聚甲醛固定后，细胞死亡并丧失其代谢功能，但其表面仍保留可诱导其他细胞活化的结构成分，此技术可用于两种或多种细胞共同培养过程中代谢产物来源的鉴别。     

p38 MAPK对嗜酸性粒细胞和支气管上皮细胞共培养时细胞因子释放的调控作用

目的 了解嗜酸性粒细胞和支气管上皮细胞相互作用诱导细胞因子释放的p38 MAPK信号转导通路.方法 用CD16磁珠抗体分离外周血中嗜酸性粒细胞,以嗜酸性粒细胞和支气管上皮细胞(BEAS-2B)接触共培养为实验模型,观察SB 203580对细胞培养上清液中细胞因子浓度的影响.细胞因子浓度采用ELISA和流式细胞微珠方法测定.结果 SB 203580能够有效抑制BEAS-2B细胞释放IL-6、IL-8(P＜0.05)和嗜酸性粒细胞释放IL-8(P＜0.01).SB 203580对嗜酸性粒细胞与BEAS-2B细胞接触共培养诱导的IL-6、IL-8和IP-10释放具有显著抑制作用(P＜0.001).结论 嗜酸性粒细胞、BEAS-2B细胞单独或相互作用时均通过p38 MAPK信号转导通路释放细胞因子.     

哮喘患儿IL-4近侧启动子区克隆和多态性分析

目的：对哮喘症患儿白细胞介素-4(IL-4)近侧启动子区进行克隆并分析其DNA序列的多态性。方法：对40名有明显家族及过敏史哮喘患儿和１０名正常儿童，以多聚酶链式反应（PCR）结合单链构象多态性（SSCP）扩增、筛选IL-4近侧启动子片段，进一步构建正常对照和异常条带PCR产物的重组质粒pIL-4-Jx2，并用双脱氧链终止法对重组质粒进行序列测定。结果：在对40名患儿SSCP分析中发现了7组异常条带。DNA测序结果显示有４外变异位点于已知的调控元件之内或毗邻位点，１名病人-229位C被A所替代，该变异恰好位于IL-4正性调节元件-I(PRE-I)之内；２名病人负性调节元件-Ⅱ（NRE-Ⅱ）毗邻C被T所替代，TATA框前增加1个G；1名病人STAT-6元件附近缺少了ATTTT五碱基核苷酸。结论：过敏性哮喘患儿IL-4近侧启动子区DNA序列存在多态性，这可能与IL-4基因异常表达及哮喘的发病有关。     

在校大学生营养知信行现状及影响因素分析

了解在校大学生营养知识、态度、行为现状及其影响因素,为高校营养教育提供参考.方法 抽取北京师范大学、北京师范大学珠海分校、西安建筑科技大学和武汉理工大学4所综合高校一至三年级2 261名在校大学生为调查对象,采用问卷调查的方法,调查内容包括营养知识、态度、行为和基本信息4部分.结果 大学生营养知识、态度、行为得分分别为(10.5±3.6)(20.8±4.2)(18.3±3.7)分;不同年级大学生营养知识、态度、行为的得分之间差异均有统计学意义(F值分别为19.35,15.19,5.47,P值均<0.01),营养知识得分情况为三年级>一年级>二年级,营养态度得分情况为二年级>三年级、一年级,营养行为得分情况为一年级>三年级;不同性别在校大学生营养KAP得分差异均有统计学意义(F值分别为=14.16,57.68,8.95,P值均<0.01),女生的得分均高于男生;父亲文化程度、家庭居住地、开设营养教育课程、对学生进行营养健康教育、食物支出、饮食比较、年龄、是否接受过专业指导以及学校张贴宣传资料为大学生营养知识、态度、行为的影响因素.结论 在校大学生营养知识行为水平较低,学校有关营养课程开设、营养教育宣传和营养专业指导等对大学生营养知识、态度、行为影响较大.     

抗毒补肺汤预防SARS的临床观察

目的 观察抗毒补肺汤在急性重症呼吸综合征(SARS)暴发期间对香港医务工作者的预防保护作用。方法 在香港SARS肆虐期间,总共有2601名医务工作者接受了本研究中心派发的抗毒补肺汤,确信其中有1063名按要求连续2周服用了该方药并寄回有效问卷,这部分人组成了中药组,另有未服本中药的15374名组成了对照组。通过这份问卷,可以了解受试者在研究开始的前1天及第14天、第28天,其有关生活质量、感冒样症状、温病证候的变化。中药组有37名接受了血清免疫学检验。结果 中药组中无感染SARS者,而对照组中有64名(0．4％)感染了SARS,而且中药组自身前后对照,服药后在感冒样症状、温病证候、生活质量方面均得到显著改善。中药组37份血清免疫学结果显示,服用中药后,机体免疫功能得到了改善与提高。结论 抗毒补肺汤可能通过改善临床症状、提高生活质量及增强机体免疫功能来预防SARS的发生。     

香港素食小儿之营养状况

香港素食小儿之营养状况香港中文大学儿科学系梁淑芳罗祥瑛阮文宾社会医学会李绍鸿化学物理系杨孟思林伟基在西方社会，素食风气日渐兴盛［１］，除了宗教原因外，还有保健因素。不少文献报道素食者在患冠心病及癌症等机会都比杂食者少［２］。但另一方面，在某些营养素上...     

支气管哮喘患者白细胞介素-4近侧启动子区克隆和序列分析

目的 探讨哮喘患者白细胞介素-4（IL-4）过度表达的可能调控机制。方法 选取4例有明显家族史的过敏性哮喘患儿和1例正常儿童,采用聚合酶链反应（PCR）扩增IL-4近侧启动子片段,PCR产物经XbaI、HindⅢ限制性内切酶进行双酶切后,回收酶切片段,再与经过相同双酶切的载体Jx2相连接,制备重组质粒,然后经转化、筛选、酶切鉴定得到重组质粒pIL-4-Jx2,最后采用双脱氧终止法对重组质粒进行序列测定。结果 （1）正常儿童IL-4近侧启动子序列与基因库序列相同。（2）1例患儿-229位C被A所替代。该变异恰好位于正性调节元件-I之内,结论 过敏性哮喘患者IL-4近侧启动子区DNA片段被成功克隆,并发现1例患者IL-4调控元件内一未曾报道过的变异位点,这有助于对哮喘者IL-4基因异常表达调控机制的研究。     

嗜酸粒细胞对支气管上皮细胞表达细胞间黏附分子1的诱导作用

目的探讨嗜酸粒细胞与支气管上皮细胞联合培养对支气管上皮细胞表达细胞间黏附分子(ICAM)-1的影响。方法人嗜酸粒细胞与支气管上皮细胞(BEAS-2B)联合培养4和12h,提取BEAS-2B细胞总RNA;通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析与嗜酸粒细胞联合培养对BEAS-2B细胞中ICAM-1基因表达的影响;BEAS-2B细胞表面ICAM-1蛋白质的变化用荧光抗体流式细胞分析。结果经嗜酸粒细胞活化后,BEAS-2B细胞中ICAM-1基因表达上调;BEAS-2B细胞表面ICAM-1蛋白质量显著增加(34.23±4.19和57.60±7.62,P<0.05)。结论嗜酸粒细胞与支气管上皮细胞接触培养可诱导支气管上皮细胞表达ICAM-1。