衰老大鼠急性肺损伤诱导肾功能受损

目的:观察衰老大鼠的急性肺损伤(ALI)是否可进一步诱导肾功能受损。方法:Wistar雄性大鼠40只, 复制成衰老模型, 然后再随机分成对照组(静脉注射生理盐水), ALI组(静脉注射脂多糖, LPS)及LPS组(左心室内注射LPS), 后两组再分2h及6h组。每组8只。注LPS后2h或6h收集血并取肺、肾。制备肺、肾组织匀浆待测。结果:ALI组在注LPS后仅至6h时血中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量才有显著升高(均P＜0.01)。而LPS组Cr、BUN含量均无显著升高。ALI组血中乳酸(LD)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量在注LPS后2h时均显著升高(P＜0.05, P＜0.01);而肺组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_X)及Na⁺-K⁺-ATPase活性均显著下降(均P＜0.01);上述变化持续至观察的6h时。ALI组在注LPS后仅至6h时, 肾组织中MDA、NO含量才有显著升高(均P＜0.01)及GSH-P_X、Na⁺-K⁺-ATPase活性显著下降(P＜0.01)。而在LPS组, 除注LPS后2h时的血中和2h、6h的肺组织中NO含量显著升高(均P＜0.05)及2h时的肺组织中Na⁺-K⁺-ATPase活性显著下降(P＜0.05)外, 其它均无显著变化。结论:给衰老大鼠静脉内注射5mg/kg的LPS可致ALI, 并可进一步诱导肾功能受损。     

银杏叶提取物对人工衰老大鼠肺肾功能的保护作用

背景衰老大鼠静脉注射脂多糖后能导致肺损伤,进而发现随着肺损伤的进展,影响肾功能.银杏叶提取物具有一定的清除自由基、改善血液流变学和保护血管内皮细胞等功能. 目的研究人工衰老大鼠肺损伤后是否发生肾功能不全,以验证老年多器官功能不全的肺启动机制,并观察银杏叶提取物对其是否有保护作用. 设计以实验动物为观察对象的随机对照的实验. 单位中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系. 材料实验于2001-05/2003-01在中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系实验室完成.选用36只Wistar雄性大鼠. 方法给大鼠每天1次经腹腔注入D-半乳糖(50 mg/kg),连续6周,复制衰老动物模型,再随机分为3组对照组(静脉注射生理盐水);脂多糖组(静脉注射脂多糖,5 mg/kg);银杏叶提取物+脂多糖组(注射脂多糖前7 d开始,每天银杏叶提取物灌胃1次,31 mg/kg).各组大鼠在给生理盐水或脂多糖后2 h或6 h取血和肺、肾组织. 主要观察指标用比色法测定血中肌酐、尿素氮含量;血、肺、肾组织中丙二醛、No2-/NO3-含量及谷胱甘肽过氧化物酶及Na+-K+-ATP酶活性的测定. 结果衰老大鼠在注射脂多糖后2,6h时已形成急性肺损伤.注射脂多糖 后2 h血中肌酐及尿素氮含量无明显升高,而6 h时均显著升高,分别为 (94.7±10.3)μmol/L,(11.4±1.9)mmol/L.在注射脂多糖后2h,血和肺组织 中丙二醛[(22.5+2.6)nmol/L,(25.8±2.9)μmol/gl和No2-/NO3-含量[(58.5 ±6.8)mmol/L,(34.6±3.8μmol/g]均显著升高,而谷胱甘肽过氧化物酶 [(355.1±45.0)μkat/g]及Na+-K+-ATP酶[(886.3±97.1)nkat/g]下降.上述指标 的变化持续至观察的6 h.而肾组织中上述指标仅在注射脂多糖后6 h才 有显著性变化.银杏叶提取物可显著缓解上述指标的变化. 结论脂多糖所致衰老大鼠的肺损伤可进一步诱导肾功能受损.银杏叶 提取物对脂多糖诱发的衰老大鼠的急性肺损伤和由此诱导的肾功能受 损有明显的保护作用.     

雷公藤多甙对急性移植物抗宿主病时小鼠T细胞及其亚群的影响

目的：观察雷公藤多甙对急性移植物抗宿主病时小鼠脾，皮肤，肺，肠组织中T细胞及其亚群（CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞）的影响，探讨雷公藤多甙对急性移植物抗宿主病的作用及机理。方法：用直线加速器排空受鼠骨髓后注入供鼠骨髓与脾淋巴细胞的混合液，复制出急性移植物抗宿主病（aGVHD)模型。观察雷公藤多甙，雷公藤多甙加环孢素A（CsA),CsA加甲氨蝶呤对各组小鼠脾CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞（流式细胞仪检测），皮肤，肺，肠组织CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞浸润情况（应用免疫组化技术检测）的影响。结果：雷公藤多甙组小鼠脾，皮肤，肺组织CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞明显低于异基因移植组（P<0.05)，而小肠组织CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞变化不明显（P>0.05)。结论：雷公藤多甙可降低脾T细胞及亚群数量，减少皮肤肺的T细胞浸润，具有明显的抗aGVHD作用。     

MAPK和NF-κB上调脂多糖诱导的小鼠肺微血管内皮细胞Toll-like受体4的表达

目的观察MAPK和NF-κB在经脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)Toll-like受体4(TLR4)表达增强中的作用。方法分离培养PMVECs。不同浓度的LPS与PMVECs共培养2 h,或与LPS(100μg/L)作用不同时间。用ELISA法检测培养上清液中TNF-α含量。分别用ERK抑制剂PD98059和P38MAPK抑制剂SB203580或NF-κB抑制剂PDTC进行干预。用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR4和TNF-αmRNA。用W estern-b lot检测ERK/P38 MAPK和核蛋白NF-κB的表达。结果在LPS浓度为50~500μg/L时,作用于PMVECs 2 h,或LPS 100μg/L作用不同时间时,培养上清液中TNF-α含量呈剂量和时间依赖性显著增加(P<0.01)。PMVECs表达TNF-α及TLR4 mRNA增加,6 h时达高峰。分别用上述抑制剂均可缓解上述变化,而同时联合使用PD98059和SB203580则进一步增强该抑制作用。上述抑制剂分别缓解LPS诱导的PMVECs表达ERK/P38 MAPK和NF-κB蛋白增强。结论MAPK和NF-κB上调给脂多糖诱导的小鼠PMVECs TLR4的表达。     

内毒素受体CD14、TLR4在脂多糖（LPS）致小鼠肺、肝功能损伤中的变化

目的 :观察静脉注射LPS致小鼠肺、肝功能损伤时 ,小鼠组织及血液中LPS受体CD14、TLR4的变化情况 ,从而验证LPS所致的肺损伤可进一步诱发肝功能受损。方法 :BALB/C小鼠 2 5只 ,随机分成五组 ,并予尾静脉注射LPS(8mg/kg) ,分别于 0、2、6、12、2 4h后处死 ,取血清及肺、肝组织。 (1)形态学 :制备肺、肝组织冰冻切片 ,通过免疫组化方法观察肺、肝组织中CD14、TLR4的表达变化。 (2 )蛋白水平 :采用WesternBlot方法检测血清中sCD14及肺、肝组织中CD14、TLR4的表达情况。 (3)mRNA水平 :采用RT -PCR方法检测肺、肝组织中CD14、T…     

MAPK和NF-κB上调脂多糖诱导的小鼠肺微血管内皮细胞Toll-like受体4的表达

目的 观察MAPK和NF-κB在经脂多糖（LPS）诱导的小鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）Toll-1ike受体4（TLR4）表达增强中的作用。方法 分离培养PMVECs。不同浓度的LPS与PMVECs共培养2h，或与LPS（100μg/L）作用不同时间。用ELISA法检测培养上清液中TNF-α含量。分别用ERK抑制剂PD98059和P38MAPK抑制剂SB203580或NF-κB抑制剂PDTC进行干预。用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TLR4和TNF-α mRNA。用Western-blot检测ERK／P38MAPK和核蛋白NF-κB的表达。结果 在LPS浓度为50～500μg／L时，作用于PMVECs 2h，或LPS100μg/L作用不同时间时，培养上清液中TNF-α含量呈剂量和时间依赖性显著增加（P〈0．01）。PMVECs表达TNF-α及TLR4mRNA增加，6h时达高峰。分别用上述抑制剂均可缓解上述变化，而同时联合使用PD98059和SB203580则进一步增强该抑制作用。上述抑制剂分别缓解LPS诱导的PMVECs表达ERK／P38MAPK和NF-κB蛋白增强。结论 MAPK和NF-κB上调给脂多糖诱导的小鼠PMVECs TLR4的表达。     

银杏叶提取物对人工衰老大鼠肺肾功能的保护作用

背景：衰老大鼠静脉注射脂多糖后能导致肺损伤。进而发现随着肺损伤的进展，影响肾功能。银杏叶提取物具有一定的清除自由基、改善血液流变学和保护血管内皮细胞等功能。目的：研究人工衰老大鼠肺损伤后是否发生肾功能不全，以验证老年多器官功能不全的肺启动机制，并观察银杏叶提取物对其是否有保护作用。设计：以实验动物为观察对象的随机对照的实验。单位：中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系。材料：实验于2001-05／2003-01在中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系实验室完成。选用36只Wistar雄性大鼠。方法：给大鼠每天1次经腹腔注入D-半乳糖（50mg／ks），连续6周。复制衰老动物模型，再随机分为3组：对照组（静脉注射生理盐水）；脂多糖组（静脉注射脂多糖，5mg／ks）；银杏叶提取物＋脂多糖组（注射脂多糖前7d开始。每天银杏叶提取物灌胃1次，31mg／ks）。各组大鼠在给生理盐水或脂多糖后2h或6h取血和肺、肾组织。。主要观察指标：用比色法测定血中肌酐、尿素氮含量；血、肺、肾组织中丙二醛、NO2^-/NO3^-含量及谷胱甘肽过氧化物酶及Na^＋-K^＋-ATP酶活性的测定。结果：衰老大鼠在注射脂多糖后2，6h时已形成急性肺损伤。注射脂多糖后2h血中肌酐及尿素氮含量无明显升高，而6h时均显著升高，分别为（94．7&;#177;10．3）μmol／L，（11．4&;#177;1．9）mmol／L。在注射脂多糖后2h．血和肺组织中丙二醛[（22．5&;#177;2.6）nmol／L，（25．8&;#177;2.9）μmol／g]和NO2^-/NO3^-含量[（58．5&;#177;6．8）mmol／L,（34．6&;#177;3．8）μmol／g]均显著升高，而谷胱甘肽过氧化物酶[（355.1&;#177;45．0）μkat／g]及Na^＋-K^＋-ATP酶[（886.3&;#177;97.2）nkat／g]下降。上述指标的变化持续至观察的6h。而肾组织中上述指标仅在注射脂多糖后6h才有显著性变化。银杏叶提取物可显著缓解上述指标的变化。结论：脂多糖所致衰老大鼠的肺损伤可进一步诱导肾功能受损。银杏叶提取物对脂多糖诱发的衰老大鼠的急性肺损伤和由此诱导的肾功能受损有明显的保护作用。     

衰老大鼠急性肺损伤诱导肝功能受损的研究

目的　观察脂多糖 (LPS)致衰老大鼠的急性肺损伤 (ALI)是否可进一步诱发肝功能受损及银杏叶提取物 (GBE)对其是否有保护作用。方法　雄性Wistar大鼠 3 0只复制成衰老模型。再随机分成对照组 (静脉注射生理盐水 ) ;LPS组 (静脉注射LPS)及GBE +LPS组 (注LPS前 7天开始每天GBE灌胃 1次 )。注LPS后 2、6h收集血液并取肺、肝。制备肺、肝组织匀浆待测。结果　衰老大鼠在注射LPS后 2、6h时形成ALI。对照组注射LPS表明 ,2h血中总胆红素含量及谷丙转氨酶 (GPT)活性为(10 9± 0 6)mg/L、(2 6± 3 )U ,LPS 6h组为 (3 0 1± 2 1)mg/L、(88± 12 )U ,两组比较差异有显著性 (P均<0 0 0 1) ;对照组注射LPS表明 ,2h血和肺组织中每毫克蛋白中丙二醛 (MDA)含量分别为 (15 9±1 8) μmol/L、(18 8± 2 1)nmol,LPS 2h组为 (2 2 1± 1 9) μmol/L、(2 8 8± 3 1)nmol,两组比较差异有显著性 (P均 <0 0 0 1) ;而每毫克蛋白血和肺组织中超氧化物歧化酶 (SOD)活性对照组分别为 (2 5 5±2 6)mU/L、(3 6 1± 2 4)U ,LPS 2h组分别为 (2 0 6± 1 9)mU/L、(3 2 0± 2 7)U ,两组比较差异有显著性(P <0 0 1和 0 0 5 )。对照组注射LPS表明 ,2h时肺组织中每毫克蛋白中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)及Na+ K+ ATP酶活性     

高压氧对小鼠aGVHD时细胞因子浓度的影响

目的：观察异基因骨髓移植小鼠，经高压氧作用后，血清中促进aGVHD的细胞因子TNF－α、IL－2及抑制aGVHD的细胞因子IL－4、IL－10浓度及比值的变化，探讨HBO抗aGVHD机理，为HBO的临床应用提供实验依据。方法：复制aGVHD动物模型，经高压氧作用后，用ELISA法检测血清细胞因子浓度并计算比值。结果：经高压氧作用后，血清中细胞因子浓度及比值降低。结论:HBO厅明显抑制aGVHD，提高aGVHD小鼠的生存率。