丹参有效成分对TGF-β1诱导的肺上皮细胞间质转化的影响

目的:通过建立肺上皮间质转化的体外模型,筛选出对肺纤维化有抑制作用的丹参活性成分。方法:设立丹酚酸A(10,20,40,80,160μmol·L~(-1))组,丹酚酸B(10,20,40,80,160μmol·L~(-1))组,丹参素(10,20,40,80,160μmol·L~(-1))组,丹参酮Ⅱ_A(10,20,40,80,160μmol·L~(-1))组及空白组作用于A549细胞,用细胞增殖与毒性检测法(MTS)检测这些有效成分对A549细胞的毒性作用,以筛选出丹参有效成分的安全浓度。在安全浓度范围下,再将细胞分为空白组,模型组,丹酚酸A组,丹酚酸B组,丹参素组及丹参酮Ⅱ_A组,用MTS法检测丹参有效成分对转化生长因子-β_1(TGF-β_1)诱导的A549细胞的增殖抑制作用;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测丹参有效成分对纤连蛋白(FN),I型胶原(COL-Ⅰ)表达的影响。综合以上结果,筛选出抑制作用较好的丹参有效成分,用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测对细胞E-钙粘(E-Cad)蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,丹酚酸A 40μmol·L~(-1),丹酚酸B 160μmol·L~(-1),丹参素160μmol·L~(-1)对A549细胞具有毒性作用(P0.05)。在无毒浓度范围下,与模型组比较,丹酚酸A 10,20μmol·L~(-1),丹酚酸B 80μmol·L~(-1)在培养24 h后对TGF-β_1诱导的肺上皮细胞增殖有抑制作用(P0.05);培养72 h后,丹酚酸A 5,10,20μmol·L~(-1),丹酚酸B 40,80μmol·L~(-1)的抑制作用非常显著(P0.01)。ELISA结果显示,与空白组比较,模型组细胞FN,COL-Ⅰ的表达显著增加(P0.01);与模型组比较,丹酚酸A20μmol·L~(-1),丹酚酸B 40,80μmol·L~(-1)对FN,COL-Ⅰ的表达有明显抑制作用(P0.05);Western blot结果显示,与空白组比较,模型组细胞E-Cad的表达显著降低(P0.01);与模型组比较,丹酚酸A 20μmol·L~(-1),丹酚酸B 80μmol·L~(-1)时,细胞E-Cad的表达显著增加(P0.01)。结论:丹酚酸A,丹酚酸B对TGF-β_1诱导的上皮间质转化具有抑制作用,可能是治疗肺纤维化的有效成分。     

复方苦参注射液抗博来霉素致大鼠肺纤维化药效学研究

目的 探讨复方苦参注射液对博来霉素诱导肺纤维化模型大鼠的影响及相关机制。方法 将120只SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组及复方苦参注射液低、中、高剂量（注射液原液1、2、4 mL·kg^-1）组,每组20只,采用气管内注射博来霉素方法制备肺纤维化大鼠模型,造模24 h后给药组ip复方苦参注射液,第14、28天取材。观察大鼠一般状态、肺系数、肺功能、肺组织病理变化,并采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平,进一步检测肺组织中羟脯氨酸（HYP）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）表达量的变化。结果 大鼠的一般情况观察发现,与假手术组比较,模型组大鼠食量及饮水量均有所下降,精神萎靡,毛色暗淡发黄,同时模型组大鼠出现拱背及口唇、爪甲及尾尖均呈现紫黯现象,部分大鼠出现口鼻出血,呼吸困难现象。给予复方苦参注射液后,肺纤维化模型大鼠的活动和精神状态均有改善作用。与假手术组比较,模型组大鼠体质量明显降低（P<0.01、0.001）,肺系数显著增加（P<0.001）,肺功能指标潮气量下降（P<0.001）,气道阻力升高（P<0.001）,动态肺顺应性降低（P<0.001）,肺组织发生纤维化、炎细胞浸润等明显损伤,血清中TNF-α和IL-1β水平显著升高（P<0.001）,肺组织中HYP水平显著升高（P<0.001）,而SOD活性则显著下降（P<0.001）,MDA水平有增加趋势。与模型组比较,复方苦参注射液低、中剂量组大鼠体质量显著增加（P<0.05、0.001）,大鼠肺系数显著降低（P<0.05、0.001）,潮气量显著上调（P<0.001）,气道阻力显著降低（P<0.01、0.001）,动态肺顺应性显著上调（P<0.01、0.001）,大鼠肺组织纤维化程度明显减轻,血清中TNF-α水平降低（P<0.01、0.001）,肺组织中HYP含量显著降低（P<0.01）,SOD活性则显著升高（P<0.05、0.01、0.001）,MDA有下调趋势,但差异不显著。结论 复方苦参注射液可改善肺纤维化模型大鼠肺功能与肺部形态学病变,降低血清中TNF-α水平,以及下调肺组织中HYP含量与提高SOD活性,减轻炎性反应并增加抗氧化能力,对肺纤维化大鼠产生保护作用。     

诃子、甘草与制草乌合用调控心脏代谢酶CYP2J3减毒机制

目的：基于心脏细胞色素P450(CYP450)系统分别考察诃子、甘草与制草乌及有效成分鞣花酸、甘草苷与乌头碱合用的减毒机制。方法：在体内实验方面,大鼠随机分为空白组,制草乌组（0.25 g·kg-1）,诃子组（0.25 g·kg-1）,甘草组（0.25 g·kg-1）和诃子+甘草+制草乌合用组（0.25 g·kg-1+0.25 g·kg-1+0.25 g·kg-1,以制草乌为标准）,给药8 d后测定大鼠肌酸激酶（CK）与乳酸脱氢酶（LDH）,观察大鼠心脏组织的病理学改变,并选择实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞色素P2J3(CYP2J3) mRNA和蛋白表达水平的变化;在体外实验方面,设空白组、乌头碱组、鞣花酸组、甘草苷组与乌头碱+鞣花酸+甘草苷合用组,利用高内涵分析技术检测其对细胞数目、DNA含量、活性氧（ROS）和线粒体膜电位（MMP）的影响,同时检测CYP2J3 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果：体内实验中,与空白组比较,制草乌组大鼠血清中CK、LDH水平均明显升高（P<0.05,P<0.01...     

西沙诺丽通便和降糖作用的药效学研究

目的:观察西沙诺丽的通便和降糖的药效。方法:ICR小鼠,灌胃给予不同剂量的西沙诺丽冻干粉,观察对正常小鼠小肠运动和对盐酸洛哌丁胺导致便秘模型小鼠首粒排便时间、排便粒数及粪便重量的影响。观察西沙诺丽冻干粉对链脲佐菌素导致小鼠糖尿病模型和对正常大鼠血糖和糖耐量的影响。结果:西沙诺丽能够显著增加正常小鼠小肠推进率,可明显缩短盐酸洛哌丁胺导致便秘模型动物首次排便时间,能够显著增加模型动物排便次数和动物粪便重量。西沙诺丽能够显著降低链脲佐菌素导致糖尿病模型血糖水平,但是对正常大鼠血糖和糖耐量的没有明显影响。结论:西沙诺丽冻干粉具有通便和降糖作用。     

蒙药诃子配伍草乌的减毒增效机制研究进展

诃子与草乌均为传统的常用蒙药,在蒙医药诸多经典著作中均有记载。诃子因在蒙药中使用率最高,而被誉为“蒙药之王”。草乌在蒙药中也有更为悠久的用药历史和广泛的用途。蒙医在临床治疗过程中用草乌必配合诃子,多以诃子汤炮制草乌入丸散剂,或多以配伍药对形式入煎剂。现就蒙药中诃子与草乌的概况及诃子与草乌配伍减毒增效的机制进行综述,为蒙药的毒性研究与用药安全提供理论依据。     

博来霉素不同给药方式致大鼠肺纤维化模型探讨

目的:比较博来霉素(BLM)气管灌注、尾静脉注射及雾化吸入致大鼠肺纤维化模型的优劣,以便筛选出最佳的给药途径。方法:选择SPF级雄性SD大鼠80只,采用体重随机分组法将其分为正常组,单次气管灌注组(10 mg·kg~(-1)),多次气管灌注组(5 mg·kg~(-1)),单次静脉注射组(150 mg·kg~(-1)),多次静脉注射组(50 mg·kg~(-1)),单次雾化吸入模型组(30 min),多次雾化吸入模型组(30 min)。观察给药后7,14,28 d各组大鼠死亡情况及体质量变化。给药后28 d,观察各组大鼠肺系数,取大鼠肺组织制备石蜡切片并进行苏木素-伊红(HE)及马松(Masson)染色,并通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)含量,评价各组大鼠肺泡炎及肺纤维化程度。结果:与正常组比较,气管灌注组的大鼠死亡率在所有药物处理组中最高。大鼠肺系数的测定结果显示,与正常组比较,多次静脉注射组和多次雾化吸入组大鼠的肺系数显著升高(P0.05,P0.01)。雾化造模组较高于其他模型组,多次雾化模型组高于单次雾化模型组。大鼠HE及Masson染色结果提示,气管灌注组、静脉注射组和多次雾化吸入组大鼠肺组织中肺间隔增厚和肺间质纤维化程度较高,其中多次雾化模型组较其他组肺纤维化程度最为明显。ELISA结果发现,与正常组比较,雾化吸入组和气管灌注组大鼠肺组织中HYP和PAI-1含量显著升高(P0.05)。多次雾化吸入组与单次雾化吸入组显著高于其他造模组。结论:多次雾化吸入博来霉素制备肺纤维化模型,造模大鼠的病理损伤和生理指标相对稳定,符合肺纤维化的演变过程,是一种有效的肺纤维化模型制备手段。     

痰热清吸入溶液的药效学评价

目的:明确痰热清吸入溶液的镇咳、祛痰、解热及抗炎作用,为该制剂的进一步研发提供依据与数据支撑。方法:采用小鼠氨水引咳法及气管酚红排泌法分别观察痰热清吸入溶液的镇咳及祛痰作用;通过腹腔注射细菌脂多糖(LPS)建立大鼠发热模型,观察痰热清吸入溶液的解热作用;通过雾化吸入LPS建立大鼠急性肺炎模型,观察痰热清吸入溶液的抗炎作用。结果:痰热清吸入溶液可减少由氨水引发的小鼠咳嗽次数,增加小鼠气管酚红排泌量;降低LPS所致的大鼠体温及其相关调节因子前列腺素E2(PGE2)和环磷酸腺苷(c AMP)的水平;降低LPS所致大鼠急性肺炎支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)计数和中性粒细胞比例(NEUT),降低肺组织中核转录因子-κB(NF-κB)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平。结论:痰热清吸入溶液具有明显的镇咳、祛痰、解热及抗炎作用,值得进一步研发和推广。     

基于液质联用法测定乌头碱类生物碱在大鼠体内药代动力学研究

目的：建立同时测定大鼠血浆样品中乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱含量的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,并用于制草乌给药后,3种成分在大鼠体内的药代动力学研究。方法：以小檗碱为内标,采用Shim-pack Velox SP-C18（100 mm×2.1 mm,2.7 μm）色谱柱,流动相为水-甲醇-乙腈（0.05%甲酸）,流速0.3 mL/min,质谱采用电喷雾离子源（ESI）,正离子模式,选择反应监测（MRM）方式。血浆样品采用有机试剂沉淀蛋白法。结果：乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱成分的线性关系良好（r≥0.999 0）,日内和日间精密度符合生物样品分析要求,相对标准偏差（RSD）均小于15%。结论：此方法灵敏度高、专属性强,适用于测定乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱的浓度以及药代动力学研究。     

香砂平胃颗粒对湿阻中焦证大鼠胃肠功能的影响及机制

目的 探讨香砂平胃颗粒对湿阻中焦证大鼠胃肠功能的影响及机制。方法 将大鼠随机分成对照组、模型组、莫沙必利组（1.35 mg/kg）、洛哌丁胺组（0.36 mg/kg）和香砂平胃颗粒低、中、高剂量（0.9、1.8、3.6 g/kg）组，除对照组外，内湿（定期ig猪油、蜂蜜水）、外湿（游泳、放在潮湿垫料中饲养）结合制备湿阻中焦证动物模型，模型成功后，连续ig给药7 d。观察大鼠一般状态，采用称质量法计算大鼠胃残留率，小肠炭末推进法计算大鼠肠推进率，并利用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中胃动素、胃泌素、生长抑素和P-物质，以及炎性因子肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-10的水平，同时利用实时荧光定量RCR（qRT-PCR）技术检测大鼠结肠水通道蛋白3（AQP3）mRNA转录水平的变化。结果 与对照组比较，模型组大鼠体质量增长明显减缓，摄食量、饮水量均减少，毛色发黄、乏力、呆滞、嗜睡、大便黏腻；给予香砂平胃颗粒治疗7 d后，一般情况有所恢复，摄食量增加，体质量增长加快，大便性状有所好转。与模型组比较，香砂平胃颗粒中、高剂量组大鼠胃排空率显著增加，高剂量组小肠炭墨推进率显著增加（P<0.01、0.001）；中、高剂量组大鼠的胃动素、胃泌素和P-物质水平显著增加（P<0.01、0.001），高剂量组生长抑素水平显著降低（P<0.01）；中、高剂量组血清TNF-α水平显著降低（P<0.01、0.001）；高剂量组大鼠的IL-10水平显著增高（P<0.01）；中、高剂量组大鼠的AQP3mRNA转录水平显著上调（P<0.05、0.001）。结论 香砂平胃颗粒可以改善湿阻中焦证大鼠的胃肠功能，机制可能与增强胃肠运动、增加胃肠激素分泌、抑制湿阻所致的消化道炎症以及促进水分从肠腔的转运相关。     

醒脑静雾化吸入给药的安全性及对干酵母致热模型大鼠的影响

目的 基于醒脑静雾化吸入给药粒径分布，多次雾化吸入给药黏膜过敏及刺激性，观察醒脑静雾化吸入给药的解热作用，为醒脑静临床雾化吸入给药提供依据和基础。方法 采用激光衍射法检测醒脑静雾化产生的粒径；通过连续多次雾化吸入给药观察醒脑静雾化吸入给药对大鼠黏膜刺激性；通过豚鼠全身主动过敏实验考察醒脑静雾化吸入给药过敏反应；采用干酵母致热模型观察醒脑静雾化吸入溶液解热作用。结果 粒径分布结果显示，醒脑静雾化最小粒径为0.117μm, 90%粒径在10μm以下左右，Dv(50)=4.76μm提示醒脑静雾化后能够进入各级支气管及肺。刺激实验结果显示醒脑静雾化给药对大鼠肺灌洗液白细胞及其分类无显著影响，病理结果显示对鼻黏膜、咽喉、气管和肺部无明显影响。过敏结果显示醒脑静雾化吸入给药豚鼠全身主动过敏反应阴性。解热实验结果表明，醒脑静吸入给药能够明显抑制干酵母诱导发热模型大鼠的体温升高，能够降低下丘脑前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)及环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)的含量和血清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis fac...