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1.
Effectsofhammerheadribozyme(RCP)onHBVPgeneinvitroGanLixia(甘立霞),WangPing(王平),ZhuXihua(朱锡华),DongYanlin(董燕麟),HouYunde(侯云德)(Depar... 相似文献
2.
目的评价重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂对恒河猴感染SARS-CoV的预防治疗作用。方法采用鼻腔喷雾法(剂量为60万单位/鼻孔)研究了重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂对感染SARS-CoV的恒河猴预防治疗效果。结果试验组(5只)和对照组(5只)相同时间检测的咽拭子等标本中,Real-time PCR检测和病毒分离均未检出病毒。攻毒后病毒导致机体产生的中和抗体和IgG抗体的反应也较对照组弱。血液学指标检测结果表明试验组动物攻毒后各项指标较试验前比较没有显著性改变;病理结果显示试验组2只恒河猴肺组织形态基本正常,其余3只猴有肺间质性炎,表现肺间隔增厚、单核样细胞为主的炎细胞浸润,其中1只增厚的肺间隔有局灶相互融合,这3只猴肺部病变与对照组的病变表现相似,且病变累及范围较对照组小;其他各受检脏器均未见明显异常。结论重组人干扰素α-2b鼻腔喷雾剂可以有效阻断或减弱SARS-CoV对恒河猴的感染。 相似文献
3.
流感病毒血凝素基因工程抗体的抗病毒实验效果观察 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:对昆虫细胞系统表达纯化的中和性流感病毒血凝素基因工程全抗体IgG-IV-2,IgG-IV-6进行体外和体内抗病毒效果的研究。方法:对比抗体应用前后病毒在MDCK细胞中的病毒滴度和动物模型中粘膜用药前后鼠肺内病毒滴度的改变,验证抗体的粘膜抗感染效果。结果:两株基因工程抗体使4.5log10TCID50滴度的病毒下降1/2的剂量分别为0.8μg和0.5μg;动物模型的粘膜给药表明使4.0log10TCID50的病毒下降1/2所需的抗体剂量IgG-IV-2为0.25mg/kg体重,IgG-IV-6为0.1mg/kg体重,联合应用时为0.08mg/kg体重。结论:获得的基因工程抗体具有体内体外的抗病毒效果,能够中和病毒毒力。 相似文献
4.
5.
我们以前曾报道,表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2gD)的重组痘苗病毒(实验疫苗株)能保护被免疫小鼠抵抗致死量HSV-2病毒的攻击。在此工作基础上,严格按人用疫苗研究要求的实验条件,成功地建立了表达HSV-2gD的重组痘苗病毒活疫苗株。首先将经聚合酶链反应(PCR)修饰的HSV-2gD基因插入痘苗表达质粒pJSB1175,置于痘苗病毒P75K早/晚期启动子控制下。将此重组质粒用Lipofectin方法转染已受野型TK+痘苗病毒天坛761株感染的人胚肺二倍体细胞。经同位素探针(32P-HSV-2gD)原位杂交法和3轮蚀斑纯化,筛选出基因组内整合有HSV-2gD基因的重组痘苗病毒。斑点和Southern杂交证实,HSV-2gD基因已插入痘苗病毒基因组内预期的TK区段,间接免疫荧光检测显示,重组病毒感染细胞后能有效地表达HSV-2gD蛋白。 相似文献
6.
慢性乙型肝炎患者树突状细胞表型的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血来源树突状细胞(Dendritic cell,DC)数量及表型的改变,并对其与肝功能、乙肝病毒复制水平的关系进行研究。方法检测37例慢性乙肝患者和21例健康人肝功能及血清HBV DNA水平,并提取外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)进行体外诱导培养,促使其发育成DC,计数其数量并检测膜表面分子的变化。分析DC数量及表型与肝功能、乙肝病毒复制水平的关系。结果与正常对照组比较,慢性乙肝患者的树突状细胞数量明显减少(P〈0.05),且其膜表面分子CD83、CD86的表达均明显降低(P〈0.05)。在慢性乙肝患者中,DC数量、DC膜表面分子CD83和CD86与血清HBV DNA之间呈负相关关系,而与肝功能之间无明显相关关系。结论慢性乙肝患者体内存在DC数量减少及成熟障碍,这种改变与肝内炎症反应程度不相关,但与乙肝病毒(Hepatitis Bvirus,HBV)的复制水平呈负相关,提示DC参与慢性乙肝患者体内HBV的清除。 相似文献
7.
目的为了进一步探索VGF的生物学功能方法分别构建了痘苗病毒天坛株生长因子(Vacciniagrowthfactor,VGF)基因细胞膜外结构域(VGFsl)的真核及原核表达系统,在相应的细胞中获得了单独表达(真核)和融合表达(原核)。结果初步纯化的VGFsl表达产物能够与上皮生长因子(EGF)的受体结合,并刺激受体中酪氨酸残基发生磷酸化反应。与EGF相比,VGFsl表达产物刺激EGF受体自身磷酸化的能力更强。结论上述结果为VGF在病毒感染过程中的作用以及VGF作为新型多肽类药物的研究提供了有价值的线索。 相似文献
8.
利用缺陷型单纯疱疹病毒载体在大鼠中枢神经系统表达外源基因 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究利用构建的Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)扩增子质粒载体pHSL,在辅助病毒HSV-1tsK(许可温度31℃)的辅助下,以首尾相连的连接体形式被包装成复制缺陷型的HSV-1假病毒颗粒,得到一种HSV-1混合毒种dvHSL。将dvHSL接种体外培养的大鼠胚胎脊髓运动神经元和大脑皮质神经元后均可获得报告基因的表达;接种大鼠角膜后,lacZ基因在三叉神经节中持续表达两个月;直接注射接种到大鼠前脑皮质后,可在注射部位的局部表达报告基因近两个月。研究结果表明上述缺陷型单纯疱疹病毒载体可作为神经系统基因转移的工具,应用于神经系统生理、病理及神经系统疾病基因治疗的实验研究 相似文献
9.
利用基因工程技术构建成功质粒型Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)载体pHSV,其中含有HSV-1包装信号序列和HSV-1复制起点,以及HSV-1IE68启动子。为验证其构建是否成功,在其IE68启动子下游的多克隆位点上插入了E.coliLacZ基因,构建成pHSVL质粒。用HSV-1温度敏感株(tsK株)超感染传代细胞后,将这种质粒转染入该细胞,pHSVL可在辅助病毒HSV-1tsK(允许温度为31℃)存在的条件下被包装成病毒颗粒,由此得到的混合病毒含有HSV-1tsK和pHSVL假病毒颗粒,收获后再感染培养的Vero细胞,原位检测β-半乳糖苷酶活性呈阳性。同时用pHSVL病毒接种体外培养的SD大鼠胚胎脊髓运动神经元,用X-gal原位检测β-半乳糖苷酶的活性,亦发现有阳性的神经元存在。说明载体pHSVL携带的报告基因lacZ在这两种真核细胞中均得以正确表达。报告基因可为其它目的基因所代替,可用于神经生理、病理以及神经系统疾病基因治疗的实验研究。 相似文献
10.
Epstein-Barr病毒载体介导的白细胞介素12在肝癌细胞中的靶向表达 总被引:3,自引:0,他引:3
目的研究白细胞介素-12(Interleukin-12,IL-12)在肝癌细胞靶向性表达,探索肝癌基因治疗新方法。方法将白介素-12分别克隆到带有人甲胎蛋白启动子和增强子的Epstein-Barr(EB)病毒载体中,得到重组表达载体pEBAF/P35和pEBAF/P40,分别在4种细胞系中作共转染,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和Westernblot检测各细胞系中IL-12的表达情况。结果用pEBAF/P35和pEBAF/P40共转染4种细胞后IL-12基因只在产生甲胎蛋白的肝癌细胞(HepG2)中表达,活性检测证明,表达的IL-12有诱使IFN-γ产生的生物学活性。结论本研究在肝癌细胞中靶向性和组织特异性的表达了有活性的IL-12,为既能杀死肝癌细胞,又不影响正常肝细胞功能的新型基因治疗方案做了有益的探索。 相似文献