RP-HPLC法测定转基因贯叶连翘植株中褪黑素

目的 建立测定褪黑素的反相高效液相色谱紫外分析方法，分析并测定通过组培获得的贯叶连翘不同转基因株系及其亲本植株的褪黑素。方法 以Symmetry C18 (150 mm×4.6 mm，5.0 μm)为色谱柱；100 mmol乙酸铵甲醇(80∶20)为流动相，体积流量为0.8 mL/min；检测波长为265.8 nm，灵敏度为2.00 AUFS。结果 褪黑素浓度在20～500 ng/mL线性关系良好(R2=0.999 2)，平均加样回收率为98.09%(n=6)，RSD为2.21%，最小检出量为1.0 ng/mL。褪黑素峰保留时间约为8.8 min。结论 该方法可以简便准确分析不同株系贯叶连翘中的褪黑激素的量；贯叶连翘YXu55(含庆大霉素抗性标记和AANAT-HIOMT基因)转基因株系的褪黑素的量均高于pZP122(仅含庆大霉素抗性标记，不含AANAT-HIOMT基因的空白质粒)转基因株系和未转基因的对照植株；而pZP122转基因株系褪黑素的量跟未转基因的对照植株的量几乎相等。     

Mutagenicity in organic extracts of the dust derived from an aluminum electrolytic plant for Salmonella typhimurium

ＭｕｔａｇｅｎｉｃｉｔｙｉｎｏｒｇａｎｉｃｅｘｔｒａｃｔｓｏｆｔｈｅｄｕｓｔｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍａｎａｌｕｍｉｎｕｍｅｌｅｃｔｒｏｌｙｔｉｃｐｌａｎｔｆｏｒＳａｌｍｏｎｅｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍＷａｎｇＹｕｍｅｉ王毓美，ＪｉａＪｉｎｇｆｅｎ贾敬芬...     

粗茎秦艽组织培养及再生植株

用粉茎秦艽Gentianacrassicaulis子叶和下胚轴为材料。在MS＋2mg／L2，4－D＋0．5mg／LBA的培养基上进行培养，子叶及下胚轴的出愈率为100％。愈伤组织继代培养于MS＋0．5mg／L2，4-D＋0．5mg／LBA＋0．5mg／LNAA＋500mg／LLH＋3倍MS有机物和维生素的培养基上生长旺盛。愈伤组织转入分化培养基MS＋1mg／LNAA＋2mg／LBA＋3mg／LZT＋3mg／LGA＋500mg／LLH＋6％蔗糖＋3倍MS有机物和维生素＋3倍FeSO4（Na2－EDTA）上培养，其中40％形成体细胞胚。体细胞胚在无激素MS培养基上发育成苗。     

评价中药寒热药性的实验方法研究

目的 通过考察寒凉药与温热药对人乳腺癌细胞 MCF-7体外生长增殖的影响来建立评价中药寒热药性的实验方法。方法 用噻唑蓝比色法(MTT法)考察4种寒凉药和5种温热药对人乳腺癌细胞 MCF-7体外生长增殖的影响,倒置显微镜观察寒凉药、温热药对细胞形态特征的影响,台盼蓝染色法分析所选寒凉药和温热药的细胞毒性作用。结果 寒凉药(50～800 μg/mL 黄连、虎杖、竹叶、夏枯草) 抑制 MCF-7生长增殖,随质量浓度增大抑制作用增强。温热药干姜和白胡椒(50～800 μg/mL)促进MCF-7生长增殖,干姜的促进作用随质量浓度增大而增强,白胡椒的促进作用先增大后减小。其余温热药低质量浓度(肉桂与花椒 50～200 μg/mL、仙茅 50～400 μg/mL) 促进 MCF-7 生长增殖,促进作用随质量浓度增大而增强;高质量浓度 (肉桂与花椒 400～800 μg/mL、仙茅 600～800 μg/mL) 抑制 MCF-7生长增殖,抑制作用随质量浓度增大而增强。形态学观察表明寒凉药(黄连、虎杖、竹叶、夏枯草)在所选质量浓度范围内使 MCF-7密度减小,细胞固缩变圆;温热药(干姜、白胡椒、肉桂、仙茅、花椒) 在各自起促进作用的质量浓度范围内使 MCF-7 密度增大,生长旺盛。台盼蓝染色表明各寒凉药与温热药对 MCF-7没有细胞毒性作用。结论 本方法有可能用于中药寒热药性的实验评价。     

RP-HPLC法测定转基因贯叶连翘植株中褪黑素

目的 建立测定褪黑素的反相高效液相色谱紫外分析方法,分析并测定通过组培获得的贯叶连翘不同转基因株系及其亲本植株的褪黑素.方法 以Symmetry C18(150 mm×4.6 mm,5.0 μm)为色谱柱;100 mmol乙酸铵-甲醇(80:20)为流动相,体积流量为0.8 mL/min;检测波长为265.8 nm.灵敏度为2.00 AUFS.结果 褪黑素浓度在20～500 ng/mL线性关系良好(R2=0.999 2),平均加样回收率为98.09%(n=6),RSD为2.21%,最小检出量为1.0 ng/mL褪黑素峰保留时间约为8.8 min.结论 该方法可以简便准确分析不同株系贯叶连翘中的褪黑激素的量;贯叶连翘YXu55(含庆大霉素抗性标记和AANAT-HIOMT基因)转基因株系的褪黑素的量均高于pZP122(仅含庆大霉素抗性标记,不含AANAT-HIOMT基因的空白质粒)转基因株系和未转基因的对照植株;而pZP122转基因株系褪黑素的最跟未转基因的对照植株的量几乎相等.     

铝电解车间粉尘有机提取物及其组分遗传毒性的研究

采用化学分离与体外微核试验，姐妹染色单体交换试验的方法，研究了铝电解车间粉尘有机提取物及其５个组分的遗传毒性。结果表明粉尘有机提取的及其有机酸，多环芳烃，极性化合物可使微核率和ＳＣＥ率显著增高，并有一定的剂量－反应关系。     

产地和植株年龄对苦参干燥根中氧化苦参碱含量的影响

目的 考察不同产地和植株年龄对苦参干燥根中氧化苦参碱含量的影响，为选择合适的大规模人工种植场地、合理的管理及物种保护提供可考的依据。方法 采用HPLC法测定苦参干燥根中氧化苦参碱的含量并采用SPSS9．0及Microsoft Excel软件进行数据统计和分析。结果 从17个省、自治区采集的苦参根样品中氧化苦参碱的含量差异很大(0．494％～4．127％)，其中以黑龙江省采集的样品中氧化苦参碱的平均含量最高(3．493％)。方差分析表明采自北方寒冷干燥的高纬度地区的样品中氧化苦碱的含量明显高于采自南方温暖潮湿的低纬度地区的样品。而且，植株年龄与苦参干燥根中氧化苦参碱含量呈相关。结论 不同产地和植株年龄均会明显影响苦参根中氧化苦参碱的含量；生长在寒冷干燥的高纬度地区的苦参根中氧化苦参碱含量较高。     

用组织芯片研究结直肠腺癌组织中nm23 mRNA,CD44s和CD44v6 的表达意义

目的　研究 nm2 3m RNA,CD44 s和 CD44 v6表达与结直肠腺癌发生、发展及转移的关系 .方法　应用组织芯片技术 ,通过原位杂交和免疫组织化学方法分别检测 40例结直肠腺癌标本和 2 2例正常结直肠组织标本中 nm2 3m RNA,CD44 s和 CD44 v6表达情况 .结果　 nm2 3m RNA在结直肠腺癌组织和正常组织中表达无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,且与结直肠腺癌的分化程度无相关性 (P>0 .0 5 ) ,但与癌细胞的侵润及淋巴结转移呈明显负相关 (r=- 0 .49,P<0 .0 1) .CD44 s在结直肠腺癌组织和正常组织中阳性率分别为 42 %(17/ 40 )和 18. 1%(4 / 2 2 ) ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,而CD44 v6只在结直肠腺癌组织中表达 ,阳性率为 5 5 . 8%(2 2 / 40 ) ,且与结直肠腺癌淋巴结转移和癌侵润呈明显正相关(r=0 .47,P<0 .0 1) .在高、中分化腺癌组织中 ,CD44 v6阳性率分别为 45 .8%(11/ 2 4)和 6 8.7%(11/ 16 ) ,有显著性差异(P<0 .0 5 ) ,但在直肠腺癌组织与结肠腺癌组织间表达无显著性差别 (P>0 .0 5 ) .结论　 CD44 s、CD44 v6在结直肠腺癌组织中过量表达伴随 nm 2 3m RNA表达缺失 ,与结直肠腺癌转移和侵润密切相关 ,联合检测 3种基因能更准确判断结直肠腺癌转移和侵润状态 . CD44 v6表达过量与结直肠腺癌分化程度相关 .     

组织芯片研究CD44s和CD44V6在乳腺癌组织中的表达

目的研究CD44s和CD44V6的表达与乳腺导管癌分化、浸润及转移的关系.方法用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测120例乳腺导管癌标本和20例正常乳腺标本中CD44s和CD44V6表达情况.结果CD44s和CD44V6在乳腺癌组织中表达阳性率分别为46%(55/120)和53%(64/120),在正常乳腺组织中均没有表达;CD44V6在低、中分化腺癌中表达阳性率分别为70%(24/34)和46%(40/86),差异有显著意义,χ2=5.68,P<0.05.CD44s和CD44V6表达与乳腺导管癌淋巴结转移明显相关,P<0.01;而且与癌细胞浸润有关,P<0.01.结论CD44s和CD44V6过量表达与乳腺导管癌转移和浸润密切相关,联合检测CD44s和CD44V6能更准确地判断乳腺导管癌的转移状态.CD44V6表达还与乳腺导管癌的进展程度相关.