针刺对缺血缺氧性脑病神经细胞和神经营养因子的影响

针刺抑制缺血缺氧性脑损伤后的神经元凋亡，促进缺血缺氧性脑损伤后内源性神经干细胞的增殖和各种神经营养因予分泌的机制。     

两种新生儿缺血缺氧性脑病模型建模方法的比较

目的比较两种新生儿缺血缺氧性脑病（HIE）模型建模方法的差异，探讨麻醉和动物缺血缺氧间期对HIE动物模型的影响。方法采用7d龄SD乳鼠建立HIE模型。传统组动物乙醚麻醉后结扎左侧颈总动脉，休息2～3h，同时人37℃水溶闭缺氧箱，持续充以8％氧＋92％氮的混合气体，气流量1L／min，维持2．5h。改进组动物动脉结扎手术前动物不予麻醉，且术后动物不作休息立即进行缺氧。比较建模过程中两组动物的存活情况；光镜下观察建模后3d两组动物左侧大脑半球的病理变化情况，并比较两组动物病理总评分的差异。结果改进组建模过程中所有动物未见死亡，传统组建模过程中6只动物死亡（P〈0．025）。建模后3d，改进组动物脑组织变性、坏死显著，病理总评分550分，传统组大部分动物脑组织未见明显病变，总评分130分（P〈0．01）。结论传统HIE建模方法动物在建模过程中死亡率高，而存活的模型动物病理变化却不确切。改进的HIE建模方法模型动物个体之间均衡性好，脑部病变确切，建模过程中动物死亡率低，值得推广。     

内蒙古凉城县天成乡布鲁杆菌病流行病学调查报告

目的了解乌兰察布市农业区布病流行现状,为制定防治对策提供依据。方法运用描述流行病学方法,使用统一调查方法,通过入户逐一调查,全部抽血检验,病例判定和布鲁氏菌分离培养鉴定均按《布鲁氏菌病诊断标准》(ws269-2007)进行。结果凉城县天成乡全胜店行政村患病率(73/277)26.35%,发病率(56/277)20.22%,新发病占患病比例(56/73)76.71%;养羊户发病多,不养羊户发病少;灌服免疫户不发病,未免疫户发病。获得羊3型布鲁氏杆菌2株。结论凉城县天成乡布病流行极为严重,个别自然村(30/49)61.22%村民患布病,农业区布病正在蔓延。     

针刺颈夹脊穴,TDP照射治疗颈椎骨质增生临床观察

目的；针刺颈夹脊穴，ＴＤＰ照射治疗颈椎骨质增生。方法：以病变椎体旁的夹脊穴，昆仑穴为主。配穴；风寒湿型配风池，风门；气血民膈腧，脾腧；肾虚型配肾腧，肝腧。用ＴＤＰ神灯照射颈项部。结果：５８例中，临床治愈３６例，显效５例，有效７例，无效０例，结论；针刺颈夹脊穴配ＴＤＰ照射可达到镇静止痛，恢复机体功能的效果。     

p53基因启动子转录活性检测细胞模型的建立

[目的]构建p53基因启动子靶控报告基因细胞模型,为高通量筛选出以p53为靶标的中药提供新的细胞模型.[方法]采用瞬时转染报告基因测定法,确定最佳转染方案及p53基因启动子转录活性细胞模型的建立和验证,观察p53抑制剂PFT-a、血清饥饿、过氧化氢、自噬激活剂雷帕霉素对p53基因启动子转录活性PC12细胞模型的量效和时效关系.[结果]PFI-α诱导3h,对p53基因启动子转录活性抑制率达50％左右;血清饥饿诱导12、24、36 h,p53基因启动子转录活性是对照组的1.6倍;过氧化氢300μmol/L诱导9h,p53基因启动子转录活性是对照组的1.3倍;雷帕霉素在浓度为0.1、1 nmol/L可上调p53基因启动子转录活性,呈浓度依赖性,而5 nmol/L及更高浓度可下调p53基因启动子转录活性.[结论]成功建立采用p53基因启动子报告基因检测p53基因启动子转录活性的特异性细胞模型,血清饥饿、过氧化氢、雷帕霉素可诱导p53基因启动子的转录活性.     

小鼠高迁移率族蛋白B1启动子的构建与转录活性检测

【目的】构建小鼠高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1 protein,HMGB1)启动子全长序列的荧光素酶报告基因用于药物筛选。【方法】采用PCR技术扩增小鼠HMGB1基因启动子全长序列,用GV238载体构建报告质粒GV238-HMGB1-P-Luc,以pGL3-basic作为阴性对照质粒,与内参质粒pRL共转染Hela细胞,以内毒素(LPS,0.2μg/mL)作为激活剂,以正丁酸钠(SB,10 mmol/L)作为抑制剂,分组处理24 h后检测荧光素酶活性。【结果】经酶切、PCR及测序鉴定证实克隆的HMGB1基因启动子全长2 140 bp,DNA序列正确无突变。与pGL3-basic组比较,GV238-HMGB1-P-Luc组荧光素酶活性显著增强(P0.05);与GV238-HMGB1-P-Luc组比较,LPS组荧光素酶活性显著增强(P0.01);与LPS组比较,SB组荧光素酶活性显著降低(P0.01)。【结论】HMGB1基因启动子报告基因构建成功,LPS可以增强其表达,SB则可以抑制LPS刺激下的HMGB1启动子表达增强,可为下一步筛选具有调控HMGB1启动子活性的药物奠定基础。     

缺血缺氧新生大鼠脑内原位神经干细胞的增殖与分化：可通过针刺任脉、督脉及膀胱经实现？

[摘要] 目的 检测针刺任脉、督脉及膀胱经对新生儿缺血缺氧性脑病模型鼠脑内神经干细胞的影响,分析针刺诱导神经干细胞增殖、分化的机制,为临床针刺治疗新生儿缺血缺氧性脑病提供新的细胞学理论依据。方法 新生7天SD大鼠结扎左侧颈总动脉并缺氧2小时制作新生鼠缺血缺氧性脑病模型。实验动物共分三组：针刺组、对照组和正常组。针刺组每天针刺任脉、督脉及膀胱经治疗一次。对照组及正常组不作针刺处理。各组动物每天两次腹腔注射Brdu用于标记脑内神经干细胞增殖情况。分别于模型建立后3d、7d、14d和28d取脑组织行抗Brdu的免疫组化染色,并于模型建立后40d行免疫荧光双标,分别观察各组动物海马及皮层Brdu阳性细胞数目、形态、分布以及分化情况; 并比较他们之间的差异。结果 抗Brdu的免疫组化染色显示针刺任脉、督脉及膀胱经治疗第3天及第7天时针刺组动物皮层及海马的Brdu阳性细胞数目和对照组相比,差别无统计学意义;针刺治疗第14天及第28天时针刺组动物皮层及海马的Brdu阳性细胞数目明显比对照组多,差别有统计学意义。针刺后第40天免疫荧光双标显示大部分Brdu阳性细胞和神经元标记物NSE共存,少部分和星形胶质细胞标记物GFAP共存。结论 针刺任脉、督脉及膀胱经能促进HIE模型鼠皮层及海马神经干细胞的增殖潜能;针刺任脉、督脉及膀胱经治疗后新生的神经干细胞大部分分化为神经元,提示针刺后新生的神经细胞有可能有效地补充在缺血缺氧中丧失的神经元,并能促进HIE动物功能的恢复。     

针刺任脉、督脉及膀胱经促进新生儿缺血缺氧性脑病鼠模型脑内神经干细胞增殖

目的检测针刺任脉、督脉及膀胱经对新生儿缺血缺氧性脑病（HIE）鼠模型脑内神经干细胞的影响，分析针刺诱导神经干细胞增殖的机制。方法新生7dSD大鼠结扎左侧颈总动脉并缺氧2h制作HIE鼠模型。动物分为针刺组和对照组。针刺组每天针刺任脉、督脉及膀胱经一次。对照组不作处理。各组动物每天两次腹腔注射BrdU用于标记脑内神经干细胞增殖情况，分别于模型建立后3d、7d、14d和28d取脑组织行抗BrdU的免疫组化染色。分别观察各组动物海马及皮层BrdU阳性细胞数目、形态以及分布情况：并比较他们之间的差异。结果抗BrdU的免疫组化染色显示针刺治疗第3天及第7天时针刺组动物皮层及海马的BrdU阳性细胞数目和对照组相比。差别无统计学意义；针刺治疗第14天及第28天时针刺组动物皮层及海马的BrdU阳性细胞数目明显比对照组多．差别有统计学意义。结论针刺任脉、督脉及膀胱经能促进HIE模型鼠皮层及海马神经干细胞的增殖潜能。     

共聚焦激光扫描显微镜(MRC600)活体观测家兔大脑皮质内微循环的动物模型制作方法及其应用探讨

目的 :用共聚焦激光扫描显微镜活体观测家兔大脑皮质内微血管构筑及其微循环提供更近似于人类的动物模型。方法 :在开放颅窗的家兔动物模型上 ,荧光素标记血浆 ,罗丹明 6G标记WBC ,用共聚焦激光扫描显微镜活体观测正常状态下家兔大脑皮质内微循环 ,并经图像分析系统测量数据 ,用SAS软件包进行统计学分析。结果 :本研究探索用开放颅窗的家兔动物模型进行大脑皮质微循环的研究取得成功 ,作者认为采用开放颅窗的家兔动物模型使观察大脑皮质的深度达 2 5 0～ 30 0 μm ,对大脑皮质内微血管构筑及微循环进行活体观测 ,可进行连续断层扫描 ,或在同一层面进行连续定位扫描监测 ,所摄取图像经监视器及计算机摄入并存盘待分析 ,用图像分析系统进行观测血管口径 ,血流速度 ,血液流态 ,白细胞 ,红细胞运动等微循环指标 ,也可用标准Bio Radthruview软件三维重建 ,观察各种血管形态 ,研究大脑皮质微血管构筑。结论 :开放颅窗的家兔动物模型是更近似于人类的动物模型 ,适合用于脑血管疾病发病机理的研究     

共聚焦激光扫描显微镜(MRC600)活体观测川芎嗪和去甲基肾上腺素对休克状态下家兔大脑皮质内微循环的影响

目的 :共聚焦激光扫描显微镜活体观测川芎嗪和去甲基肾上腺素对休克状态下家兔大脑皮质内微循环的影响。方法 :在开放颅窗的家兔模型上 ,荧光素标记血浆 ,罗丹明 6G标记WBC ,用共聚焦激光扫描显微镜活体观测川芎嗪和去甲基肾上腺素对休克状态下家兔大脑皮质内微循环的影响 ,并经图像分析系统测量数据 ,用SAS软件包进行统计学分析。结果 :①川芎嗪抗休克效果优于去甲基肾上腺素 ;②去甲基肾上腺素在休克状态下对口径为 60 .15 μm的动脉血管处未引起明显的血管运动 ,而川芎嗪能引起血管运动 ,尤以大剂量川芎嗪引起强烈的血管运动 ;③川芎嗪和去甲基肾上腺素增加或保持血液缘流厚度不变 ,可能是两者抗休克机制发挥作用的途径之一 ;④川芎嗪和去甲基肾上腺素引起血管运动 ,尤以中小血管处明显。结论 :川芎嗪抗休克效果优于去甲基肾上腺素。川芎嗪和去甲基肾上腺素增加或保持血液缘流厚度不变 ,可能是两者抗休克机制发挥作用的途径之一