呼吸道感染患者分离奈瑟菌属菌种的生物学与16S rRNA鉴定

目的 了解引起呼吸道感染的常见致病性奈瑟菌属菌种以及从慢性呼吸道感染患者分离的致病性奈瑟菌属的鉴定方法.方法 采集249例不同年龄慢性呼吸道感染患者的痰标本,分别进行革兰染色镜检和接种血琼脂培养基分离培养;分离的奈瑟菌样革兰阴性双球菌,分别进行常规细菌学方法和染色体16S rRNA基因检测鉴定以及药物敏感(K-B法)试验.结果 在184例患者的痰标本内分离出227株.占73.9％,呈明显优势生长甚至惟一生长的革兰阴性双球菌,常规细菌学方法鉴定分别为干燥奈瑟菌、黏液奈瑟菌、微黄奈瑟菌、金黄奈瑟菌、多糖奈瑟菌、嗜乳糖奈瑟菌、脱氨奈瑟菌及灰色奈瑟菌;各菌种通过16S rRNA基因PCR检测和序列测定,发现与常规细菌学方法鉴定的符合率＞64.0％;来自不同患者的各种奈瑟菌对临床常用抗菌药物的敏感性相似,存在许多耐药或多药耐药菌株.结论 人体上呼吸道正常菌群奈瑟菌属的许多菌种,是引起呼吸道感染患者慢性继发性呼吸道感染的常见致病菌,这些菌种的生物学特性及其广泛的耐药性,使其成为影响慢性呼吸道感染的病原学诊断与治疗效果的重要因素,常规细菌学与16S rRNA检测相结合,能够提高呼吸道条件致病性奈瑟菌鉴定的准确率.     

脑出血与脑微出血关系的研究

目的 研究脑出血组及对照组之间微出血发生率的差异,明确微出血是否为脑出血危险因素.方法 选取2011年6月-2013年4月住院的305例急性脑出血（脑出血组）以及与之在一般资料方面相匹配的415例体检者（对照组）进行脑微出血的临床及磁共振影像研究.结果 对照组脑微出血发生率16.6%,脑出血组脑微出血发生率44.6%,脑出血组发生微出血的比例较对照组显著增高（P＜0.05）,脑出血不同部位之间的脑微出血发生率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 脑出血患者脑微出血发生率高,对其进行二级预防具有指导意义.     

饮酒，我为肝脏说句公道话

“酒”,是一种古老而又永远散发着青春气息的饮品,属于酒精性饮料,也有人称之为“天之美禄”。饮酒在我国已成为传统文明和传统艺术的一种表现形式。酒的千秋功过、对社会和人类健康的双重效果,自古就有所评说。如因酒醉后水中捞月,葬身湖底的大诗人李白、     

茅台酒与乙醇影响二乙基亚硝胺引发小鼠肝细胞癌的比较

目的：观察茅台酒与乙醇在协同二乙基亚硝胺（DEN）引发小鼠肝细胞癌（HCC）的差异。方法：74只雄性C57BL／6J小鼠随机分为正常对照组、茅台酒组、乙醇组、DEN组、茅台酒干预组及乙醇干预组,实验35周末检测各组小鼠血清谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）与肝组织匀浆中丙二醛（MDA）水平,观察肝组织病理学变化和HCC相关磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）表达。结果：肝功能检测发现,茅台酒干预组与正常对照组比较,ALT和MDA差异无统计学意义（P〉0．05）,而AST高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;乙醇干预组ALT、AST与ADM高于正常对照组、茅台酒组、乙醇组、DEN组、茅台酒干预组,均P〈0．05;病理组织学检查发现乙醇干预组小鼠肝纤维化程度和GPC3表达明显高于其他各组,P〈0．05。茅台干预组肝脏细胞学检查未见癌前病变及HCC,仅在汇管区有少量PGC3表达。结论：乙醇可以协同DEN诱发小鼠HCC,茅台酒没有这种协同作用。     

细菌壁缺陷对沙门菌代谢特性影响

目的了解细胞壁缺陷沙门菌的代谢特性、某些酶活性及化学构成的特点,探讨细胞壁缺陷对沙门菌代谢的影响及其可能机制.方法定量检测与分析伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌及其经L型变异后形成的细胞突变株(CWDM)和伤寒沙门菌CWDM返祖菌的细胞裂解物中无机离子磷(PO43-)、镁(Mg2+)、钙(Ca2+)、及总蛋白、三酰甘油(TG)、胆固醇(Tch)含量及某些代谢酶的活性,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)检测伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌的细菌型、CWDMs及伤寒沙门菌CWDM返祖菌的乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶同功酶.结果沙门菌CWDMs的PO43-、Mg2+、Ca2+含量明显低于其亲代细菌型和伤寒沙门菌粗糙型返祖菌( P＜0.01).两菌的CWDMs均可检测出Tch和TG,而其亲代细菌型及伤寒沙门菌返祖菌则不能检出Tch和TG.代谢酶活性检测显示两菌的CWDMs乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)的活性明显低于其亲代细菌型或返祖菌(P＜0.01).PAGE检测显示两菌的CWDMs及其亲代细菌型和伤寒沙门菌返祖菌均具有乳酸脱氧酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同功酶活性,细菌型及返祖菌有4种不同泳动速率的LDH同功酶,CWDMs仅显示2种快泳动的LDH同功酶,但缺乏慢泳动的2种LDH同功酶.两菌的细菌型和伤寒沙门菌粗糙型返祖菌经PAGE电泳可见一条漫泳动MDH同功酶带,CWDMs电泳后可见快慢泳动2条MDH同功酶带.分光光度法检测证实,细菌型与粗糙型的MDH活性相似;CWDMs的活性则明显较低.结论细胞壁缺陷可导致沙门菌的多种代谢酶活性及某些离子含量明显降低,具有与其亲代细菌型不相同的乳酸脱氧酶同功酶和苹果酸脱氨酶同功酶谱以发显著的Tch和TG代谢活性.由于沙门菌的细胞壁缺陷突变株在获得外源遗传物质时能够有规律地返祖并恢复与其亲代细菌型相同的各种代谢特性,提示细胞壁缺陷所导致沙门菌的代谢改变极可能与相关基因的的表达被抑制或开放有关.在沙门菌的染色体上可能存在有胆固醇代谢等基因,也可能是由于细胞壁缺陷导致了沙门菌的基因发生重排.     

苗药有柄石韦降血糖有效成分及机制研究

目的:研究有柄石韦水提物降血糖有效成分及其机制。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合高脂高糖饲料复制2型糖尿病大鼠模型;随机分为模型对照组、有柄石韦30、60、120 mg/kg组、异绿原酸B 8 mg/kg组、二甲双胍200 mg/kg组,同时设置正常对照组,每组6只,连续给药4 w,并每7 d监测空腹血糖值(FBG)、体质量、摄食饮水量;检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)的含量,HE染色观察胰腺组织胰岛细胞形态变化及免疫组化(IHC)观察胰岛素变化;采用Real-time PCR法及Western blot法检测各组大鼠肝组织腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1(Ampka1) m RNA及蛋白质表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠体质量显著降低,摄食饮水量显著增加(P<0.01),FBG显著升高(P<0.01),肝组织中Ampkα1 m RNA和蛋白表达明显下调(P<0.05);与模型对照组比较,有柄石韦60、120 mg/kg、异绿原酸B 8 mg/kg组体质量显著增加,摄食饮水量、FBG显著降低(P<0.01),肝组织中Ampkα1 m RNA...     

细胞壁缺陷对白喉棒状杆菌Tox基因影响

目的探讨细胞壁缺陷对白喉棒状杆菌毒力基因及其表达的影响。方法以非高渗分离培养法诱导并获得产毒性白喉棒状杆菌稳定L型纯培养物，提取白喉棒状杆菌稳定L型的染色体DNA，用Tox基因特异性引物进行PCR扩增，并进行序列测定和分析。分别采用对流免疫电泳（CIEP）和十二烷基磺酸钠-不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测白喉棒状杆菌稳定L型可溶性代谢产物中的白喉毒素蛋白质。结果白喉棒状杆菌在氨苄青霉素作用下可发生细胞壁缺陷而成为L型，该稳定L型的传代培养物可仍然保留同其亲代细菌型一致的Tox基因及其核苷酸序列；但在其可溶性代谢产物中并未检测到白喉毒素蛋白质。结论白喉棒状杆菌稳定L型虽然保留了Tox基因但并不能表达白喉毒素蛋白质，提示细胞壁缺陷可影响Tox基因在宿主菌细胞内的表达。     

男性泌尿生殖道感染患者奈瑟菌属菌种的基因检测

目的:检测从男性泌尿生殖道感染患者分离的奈瑟菌属菌种的基因并探讨非淋病奈瑟菌的致病性以及奈瑟菌属菌种感染的实验室诊断方法。方法:用聚合酶链反应及核苷酸序列测定方法,检测男性泌尿生殖道感染患者泌尿生殖道分离的奈瑟菌属菌种的淋病奈瑟菌核酸扩增荧光检测试剂的反应及其染色体上16SrRNA基因、淋病奈瑟菌DNA甲基转移酶基因orf1、隐蔽性质粒基因cppB及外膜蛋白基因nspA。结果:男性泌尿生殖道感染患者泌尿生殖道分离的14株奈瑟菌属菌种经16SrRNA基因检测鉴定为淋病奈瑟菌2株、粘液奈瑟菌3株、灰色奈瑟菌3株、干燥奈瑟菌2株、微黄奈瑟菌2株、嗜乳糖奈瑟菌1株、多糖奈瑟菌1株,其中淋病奈瑟菌核酸扩增荧光检测试剂阳性反应的9株、cppB阳性反应1株、orf1阳性反应5株、nspA阳性反应3株。16SrRNA基因检测与常规细菌学方法鉴定结果比较,两者的符合率85.7%。结论:引起男性泌尿生殖道感染的非淋病奈瑟菌缺乏cppB,大多数菌株缺乏淋病奈瑟菌毒力相关的orf1与nspA并且可在淋病奈瑟菌核酸扩增荧光检测试剂检测中显示阳性反应,从而造成淋病奈瑟菌鉴定与淋病诊断的误诊以及其他奈瑟菌感染的漏诊。在疑似奈瑟菌属菌种感染的实验室检查中联合使用常规细菌学方法与基因检测方法,可有助于提高奈瑟菌属菌种鉴定及其感染诊断的准确率。     

老年2型糖尿病病人糖化血红蛋白与肿瘤标志物的相关性分析

目的分析老年2型糖尿病病人糖化血红蛋白(HbA1c)水平与肿瘤标志物的相关性。方法选取2014年—2016年在我院门诊和病房治疗的213例老年非肿瘤2型糖尿病病人作为研究对象,根据HbA1c值分为6%、6%~8%、8%~10%及10%4组。观察4组HbA1c、铁蛋白(SF)、白蛋白(ALB)、血红蛋白、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)及肿瘤标志物,比较组间水平差异并进行相关性分析。结果随着HbA1c升高,ALB有下降趋势,且SF、肿瘤相关抗原199(CA199)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白(CYFRA21-1)显著升高,差异均有统计学意义(P 0.01)。结论糖尿病人血清肿瘤标志物与健康人群不同,老年糖尿病人CA199、CEA、CYFRA21-1等正常值范围应参考HbA1c水平制定,老年糖尿病人是肿瘤的高发人群,应用肿瘤标志物筛查肿瘤需考虑血糖因素的影响。     

老年慢性心力衰竭住院患者肾功能不全的发生情况及评价方法

目的探讨老年慢性心力衰竭住院患者肾功能不全的发生情况以及评价方法。方法入选2008年—2011年在我院心内科住院治疗的老年慢性心力衰竭患者共135例,根据纽约心脏协会（NYHA）心功能分级分为3组,对照组为心功能Ⅱ/Ⅲ级65例,心功能Ⅳ级组60例,死亡组10例。分别采集血肌酐、尿素氮、尿酸,并根据CKD-EP公式计算肾小球滤过率（GFR）。结果按照血肌酐水平3组肾功能不全发病率分别为对照组12.3%,心功能Ⅳ级组33.3%,死亡组40.0%。按照CKD-EPI公式诊断肾功能不全发生率,对照组24.6%,心功能Ⅳ级组68.3%,死亡组70.0%,各组间肾功能不全的患病率差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。3组间肌酐、尿酸水平差异无统计学意义,尿素氮水平心功能Ⅳ级组和死亡组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.01）。结论在老年心衰患者中应用血肌酐评价肾功能不敏感,CKD-EPI公式是一个较好的方式,且与预后相关。