一种病毒运送培养基的改良及其评价

目前我国临床实验室常用的病毒运送培养基多以商业化产品为主,但其效果未见相应的实验数据.本研究利用流感病毒PR8株、呼吸道合胞病毒Long株作为试验用病毒的代表,根据临床实际应用情况对病毒运送培养基的最适条件进行筛选和评价.     

银翘散体内抑制甲1型流感病毒FM1株复制作用的实验研究

目的：观察中药银翘散体内抑制甲1型流感病毒FM1株复制的作用。方法：以甲1型流感病毒FM1鼠肺适应株滴鼻感染BALB／c小鼠,并用病毒唑及高、中、低剂量银翘散干预相应组别小鼠,观察生存状态及检测肺指数,以苏木素-伊红染色（HE染色）法观察病理改变;将鼠肺悬液以空斑减少试验定量检测感染性病毒滴度,蛋白免疫印迹技术检测核蛋白（nucleoprotein,NP）表达。结果：银翘散可以减轻全身症状,降低肺指数;减少鼠肺病变范围及肺泡腔渗出物;降低鼠肺病毒滴度及鼠肺流感病毒NP表达量。结论：银翘散有体内抑制甲1型流感病毒FM1株复制的作用。     

金刚烷胺与利巴韦林对不同甲型流感病毒株的体外作用敏感性比较

目的评价金刚烷胺和利巴韦林对不同甲型流感病毒株的体外抑制作用,为临床选择抗流感病毒药物提供实验依据。方法分别接种甲型流感病毒标准实验株[H1H1（A/PR/8/34、A/FM1/47）,H3N2（A/Aichi/2/1968）]和临床分离株[H1N1（A/Guangzhou/GIRD02/2009、A/Guangzhou/GIRD166/2009）,H3N2（A/Guangzhou/GIRD18/2009、A/Guangzhou/GIRD26/2009）],于狗肾细胞（MDCK）,采用空斑试验观察金刚烷胺和利巴韦林对甲1和甲3型流感病毒不同实验株和分离株的敏感性。对测试毒株的MP基因进行序列测定和分析,了解金刚烷胺的药物敏感性。结果金刚烷胺在MDCK细胞的半数毒性浓度（TC50）为335μg/ml,对部分甲型流感病毒标准实验株[A/FM1/47（H1N1）、A/Aichi/2/1968（H3N2）]及临床分离株[A/Guangzhou/GIRD02/2009（H1N1）]有抑制作用（半数有效浓度IC50分别为14.9、20.1、16.8μg/ml）。利巴韦林的TC50为2.05mg/ml,对测试的所有毒株均有抑制作用（IC50为6.8～37μg/ml）。金刚烷胺耐药毒株均为单位点突变（第31位的丝氨酸S置换为天冬酰胺N,S31N）。结论甲型流感病毒对金刚烷胺较易出现耐药,而利巴韦林体外对金刚烷胺敏感株和耐药株均有显著的抑制作用,临床抗流感病毒治疗时可考虑应用。     

白藜芦醇对常见肠道病毒抑制作用的实验研究

目的:观察白藜芦醇体外对多种肠道病毒的抑制药效,为进一步探讨其抗肠道病毒谱提供依据。方法:采用细胞病变抑制法（Cytopathic effect inhibition Assay,CPE）和四甲基偶氮唑蓝（MTT）法,通过计算病毒抑制率、药物半数有效浓度(IC50)及选择指数（selection index,SI）,研究白藜芦醇体外对抗多种肠道病毒的作用效果。结果:肠道病毒属（EV）11、EV71、EV84、柯萨奇病毒（COX）B3和COX A10等5种病毒的TCID50分别为:2.13×10-4,1×10-4,2.13×10-6,1×10-5及4.67×10-4。白藜芦醇在Vero E6细胞的半数毒性浓度TC50为50μg/mL。白藜芦醇最大无毒浓度为25μg/mL,以此为抗病毒活性检测的起始浓度。在最大无毒浓度下,白藜芦醇与阳性对照药对5种肠道病毒均有抑制作用。除EV84病毒外,白藜芦醇的抑制率均高于阳性药物利巴韦林。结论:白藜芦醇体外具有抗多种肠道病毒作用,对于病毒性肠道传染病防治具有一定应用前景。     

板蓝根抗甲1型流感病毒活性物质的初筛研究

[目的]观察不同提取工艺及方法制备的板蓝根样品的抗流感病毒作用,以筛选板蓝根中抗流感病毒的有效成分及活性物质.[方法]于狗肾细胞(MDCK)上接种人甲1型流感病毒PR8株(A/PR/8/34,H1N1),采用细胞病变抑制法(CPE法),在不同试验策略下(保护、治疗模式)评价不同提取工艺及方法制备的板蓝根样品的体外抗流感...     

广州地区2009年乙型流感病毒血凝素基因特征分析

根据抗原性和基因特异性的差异,乙型流感病毒可分为B/Victoria/2/87系(Victoria系)和B/Yamagata/16/88系(Yamagata系)[1].血凝素(HA)基因与该病毒的进化趋势相关[2],HA的抗原变异主要发生在HA1区域[3],该区域4个主要的抗原表位[120-loop(HA1 116-137)、150-loop(HA1141-150)、160-loop(HA1 162～167)和190-helix(HA1194-202)]如发生变化,往往引起变异相关病毒株进化方向的改变[4].为了解2009年乙型流感病毒进化情况,本研究分析了HA1基因特点.     

冷氧等离子体杀灭甲型H1N1流感病毒的实验研究

目的 在自行设计的等离子体反应装置中,模拟冷氧等离子体对甲型H1N1流感病毒气溶胶的杀灭作用.方法 以甲型H1N1流感病毒PR8株和2009年季节性甲型H1N1流感病毒临床分离株作为指示病毒株,将流感病毒悬液雾化成气溶胶状态(约3.5μm),通过装置有冷氧等离子发生器和普通紫外灯管(8W)的自制管道,分别作用30 min,在管道上、下方的出口收集病毒气溶胶于基础培养基(MEM)培养液中;以空斑形成法检测收集的流感病毒滴度.结果 无任何干预条件下,流感病毒悬液雾化经过管道后,PR8株平均存活率为23.0％,病毒滴度下降0.64 logPFU,临床分离株平均存活率为35.7％,病毒滴度下降0.44 logPFU;PR8株气溶胶颗粒经冷氧等离子和普通紫外灯作用后,平均病毒滴度分别下降2.19、5.83 logPFU,相对杀灭率为99.35％、100.00％;临床分离株气溶胶颗粒经冷氧等离子和普通紫外灯作用后,平均病毒滴度分别下降2.15、1.95 logPFU,相对杀灭率为99.3％、98.9％.结论 冷氧等离子对于受测的甲型H1N1流感病毒气溶胶,均显示了较好的杀灭作用,与普通紫外灯效果基本类似.     

2009年广州地区季节性甲型流感病毒对烷胺类药物耐药性分析

目的 分析2009年1-10月份广州地区季节性甲型流感病毒对烷胺类药物的耐药情况,为临床预防和治疗季节性甲型流感提供参考依据.方法 选取2009年1-10月份广州地区6家医院分离的季节性甲型流感病毒株311株,其中H1亚型159株,H3亚型152株.对病毒的毒株基质蛋白(MP)基因进行序列测定,利用数据库和软件进行生物信息分析,并测定软件随机抽取的临床分离的H1和H3病毒株(各10株)对金刚烷胺的药物敏感度,分析广州地区2009年1-10月份季节性甲型流感病毒的耐药性和基因重组情况.结果 159株H1亚型流感病毒中148株对金刚烷胺耐药(93.1%);152株H3型流感病毒均对金刚烷胺耐药(100%);除1株H1亚型流感病毒发生V27A/S31N双重位点突变外,其余均为S31N单位点突变;159株H1亚型流感病毒中MP基因B型(人类)97株,F型(欧洲/澳洲鸟类)62株;152株H3亚型病毒的MP基因均为B型.结论 广州地区季节性甲型流感病毒对烷胺类药物的耐药比例高,且H1亚型流感病毒与欧洲/澳洲鸟类流感病毒可能存在MP基因交换.

Abstract：

Objective To study the prevalence of adamantane-resistance among influenza A viruses isolated from Guangzhou between January and October in 2009, and to provide more information for clinical usage of adamantine drugs. Methods Totally 311 influenza A strains isolated from 6 hospitals in Guangzhou between January and October in 2009 were selected, and the MP gene of all 311 strains ( 159 strains of H1subtype, 152 strains of H3 subtype ) was sequenced. The susceptibility of viruses to rimantadine was assayedby biological methods in cells. Result A hundred and forty-eight strains of influenza A ( H1 ) viruses( 93. 1%, 148/159 ) were resistant to the adamantanes, and all the 152 influenza A ( H3 ) viruses were resistant to the adamantanes. An amino acid substitution S31N was found in most of the strains except 1strain with double mutation V27A/S31N. Furthermore, the M gene of influenza A ( H1 ) viruses was divided into genotype B ( human ) ( 97/159 ) and genotype F ( European and Australian birds, 62/159 ), while the M gene of influenza A ( H3 ) viruses was genotype B ( human ) ( 152/152 ). Conclusion Resistance rate of seasonal influenza A viruses isolated from Guangzhou was high. The MP gene of influenza A ( H1 ) may be replaced by a gene from European and Australian birds through a reassortment event.     

广州地区2009年乙型流感病毒血凝素基因特征分析

根据抗原性和基因特异性的差异,乙型流感病毒可分为B/Victoria/2/87系(Victoria系)和B/Yamagata/16/88系(Yamagata系)[1].血凝素(HA)基因与该病毒的进化趋势相关[2],HA的抗原变异主要发生在HA1区域[3],该区域4个主要的抗原表位[120-loop(HA1 116-137)、150-loop(HA1141-150)、160-loop(HA1 162～167)和190-helix(HA1194-202)]如发生变化,往往引起变异相关病毒株进化方向的改变[4].为了解2009年乙型流感病毒进化情况,本研究分析了HA1基因特点.     

广州地区2009年乙型流感病毒血凝素基因特征分析

根据抗原性和基因特异性的差异,乙型流感病毒可分为B/Victoria/2/87系(Victoria系)和B/Yamagata/16/88系(Yamagata系)[1].血凝素(HA)基因与该病毒的进化趋势相关[2],HA的抗原变异主要发生在HA1区域[3],该区域4个主要的抗原表位[120-loop(HA1 116-137)、150-loop(HA1141-150)、160-loop(HA1 162～167)和190-helix(HA1194-202)]如发生变化,往往引起变异相关病毒株进化方向的改变[4].为了解2009年乙型流感病毒进化情况,本研究分析了HA1基因特点.