5-脂氧合酶激活蛋白抑制剂MK886对人食管癌细胞系增殖和凋亡的影响

目的 5-脂氧合酶活化蛋白（FLAP）抑制剂MK886对人食管癌细胞系（KYSE-150和TE-3）增殖和凋亡的影响及作用机制。方法用2.5、5、10、20、40和80μmol/L的MK886干预体外培养的KYSE-150和TE-3细胞;xCELLigence RTCA系统实时测定细胞增殖抑制率,同时确定半数抑制浓度(IC₅₀)。流式细胞测量术检测食管癌细胞的细胞周期。Western blot检测细胞凋亡和自噬相关蛋白的表达。结果人食管癌细胞系（KYSE-150和TE-3）的增殖抑制率随着MK886浓度增加而增强（P<0.05）,KYSE-150组的IC₅₀浓度为29.11μmol/L,TE-3组的IC₅₀浓度为27.47μmol/L。当MK886浓度增加至25μmol/L时,食管癌细胞G₀/G₁期滞后增加明显（P<0.001）,MK886处理浓度增加到50μmol/L时,食管癌细胞G₂/M期增加明显（P<0.001和P<0.05）...     

不同剂量瑞舒伐他汀钙治疗冠状动脉慢血流的临床效果研究

目的评价瑞舒伐他汀钙对冠状动脉慢血流(coronary slow flow,CSF)的治疗效果及其与剂量的关系。方法选取2010年1月—2013年1月我院经冠状动脉造影确诊为CSF患者90例,随机分为高剂量瑞舒伐他汀钙组(高剂量组)、低剂量瑞舒伐他汀钙组(低剂量组)及对照组各30例,前两组在常规治疗基础上分别给予瑞舒伐他汀钙20 mg/d、10 mg/d,对照组仅予基础治疗。治疗4周后,采用心肌梗死溶栓血流帧数平均值(M-TFC)比较治疗前后各组冠状动脉血流速度;根据心绞痛发作次数改善情况,评价各组心绞痛治疗总有效率。结果治疗4周后,3组M-TFC较治疗前均明显下降,且治疗后高剂量组、低剂量组M-TFC均低于对照组,高剂量组M-TFC低于低剂量组,差异均有统计学意义(P0.01);高剂量组、低剂量组心绞痛改善总有效率均明显高于对照组(χ2=6.2388,P=0.0125;χ2=4.8000,P=0.0285),而高剂量组与低剂量组心绞痛改善总有效率比较差异无统计学意义(χ2=0.0113,P=0.7386)。结论在常规扩血管药物治疗基础上联用瑞舒伐他汀钙,可有效改善CSF患者冠状动脉血流速度,明显提高心绞痛治疗有效率,且瑞舒伐他汀钙20 mg/d强化治疗更有效。     

神经电生理技术在糖尿病周围神经病诊断中的联合应用

目的探讨联合神经电生理技术在糖尿病周围神经病（DPN）中诊断的应用价值。 方法对85例确诊糖尿病患者分别进行定量温度觉阈值（QTT）、交感皮肤反应（SSR）及神经传导速度（NCV）检测,其中QTT检测指标包括冷觉阈值（CST）、热觉阈值（WST）、冷痛觉阈值（CPT）和热痛觉阈值（HPT）。待各项神经电生理检查结束后,对其结果进行统计学分析。 结果入选糖尿病患者QTT、SSR及NCV异常率分别为84.71%、56.47%和31.76%,经统计学比较,发现入选患者QTT异常率显著高于SSR及NCV异常率（均P<0.05）。无DPN症状组和有DPN症状组其QTT异常率（分别为78.85%和93.94%）组间差异无统计学意义（P>0.05）,SSR异常率（分别为48.08%和69.70%）、NCV异常率（分别为19.23%和51.52%）组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。短病程组和长病程组QTT异常率（分别为77.77%和89.80%）组间差异无统计学意义（P>0.05）,SSR异常率（分别为44.44%和65.31%）、NCV异常率（分别为19.44%和40.82%）组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。 结论与SSR及NCV检测比较,QTT检测糖尿病患者的异常率最高,其异常率结果与患者临床症状及病程无明显相关性,SSR及NCV异常率与临床症状、病程均具有相关性;联合采用QTT、SSR及NCV检测DPN具有更高的敏感性。     

逍遥散对抗慢性应激状态下大鼠海马神经细胞N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NR)各亚基mRNA表达的影响

目的 :观察逍遥散对抗慢性应激状态下大鼠海马神经元代细胞内N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NR)各亚基m RNA表达的影响。方法:用Taqman荧光定量PCR法测定2-△△Ct相对定量法计算NR各亚基表达量相对值。结果:慢性应激微环境导致海马神经元代细胞内NR的各亚基m RNA表达有不同程度的改变;在拟慢性应激作用前对细胞进行对应血清处理,逍遥散含药血清使NR2Am RNA表达水平明显上调,NR2B m RNA、NR1m RNA表达水平亦上调,作用明显但未达到正常水平。结论:逍遥散治疗血清能改变NR的各亚基m RNA表达,从而达到保护神经元并对抗慢性应激损伤起到一定的作用。     

逍遥散对慢性应激大鼠海马区Npas2基因表达的影响及其DNA甲基化修饰机制研究

目的采用逍遥散干预慢性应激损伤模型大鼠,观察其海马区神经PAS域蛋白2(neuronal PASdomain protein 2,Npas2)基因的表达及其DNA特定区域甲基化的修饰情况。方法将90只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、慢性应激模型组和逍遥散治疗组,共3组,每组30只。造模采用Cart多相慢性应激大鼠模型并加以改进,逍遥散治疗组在造模同时每天给予逍遥散2 m L,连续造模21 d。采用RT-PCR一步法及免疫组织化学染色法测定各组大鼠海马区Npas2基因及其蛋白表达情况,基因甲基化检测采用SequenomMass ARRAY法。结果慢性应激损伤大鼠海马Npas2m RNA及其相应蛋白表达有明显变化,与空白对照组和逍遥散治疗组比较差异均有统计学意义,但其m RNA及相应蛋白表达变化趋势不一致,其基因某些特定区域的甲基化程度有升高的趋势(个别位点有统计学差异)。逍遥散治疗能够明显逆转慢性应激引起的Npas2m RNA及其相应蛋白的表达变化,相应区域DNA甲基化程度表现出下调趋势(个别位点有统计学差异)。结论 Npas2基因参与了慢性应激损伤过程,其表达变化可能与其基因某些特定位点的甲基化修饰变化有关,逍遥散能够逆转这种表达改变,可能是通过调节Npas2基因特定位点的甲基化程度发挥作用。     

不同强度电针治疗对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马CA1区β淀粉样蛋白1-40表达的影响

目的观测不同强度电针治疗对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马CA1区β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)表达的影响,寻求最佳电针治疗强度。方法共纳入60只雄性SPF级SD大鼠,采用随机数字表法随机选取8只大鼠为假手术组,其余大鼠采用改良的四血管阻断(4-VO)法复制VD模型,将造模成功的大鼠(24只)按随机数字表法完全随机分为模型组、1 m A电针组(频率2/15 Hz,强度1 m A,留针时间20 min)、3 m A电针组(频率2/15 Hz,强度3 m A,留针时间20 min),每组8只。电针组针刺"百会"、"大椎"穴,1次/d,连续治疗10 d,休息2 d为1个疗程。2个疗程后,采用Morris水迷宫试验检测各组大鼠学习记忆能力,运用荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠海马CA1区Aβ1-40 m RNA表达水平。结果假手术组、模型组、1 m A电针组、3 m A电针组大鼠Morris水迷宫试验第2~5天平均逃避潜伏期分别为(46.8±1.9)、(40.6±2.3)、(24.6±1.5)、(19.4±1.2)s;(56.3±3.5)、(51.2±2.6)、(45.9±2.1)、(40.8±1.4)s;(52.7±1.5)、(46.0±2.3)、(31.3±1.2)、(27.7±1.6)s;(50.8±3.9)、(41.5±2.1)、(29.0±1.1)、(25.6±1.3)s;首次跨越原平台时间分别为(23.3±1.6)、(53.9±1.3)、(30.2±1.4)、(28.1±0.8)s,120 s内跨越原平台次数分别为(9.4±0.9)、(2.6±0.5)、(6.4±0.7)、(7.2±0.9)次;CA1区中Aβ1-40 mRNA表达水平分别为(17.3±1.1)、(40.7±1.1)、(24.0±1.7)、(22.4±1.8),组间差异均有统计学意义(F值分别为195.88、861.605、103.876、380.609,均P0.01);1 m A、3 m A电针组大鼠平均逃避潜伏期、首次跨越原平台时间较模型组明显缩短,120 s内跨越原平台次数较模型组明显增加,CA1区中Aβ1-40 mRNA表达水平较模型组明显降低,且3 m A电针组均明显优于1 m A电针组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论电针治疗可改善VD大鼠学习记忆能力并降低海马CA1区Aβ1-4 0 mRNA表达水平,3 m A电针效果优于1 m A电针。     

社区居民就诊现状及不合理原因分析

通过对社区居民就诊的文献研究，了解国内外社区居民就诊现状，以及社区卫生服务发展的基本状况，分析我国社区居民就诊不合理的原因，并总结促进社区卫生服务机构发展的对策与建议，旨在合理分流大医院患者，缓解大医院压力，为有效利用社区医疗资源提供理论支持，为制定相关政策提供参考依据。     

骨髓基质细胞移植改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能

目的探究骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)移植治疗对APP/PS转基因的阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠认知功能障碍的改善作用。方法分离培养C57BL/6小鼠的BMSCs,诱导其分化为神经细胞,通过相差显微镜技术和免疫细胞化学荧光染色技术鉴定其表型与分化。通过显微注射技术,将绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,eGFP)转基因小鼠(生后3个月)来源的BMSCs注入APP/PS转基因小鼠(生后12个月)侧脑室内后,以荧光显微镜技术检测移植细胞的存活和整合情况,HE染色检测AD模型小鼠海马区萎缩的恢复程度并以Morris水迷宫试验与旷场试验检测移植治疗后小鼠认知功能障碍的改善情况。结果分离自C57BL/6小鼠的BMSCs在增殖培养基中贴壁生长,形态呈纺锤形,免疫表型CD271+/CD45-++,经神经分化诱导培养可形成β-tubulin-III神经元和GFAP星形胶质细胞。GFP转基因小鼠来源的BMSCs移植入APP/PS1转基因小鼠脑内可存活并与宿主海马区神经组织有效整合。移植治疗3周后宿主小鼠海马区面积显著增加(<0.001),水迷宫实验逃生潜伏期明显缩短(<0.01),旷场试验评分显著提高(<0.05)。结论骨髓基质细胞移植治疗可有效改善APP/PS1转基因的AD模型小鼠的认知功能障碍。     

丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2的表达与大鼠肝功能衰老的关系

目的：观察促凋亡蛋白丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2在衰老大鼠心、肾、肝、肺和脾中的表达情况,研究大鼠肝中Omi/HtrA2的表达与肝功能衰老程度的相关性。方法选用3月龄、9月龄和22月龄雄性SD大鼠;多普勒超声方法检测动物心功能;血清生化方法检测动物的肝功能;免疫组化方法比较Omi/HtrA2在心、肝、肺、肾、脾中的表达情况;Western免疫印迹方法检测动物肝中Omi/HtrA2表达情况。结果（1）在心、肾、肝和肺中,Omi/HtrA2表达量都很高,且蛋白的表达位置有一定的细胞特异性;与壮年组相比,衰老组大鼠的肝中Omi/HtrA2的表达量显著下降（P＜0.05）,而在心、肾、肺组织中Omi/HtrA2的表达量也有下降的趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）与壮年组相比,衰老组动物肝功能指标：天冬氨酸氨基转移酶（AST）、血清铁（SI）、白蛋白（ALB）、白蛋白与球蛋白比值（A/G）都发生显著改变（P＜0.05）;衰老组动物的心功能指标：左室短轴缩短率（FS）和左室射血分数（LVEF）都有下降趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）;（3）与壮年组相比,中年组和衰老组大鼠的肝中Omi/HtrA2的表达量显著下降（ P＜0.05）,随着年龄增加肝功能逐渐降低,Omi/HtrA2的表达量与ALB和A/G呈显著正相关（P＜0.05）。结论大鼠肝中Omi/HtrA2的表达量与肝功能呈正相关。     

七氟醚吸入镇静辅助儿童口腔治疗

目的 评价口腔门诊采用七氟醚吸入镇静镇痛技术辅助儿童口腔治疗的临床应用效果.方法 对广州市妇女儿童医疗中心口腔科收治的患有口腔疾病的不配合儿童170 例采用七氟醚吸入镇静镇痛技术辅助口腔治疗,随访并记录,资料统计分析.结果 170 例患儿镇静后均顺利完成手术,术中无挣扎、哭闹,血压、心率及呼吸指标均在正常范围,无严重缺氧、误吸、呕吐等并发症发生.患儿口腔治疗时间为15 ～ 60 min,术后5 ～ 10 min 苏醒.苏醒期58 例（34.12%）患儿发生烦躁哭闹;术后1 例患儿发生呕吐,立即置头部于低、侧位,及时吸清口内呕吐物及呼吸道分泌物,患儿恢复良好;2 例患儿手术当晚出现低热症状,给予物理降温并口服抗生素后好转.170 例患儿术后随访均无异常.结论 口腔门诊采用七氟醚吸入镇静镇痛技术辅助不配合儿童口腔治疗安全、不良反应少、临床效果显著.