Survivin和FLIP在骨巨细胞瘤组织中的表达及其临床意义

目的研究Survivin和FLIP（FLICE—inhibitory proteins即Fas相关死亡域样白介素1-β转化酶抑制蛋白）在骨巨细胞瘤（GCT）中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化技术检测Survivin和FLIP在22例骨巨细胞瘤、13例骨肉瘤和8例正常骨组织中的表达，并分析其与Iaffe病理分级、x线分型、临床分型、综合分期之间的相关性。结果Survivin和FLIP在骨巨细胞瘤中的表达均明显高于正常骨组织（P〈0．01）。而与骨肉瘤组无显著性差异（P〉0．05）；骨巨细胞瘤Jaffe病理分级中Survivin和FLIP的表达在I级和Ⅱ级之间无显著性差异（P〉0．05），但均显著低于Ⅲ级（P〈0．05）。在x线分型、临床分型、综合分期之间无显著性差异（P〉0．05）。结论Survivin和FLIP在骨巨细胞瘤的发生发展中可能起重要的作用，其检测为判断骨巨细胞瘤的生物学行为、复发、预后，决定治疗方案，开拓新的治疗方法提供了理论依据。     

K7M2细胞转染Runx2基因后对MC3T3细胞RANKL基因表达的影响

目的探讨转染Runx2基因后对RANKL及相关细胞因子的影响。方法将鼠骨肉瘤K7M2细胞分成3组，K7M2组，K7M2-neo组和K7M2-Runx2组，应用Westemblot方法检测转染是否成功，选择转染成功的细胞连同K7M2组，K7M2-neo组细胞，应用ELISA方法检测培养上清液中的IL-1α，IL-6，IL-11和PGE2的含量变化，并应用RT-PCR的方法检测应用K7M2组，K7M2-neo组和K7M2-Runx2组以及在K7M2-Runx2组细胞中加入IL-6抗体后的培养液来培养的MC3T3细胞RANKL基因表达的变化，并应用Westem blot方法检测K7M2细胞IL-6R蛋白的表达变化。结果转染Runx2基因后可以有效提高Runx2蛋白的表达，培养的上清液中的IL-6含量明显提高，应用K7M2-Runx2组细胞培液培养MC3T3细胞可以提高其RANKL基因表达，在K7M2-Runx2组细胞培液中加入IL-6抗体后则不会提高MC3T3细胞的RANKL基因表达。结论Runx2基因可以提高MC3T3细胞RANKL基因的表达，这种基因表达的提高是通过IL-6因子来介导的。     

VEGF特异siRNA对骨肉瘤细胞凋亡和仿血管发生的影响

目的：探讨VEGF特异siRNA在骨肉瘤细胞株（MG63）增殖、凋亡以及仿血管发生中的作用。方法：以pSilienc-er载体构建VEGF特异siRNA质粒pSilencer-VEGF siRNA,并转染骨肉瘤细胞MG63;将细胞分为pSilencer-VEGF siRNA质粒组（试验组）和空siRNA质粒组（对照组）,Western blotting在蛋白水平检测转染重组质粒后MG63细胞VEGF表达情况;MTT比色法、光镜、流式细胞仪结合Annexin V-FITC/PI染色和H-E染色观察质粒转染后骨肉瘤细胞增殖、凋亡和仿血管发生情况。结果：测序证实成功构建了针对VEGF的siRNA重组质粒。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒后的试验组培养液中及骨肉瘤细胞内VEGF蛋白表达下降;转染后48、72、96h骨肉瘤细胞的增殖抑制率分别为41.67%、43.92%、35.32%,并发生了早期凋亡,凋亡率为28.27%。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒的骨肉瘤细胞未见仿血管发生,转染空质粒的对照组骨肉瘤细胞则有仿血管发生。结论：RNA干扰VEGF基因能抑制骨肉瘤细胞增殖,促进骨肉瘤细胞早期凋亡,干扰骨肉瘤细胞仿血管发生,为临床基因治疗骨肉瘤提供了新的思路。     

氨磷汀在骨肉瘤大剂量联合化疗中的骨髓保护作用

目的探讨氨磷汀在骨肉瘤大剂量多药联合化疗中使用对血液学毒性的影响。方法 42例骨肉瘤患者随机分为化疗加氨磷汀组(观察组)及单纯化疗组(对照组),各21例。行MTX-MTX-DDP-ADM化疗,比较化疗后血液学毒性的发生情况。结果第3周期化疗后观察组Ⅳ°粒细胞减少为28.6%,对照组为66.7%,两组比较有显著性差异(P<0.05)。第4周期化疗后观察组Ⅳ°白细胞减少为33.3%,对照组为81.0%;观察组Ⅳ°粒细胞减少为33.3%,对照组为81.0%,两组比较均有显著性差异(P<0.01)。比较两组患者输红细胞的均次数,观察组明显低于对照组(P<0.01)。结论氨磷汀在骨肉瘤大剂量联合化疗中使用后可以明显减少化疗后发生Ⅳ°白细胞及粒细胞减少的发生率,降低输红细胞的均次数。对生存率无明显影响,安全性好。     

靶向CXCR4特异性造影剂在骨肉瘤成像中的应用

目的：对骨肉瘤中趋化因子受体4（chemokine receptor 4,CXCR4）的表达进行非损伤性评价,探讨CXCR4特异性造影刺在骨肉瘤成像及早期诊断中的作用。方法：采用化学合成的方法得到了带有CXCR4特异性造影剂的l条肽段,通过近红外染料标记,进行骨肉瘤细胞SOSP-9607的体外结合试验;皮下接种裸鼠．构建骨肉瘤的异体移植模型,7d后对裸鼠进行体内光学成像,并用免疫组织化学法检测发光团组织中CXCR4的表达。结果：体外细胞结合试验证明合成的近红外造影剂能够很好的与人的骨肉瘤细胞SOSP-9607相结合。近红外光学成像表明。靶向CXCR4的特异性造影剂可用于小动物骨肉瘤的早期和晚期显影。免疫组化染色显示．发光团组织中CXCR4表达呈阳性。结论：趋化因子受体CXCR4靶标特异性分子造影剂,可用于早期和晚期骨肉瘤的显影,对骨肉瘤的诊断及其预后意义重大。