Role of site-directed mutagenesis and adjuvants in the stability and potency of anthrax protective antigen

Anthrax is a zoonotic infection caused by the gram-positive, aerobic, spore-forming bacterium Bacillus anthracis. Depending on the origin of the infection, serious health problems or mortality is possible. The virulence of B. anthracis is reliant on three pathogenic factors, which are secreted upon infection: protective antigen (PA), lethal factor (LF), and edema factor (EF). Systemic illness results from LF and EF entering cells through the formation of a complex with the heptameric form of PA, bound to the membrane of infected cells through its receptor. The currently available anthrax vaccines have multiple drawbacks, and recombinant PA is considered a promising second-generation vaccine candidate. However, the inherent chemical instability of PA through Asn deamidation at multiple sites prevents its use after long-term storage owing to loss of potency. Moreover, there is a distinct possibility of B. anthracis being used as a bioweapon; thus, the developed vaccine should remain efficacious and stable over the long-term. Second-generation anthrax vaccines with appropriate adjuvant formulations for enhanced immunogenicity and safety are desired. In this article, using protein engineering approaches, we have reviewed the stabilization of anthrax vaccine candidates that are currently licensed or under preclinical and clinical trials. We have also proposed a formulation to enhance recombinant PA vaccine potency via adjuvant formulation.     

健脾益肝方对非酒精性脂肪性肝病患者脂肪分布及脂代谢的影响

目的:探讨健脾益肝方对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者脂肪分布及脂代谢的影响。方法:将80例NAFLD患者随机分为对照组和治疗组各40例。两组患者均在多学科联合管理下给予个体化的饮食、运动等生活方式指导,治疗组患者在此基础上加用健脾益肝方,疗程均为3个月。通过生物电阻抗技术测量患者治疗前后脂肪质量及分布,定期监测肝肾功能、血脂指标。比较两组患者肥胖、脂肪分布、血脂指标变化。结果:治疗组患者有效率为97.5%,明显高于对照组的82.5%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组患者BMI、BFP、WHR、TC、TG及LDL-C水平明显低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);治疗组患者躯干及内脏脂肪沉积改善明显优于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:生活方式干预联合健脾益肝方治疗NAFLD患者能显著改善患者的肥胖及脂代谢紊乱,并且与躯干和内脏脂肪质量的下降密切相关。     

舌三针联合康复训练对脑梗死后假性延髓麻痹所致构音障碍的疗效观察

目的:探讨舌三针联合康复训练对脑梗死后假性延髓麻痹所致构音障碍疗效,以期提高脑卒中后患者生命质量。方法:选取2016年12月至2019年1月海南省人民医院收治的脑梗死后假性延髓麻痹所致构音障碍患者78例进行回顾性分析,按照治疗方法不同分为对照组和观察组,每组39例。对照组常规西医+康复训练治疗,观察组在以上基础上加用舌三针治疗,均连续治疗6周。观察2组治疗前、完成治疗后血脂、Frenchay构音评分、血液流变学、言语空气动力学指标变化并比较。完成治疗后总结疗效情况。结果:1)2组治疗完成后反射、呼吸、唇、颌、软腭、喉、舌、言语评分和治疗前比较均显著上升(P<0.05),且观察组上升幅度显著高于对照组(P<0.05)。2)2组治疗完成后三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)较治疗前均显著下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)较治疗前比较均显著上升(P<0.05),且观察组上升幅度显著高于对照组(P<0.05)。3)2组治疗完成后全血高低切黏度、血浆黏度、红细胞压积较治疗前均显著下降(P<0.05),且观察组优于对照组(P<0.05)。4)对照组治疗前、完成治疗后各指标比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组治疗完成后平均声压级(MSDV)、音调(P)、最长发声时间(MPT)、平均气流率(MFR)、声门下压(SGP)、声门阻力(GR)、发声效率(VE)较治疗前均显著升高(P<0.05),且观察组优于对照组(P<0.05)。5)观察组治愈率38.46%、总有效率89.74%,显著高于对照组治愈率23.08%、总有效率79.49%(P<0.05)。结论:舌三针联合康复训练能通过促进脑微循环,改善血脂,促进言语功能来改善脑梗死后假性延髓麻痹所致构音障碍症状,提高生命质量。     

曲美他嗪对冠心病合并左心功能不全的效果

目的 探讨冠心病合并左心功能不全患者行曲美他嗪治疗的临床效果.方法 选择医院于2016年3月—2017年4月期间接收的老年冠心病合并左心功能不全患者60例,采用随机数字表法形式均分为研究组和对照组,每组均30例.对照组行基础治疗,研究组在此基础上口服曲美他嗪,记录两组心功能指标以及不良反应发生率.结果 研究组治疗后LVEDD、LVESD指标低于对照组,左心室射血分数高于对照组(P<0.05);研究组和对照组在用药过程中均未出现严重的反应,研究组出现3例转氨酶上升,2例胃肠道不适;对照组出现2例转氨酶上升,组间对比P<0.05.结论 曲美他嗪行冠心病合并左心功能不全治疗效果明显,心肌功能以及血脂水平有所改善.     

连续性肾脏替代治疗联合中药灌肠对急性肾损伤患者尿KIM-1、NGAL水平的影响

目的:探讨连续性肾脏替代治疗(CRRT)联合中药灌肠对重症急性肾损伤患者尿肾损伤分子-1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平和预后的影响。方法:回顾性分析89例重症急性肾损伤患者临床资料,依据不同治疗方式分为对照组43例和研究组46例,对照组采用CRRT治疗,研究组采用CRRT联合中药灌肠治疗。比较两组尿量恢复时间、重症医学科(ICU)住院时间、治疗前后肾功能、尿KIM-1、NGAL水平,序贯器官衰竭估计评分(SOFA)、急性生理与慢性健康评分表(APACHEⅡ)评分和预后情况。结果:研究组尿量恢复时间、ICU住院时间均少于对照组(P<0.05)。治疗前,两组肾功能、尿KIM-1、NGAL水平,SOFA、APACHEⅡ评分比较,差异无统计学意义(P>0.05); 治疗后,两组肾功能指标、尿KIM-1、NGAL水平,SOFA、APACHEⅡ评分均较治疗前下降,研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组死亡率较对照组低(P<0.05)。结论:CRRT联合中药灌肠能够促进重症急性肾损伤患者肾功能的恢复,降低尿KIM-1、NGAL水平,改善预后。     

Therapeutic targeting of PFKFB3 with a novel glycolytic inhibitor PFK158 promotes lipophagy and chemosensitivity in gynecologic cancers

Metabolic alterations are increasingly recognized as important novel anti-cancer targets. Among several regulators of metabolic alterations, fructose 2,6 bisphosphate (F2,6BP) is a critical glycolytic regulator. Inhibition of the active form of PFKFB3^ser461 using a novel inhibitor, PFK158 resulted in reduced glucose uptake, ATP production, lactate release as well as induction of apoptosis in gynecologic cancer cells. Moreover, we found that PFK158 synergizes with carboplatin (CBPt) and paclitaxel (PTX) in the chemoresistant cell lines, C13 and HeyA8MDR but not in their chemosensitive counterparts, OV2008 and HeyA8, respectively. We determined that PFK158-induced autophagic flux leads to lipophagy resulting in the downregulation of cPLA2, a lipid droplet (LD) associated protein. Immunofluorescence and co-immunoprecipitation revealed colocalization of p62/SQSTM1 with cPLA2 in HeyA8MDR cells uncovering a novel pathway for the breakdown of LDs promoted by PFK158. Interestingly, treating the cells with the autophagic inhibitor bafilomycin A reversed the PFK158-mediated synergy and lipophagy in chemoresistant cells. Finally, in a highly metastatic PTX-resistant in vivo ovarian mouse model, a combination of PFK158 with CBPt significantly reduced tumor weight and ascites and reduced LDs in tumor tissue as seen by immunofluorescence and transmission electron microscopy compared to untreated mice. Since the majority of cancer patients will eventually recur and develop chemoresistance, our results suggest that PFK158 in combination with standard chemotherapy may have a direct clinical role in the treatment of recurrent cancer.     

基于糖脂代谢研究筋疽（糖尿病足非缺血性坏疽）湿热毒盛证

[目的]通过现代检验技术研究筋疽(糖尿病足非缺血性坏疽)湿热毒盛证的糖脂代谢指标。[方法]收集136例筋疽(糖尿病足非缺血性坏疽)患者进行不同证型间指标的比较。[结果]湿热毒盛证患者空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2 h血糖(2 hPBG)、晚期糖基化终末产物(AGEs)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)与其他证型比较存在统计学差异(P<0.05)。湿热毒盛证患者C-反应蛋白(CRP)、人可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)与其他证型组间比较存在统计学差异(P<0.01)。[结论]筋疽(糖尿病足非缺血性坏疽)湿热毒盛证形成的原因与低营养状态下糖脂代谢紊乱引起的高血糖及持续炎症反应相关。     

左旋肉碱修饰的壳聚糖-硬脂酸协载槲皮素口服紫杉醇纳米胶束的制备、表征及在体肠循环研究

目的 制备左旋肉碱修饰的壳聚糖-硬脂酸（LC-SA/CS-SA）纳米胶束，包载紫杉醇（PTX）且协载槲皮素，考察胶束特性，并以大鼠在体肠循环评估给药系统对PTX口服吸收的促进作用。方法 将硬脂酸（SA）通过酰胺化反应接枝于壳聚糖（CS），形成共聚物CS-SA；采用核磁共振H谱、红外光谱鉴定产物结构；以PTX为主药，槲皮素为辅药，采用激光粒径分析、Zeta电位分析和HPLC分析分别考察了胶束的粒径、Zeta电位、载药量、包封率；透射电子显微镜观察胶束形貌；芘荧光探针法测定LC-SA/CS-SA胶束的临界胶束浓度（critical micelle concentration，CMC）；透析袋法考察胶束的体外释放行为；大鼠在体肠吸收实验评估载药胶束的促吸收作用。结果 红外与核磁结果表明SA通过酰胺键接枝于CS；协载槲皮素的LC-SA/CS-SA载PTX胶束呈类球形，粒径为（148.3±1.7）nm，多分散系数（PDI）为0.16±0.07，Zeta电位为（24.600±0.167）mV，CMC为14.31 μg/mL；体外释放结果表明，与市售紫杉醇注射剂相比，协载槲皮素的LC-SA/CS-SA载PTX胶束、LC-SA/CS-SA载PTX胶束具有明显缓释效应；大鼠在体肠吸收实验表明，协载槲皮素的LC-SA/CS-SA胶束对载药PTX的胃肠吸收具有显著促进作用。结论 构建的协载槲皮素的LC-SA/CS-SA载PTX胶束性能优良，促进了PTX的大鼠肠吸收，具有增强药物口服吸收潜力。     

泌尿系结石成分分析与血脂相关性研究

目的分析泌尿系结石成分及其与血脂[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]相关性。方法回顾性选择2014年10月～2018年10月我院收治的349例泌尿系结石患者为尿石组,同期在我院体检健康者349例为对照组,比较两组血清TG、HDL-C、TC、LDL-C水平,分析349例泌尿系结石患者泌尿系结石成分,比较血脂正常与血脂异常的泌尿系结石患者结石成分占比,采用spearman相关分析泌尿系结石成分与血脂异常的相关性,采用多因素Logistic回归分析泌尿系结石的影响因素。结果 349例泌尿系结石患者泌尿系结石成分分析结果:含钙结石270例,感染性结石51例,尿酸结石28例。尿石组血清TG、TC水平显著高于对照组(P0.05);尿石组血清HDL-C水平显著低于对照组(P0.05);尿石组血清LDL-C水平较对照组差异无统计学意义(P0.05);血脂异常泌尿系结石患者尿酸结石比例显著高于血脂正常泌尿系结石患者(P0.05);血脂异常泌尿系结石患者感染性结石、含钙结石比例较血脂正常泌尿系结石患者差异无统计学意义(P0.05);尿酸结石与血脂异常呈正相关(P0.05);感染性结石、含钙结石与血脂异常无相关性(P0.05);TG是泌尿系结石的危险因素(P0.05)。结论泌尿系结石形成与血脂水平关系密切,血脂异常尤其是高甘油三酯血症易导致尿酸结石形成,控制血脂对于预防泌尿系结石有重要临床意义。