牛膝不同炮制品中化学成分的UPLC-Q-TOF/MS分析

目的:比较生牛膝、酒牛膝及盐牛膝的各项质控指标及化学成分的差异。方法:按照2015年版《中国药典》的标准,测定生牛膝、酒牛膝及盐牛膝的水分、总灰分和醇溶性浸出物含量,考察指标成分含量测定方法的线性范围、精密度、稳定性、重复性及加样回收率,建立UPLC-Q-TOF/MS比较牛膝不同炮制品中主要化学成分相对含量的差异。结果:生牛膝、酒牛膝及盐牛膝的水分、总灰分及醇溶性浸出物的含量均符合2015年版《中国药典》的要求,运用高分辨质谱鉴定了10个主要化学成分,分别为苄基葡萄糖苷,苄基葡萄糖苷异构体,牛膝甾酮A,水龙骨素B,β-蜕皮甾酮,牛膝甾酮,姜状三七苷R_1,人参皂苷Ro,牛膝皂苷Ⅰ和竹节参皂苷Ⅳ。牛膝经酒炙后苄基葡萄糖苷,苄基葡萄糖苷异构体,水龙骨素B,β-蜕皮甾酮和人参皂苷Ro的含量显著升高,而姜状三七苷R_1,牛膝皂苷Ⅰ和竹节参皂苷Ⅳ的含量则显著减低;盐炙后苄基葡萄糖苷,苄基葡萄糖苷异构体,牛膝甾酮A,水龙骨素B,β-蜕皮甾酮和牛膝甾酮含量显著升高,而姜状三七苷R_1,人参皂苷Ro,牛膝皂苷Ⅰ和竹节参皂苷Ⅳ的含量则显著降低。结论:牛膝炮制后酚苷类和甾体皂苷类成分的含量显著上升,而三萜皂苷类成分的含量则显著降低。     

不同种类酒炮炙对牛膝饮片指纹图谱的影响

目的:比较牛膝生品、蒸馏水炙品及不同乙醇浓度酒炙品指纹图谱差异,研究不同乙醇浓度酒炮炙对牛膝饮片的影响。方法:采用HPLC,以岛津VP-ODS(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速0.8 m L/min,柱温25℃,检测波长243 nm,进样量15μL,采集90 min。结果:牛膝各酒炙品大部分峰面积较生品的要稍高,蒸馏水炙品的较生品稍低,但不是很明显。结论:酒炙有利于本实验建立指纹图谱中的牛膝大部分有效成分的溶出,高浓度乙醇炙品在有效成分溶出方面优于低浓度乙醇炙品。     

醋制乳香没药皮硝外敷治疗阑尾炎性包块的护理

阑尾炎性包块是急性阑尾炎的主要并发症之一。其形成原因有两种：一是阑尾发炎后早期被大网膜及周围组织粘连包裹，因炎症进展而形成阑尾脓肿；一是尚未形成脓的称为阑尾炎性肿块，后者临床多见行非手术治疗患者，予以腹部外敷中药多为首选。我院以醋制中药乳香没药皮硝的外敷，活血止痛，追毒作用，疗效显著，现将相关临床观察及护理报道如下。     

蜕皮甾酮对人脐带间充质干细胞冻存复苏后生物学活性的影响

目的：研究体外条件下蜕皮甾酮（EDS）对冻存复苏后人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）生物学活性的影响。方法：hUCMSCs采用梯度冷冻技术冻存,6个月后复苏,扩增、传代,分3组培养：空白对照组用普通培养基培养;低剂量EDS组在普通培养基中加入100μg／mlEDS;高剂量EDS组在普通培养基中加入200μg／mlEDS。显微镜下观察细胞形态,10d时计算克隆形成能力,绘制细胞生长0～7d的细胞生长曲线,流式细胞仪鉴定hucMscs的细胞表面特异标记（CD34、CD45、CD29、CD105）,油红0染色及茜素红染色观察huCMSCs向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力。结果：两EDS组克隆形成率约为75％,空白对照组约为40％。生长曲线显示两EDS组增殖速度较空白对照组快,但两EDS组增殖速度相近。流式检测结果显示两EDS组的CD29、CD105阳性率明显高于空白对照组,CD34、CD45里阴性表达,其表达明显低于空白对照组（P〈0．05）,两EDS组之间差异无统计学意义;成骨、成脂分化能力检测发现,各组细胞均能够向脂肪细胞、成骨细胞分化,而高剂量EDS组细胞在未加诱导培养基的情况下仍出现向成骨细胞分化的趋势。结论：在一定浓度范围内,EDS对细胞复苏后恢复细胞活性以及提高存活率方面具有积极作用,但是较高浓度的EDS有诱导细胞向成骨细胞方向分化的趋势。     

补益地黄丸中β-蜕皮甾酮含量分析

目的:建立补益地黄丸中β-蜕皮甾酮含量分析的方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,FORTIS-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液(16∶84)为流动相,流速1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长250 nm。结果:β-蜕皮甾酮在4.24~84.80μg/m L浓度范围内与峰面积有良好线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为97.78%,RSD为1.77%。结论:该方法灵敏度高、准确、重复性好、专属性强,可作为控制补益地黄丸质量的重要方法。     

乳没药对抑瘤和受体型酪氨酸激酶活性的影响

目的:研究乳香和没药药对的抑瘤作用,并考察其对肿瘤细胞中受体型酪氨酸激酶(RTKs)的影响,探讨乳没药对抑瘤作用的机理。方法:体外实验:采用乳没药对浸提液,MTT法分别测定其对2种人恶性肿瘤细胞株(SMMC7721、HL-60)增殖的影响,并检测其对肿瘤细胞RTKs活性的影响。体内实验:采用移植性荷瘤H22小鼠模型,接种3天后,荷瘤小鼠随机分组,并给予乳没药对10天,检测肿瘤重量并计算抑制率,同时检测肿瘤组织中RTKs的活性。结果:体外实验:乳没药对浸提液在5mg/ml~10mg/ml浓度下对两种肿瘤细胞的增殖均表现出明显的抑瘤作用,同时对2种肿瘤细胞的受体酪氨酸激酶活性有明显的抑制作用。体内实验:乳没药对在1.08g/kg和2.16g/kg剂量下对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,同时对肿瘤组织中受体酪氨酸激酶活性有明显的抑制作用。结论:乳没药对具有明显的抑瘤作用,其抑瘤机理可能与抑制肿瘤细胞内受体酪氨酸蛋白激酶途径有关。     

骨疏灵的大鼠血清药物化学分析

目的:对骨疏灵血清药物化学进行研究,通过分析其入血成分探讨该复方发挥药效的物质基础,为骨疏灵的临床应用提供参考。方法:采用血清药物化学研究方法,建立骨疏灵体外和血清的全方、缺味组方及单味药材的HPLC,通过对比分析骨疏灵体外和血清的全方、缺味组方及单味药材的HPLC色谱峰,初步确定骨疏灵的入血成分、移行成分及各成分的主要归属。结果:骨疏灵灌胃后在大鼠体内发现21个入血成分,其中11个来自该复方的原型,4个是新产生的物质,其余均为代谢物。结论:骨疏灵入血成分是各味药材复方配伍后共同作用的结果,其中淫羊藿贡献最大,复方血清药物化学研究为深入阐述骨疏灵药效物质基础提供实验依据。     

没药中倍半萜类化学成分研究

目的研究没药属没药Commiphora myrrha的倍半萜类化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS等多种柱色谱,结合制备液相等方法进行分离和纯化,根据理化性质及波谱数据对化学成分进行结构鉴定。结果从没药二氯甲烷提取物中分离得到10个倍半萜类化合物,分别鉴定为11-methoxyl-guaia-6,10-dien-4α-ol(1)、(1R,4S,5R,10R)-isodauc-6-en-10,14-diol(2)、 10α-hydroxy-isodauc-6-en-14-al(3)、 guaia-6,10-dien-4α,11-diol(4)、 orientalolB(5)、(1S,4R,5R,10S)-isodauc-6-en-10,14-diol (6)、(1S,4S,5R,10S)-isodauc-6-en-10,14-diol (7)、alismanoid C (8)、guaiandiol (9)、canangaterpene Ⅵ (10)。结论化合物1为新化合物,命名为没药醇A。化合物2～10均为首次从该属植物中分离得到。     

带状疱疹外敷膏

制乳香20g,生大黄30g,黄柏30g,黄连30g,制没药15g。上药研细末,用细茶浓汁调成糊状,外敷患处,干则易之。     

康妇涌泉颗粒中β-脱皮甾酮的含量测定

目的建立康妇涌泉颗粒中β-脱皮甾酮的含量测定方法。方法使用高效液相色谱法,色谱柱:Diamonsil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(31∶69),检测波长247 nm,流速1.0 mL/min,进样量10μL,柱温30℃。结果β-脱皮甾酮在5.0¹60.0μg/mL的范围内线性关系良好,Y=0.093 7X+0.183 1(r=0.999 4),平均回收率为97.5%,RSD为0.93%(n=6)。结论所建方法便捷,专属性强,适用于康妇涌泉颗粒中β-脱皮甾酮的质量控制。