芪仙地花颗粒质量标准的研究

目的建立芪仙地花颗粒(黄芪、淫羊藿、虎杖等)的质量标准。方法 TLC、HPLC法分别定性鉴别黄芪、巴戟天,HPLC法测定淫羊藿苷、虎杖苷含有量。结果 TLC斑点清晰,阴性无干扰;HPLC色谱图中阴性对照无干扰;淫羊藿苷、虎杖苷分别在0.51～25.45、0.54～27.00μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=1),平均加样回收率分别为98.79%(RSD=4.54%)、99.50%(RSD=3.47%)。结论该方法准确、稳定、可行,可用于芪仙地花颗粒的质量控制。     

淫羊藿、巴戟天中药提取物对恒河猴M0、M1型单核衍生巨噬细胞基因表达的影响

【目的】探讨中药淫羊藿、巴戟天提取物(中药注射液喘可治的组成)对恒河猴单核衍生的巨噬细胞在未极化(M0)、M1极化条件下基因表达的影响,分析其可能的免疫调节的作用机制。【方法】采用密度梯度离心法分离中国恒河猴外周血单个核细胞(PBMCs),采用贴壁法纯化出单核细胞,并以粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)刺激5 d以使单核细胞分化成巨噬细胞;然后不加入极化因子(M0)或以干扰素γ(IFN-γ,继续培养2 d)诱导巨噬细胞极化为M1表型,同时分别加入淫羊藿、巴戟天提取物进行干预;然后提取m RNA并逆转录后,采用实时荧光定量PCR检测CCR5、CD4、CTLA-4、Fox P3、IDO、IL-10、TGF-β等基因表达量。【结果】与空白对照组比较,加入巴戟天提取物培养的M0巨噬细胞基因表达上调不明显;经淫羊藿提取物培养的M0巨噬细胞,CCR5基因表达量上调4.21倍,TGF-β上调7.66倍,Fox P3、IL-10轻度上调,而CD4、CTLA-4、IDO等基因表达改变倍数无明显变化。经巴戟天提取物刺激的M1型巨噬细胞,CTLA-4基因表达量上调3.22倍,Fox P3上调3.69倍,CCR5、CD4、IL-10、IDO基因改变倍数均无明显变化,TGF-β未测出;而由淫羊藿提取物刺激的M1型巨噬细胞,IL-10的表达量上调11.83倍,Fox P3上调4.55倍,IDO、CCR5、CD4、CTLA-4基因改变倍数无明显变化,TGF-β未测出。【结论】巴戟天和淫羊藿提取物培养能够上调M1型巨噬细胞IL-10、Fox P3、CTLA-4等抑炎基因表达,淫羊藿提取物能够上调M0巨噬细胞CCR5和TGF-β等基因表达,促进病原体清除和组织修复,从而发挥多效免疫调节作用。     

南药巴戟天的全球产地区划

目的:开展巴戟天全球产地生态适宜性分析,为合理布局巴戟天的人工引种提供科学依据,实现巴戟天资源的保护和有效利用。方法:采用药用植物全球产地生态适宜性区划信息系统(GMPGIS)系统对搜集到的巴戟天Morinda officinalis How道地产区、主产区及野生分布区共100个样点进行生态因子的聚类分析,得到巴戟天全球范围的生态适宜区和潜在种植区。结果:巴戟天在世界范围的生态适宜产区为中国、越南、巴西、老挝和加纳等国家;巴戟天在中国的主要适宜产区为广东、福建、广西、海南等省区。结论:中国为巴戟天的最主要产区,应加强对巴戟天的人工种植研究。GMPGIS为巴戟天的人工种植区域选择提供科学指导。     

巴戟天对过度训练大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:观察巴戟天对过度训练大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:实验于2003-09/2004-07在郑州大学医学院药理教研室完成。选择SD大鼠45只,大鼠随机分为安静对照组,过度训练组,过度训练 巴戟天组,每组各15只。过度训练组、过度训练 巴戟天组大鼠均采用递增负荷游泳训练建立过度训练模型,每周训练6d,共7周,过度训练 巴戟天组大鼠同时于训练前1h灌服巴戟天4.5mg/(kg·d)。安静对照组常规饲养7周,不加干预。7周后分别取3组大鼠心脏,剪碎后消化离心,制成细胞涂片,采用原位末端标记技术检测大鼠心肌细胞的凋亡率。以匀浆起将心脏制成10%心肌组织生理盐水匀浆,测定超氧化物歧化酶、丙二醛含量。结果:各组大鼠均进入结果分析,无脱失值。①巴戟天对心肌细胞凋亡率的影响:原位末端标记技术结果显示安静对照组心肌细胞偶见阳性核染色标记。过度训练组心肌细胞有较多的阳性标记。过度训练 巴戟天组只有散在的阳性标记,其阳性细胞凋亡率明显低于过度训练组[(6.80±1.99)%,(11.40±2.32)%,(P<001)]。②巴戟天对心肌细胞超氧化物歧化酶和丙二醛含量的影响:过度训练组大鼠心肌细胞超氧化物歧化酶活性显著低于安静对照组和过度训练 巴戟天组[(2.61±0.21)mkat/g,(5.10±0.21,3.89±0.15)mkat/g,(P<0.01)],丙二醛含量则显著高于安静对照组和过度训练 巴戟天组[(3.67±0.17)μmol/g,(1.54±0.11,2.09±0.16)μmol/g,(P<0.01)],过度训练 巴戟天组与安静对照组比较无显著差异。结论:过度训练导致大鼠心肌细胞凋亡显著增加,巴戟天通过抗氧化作用抑制心肌细胞过度凋亡,发挥心肌保护作用。     

巴戟天对运动训练大鼠骨骼肌自由基代谢及运动能力的影响

目的：通过建立力竭游泳训练模型，观察巴戟天对运动训练大鼠骨骼肌自由基代谢及运动能力的影响。 方法：实验于2004—04／12在郑州大学医学院药理教研室完成。选择雄性SD大鼠24只，随机分为安静对照组，过度训练组，过度训练＋巴戟天组，每组8只。过度训练组、过度训练＋巴戟天组大鼠均采用递增负荷游泳训练建立力竭游泳训练模型，每周训练6d，共7周。过度训练＋巴戟天组大鼠同时于训练前1h灌服巴戟天4．5mg／（kg&;#183;d）。安静对照组只进行常规游泳训练，30min／d，每周训练6d，共训练7周。7周后将各组大鼠处死，立即分离骨骼肌，用预冷的生理盐水洗净血污，滤纸吸干，按1：9（W／V）加入低温磷酸盐缓冲液（pH7．2）匀浆，离心（5000r／min，25min，0～4℃），取上清液，在1～40C的冰箱保存，以测定超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、Ca^2＋-ATP酶和Na^＋-K^＋-ATP酶活性。组间均数比较采用t检验。 结果：各组大鼠均进入结果分析，无脱落。过度训练组大鼠力竭时间明显低于安静对照组和过度训练＋巴戟天组（P〈005）；经过7周训练，过度训练组大鼠肌细胞超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、Ca^2＋-ATP酶和Na^＋-K^＋-ATP酶活性显著低于安静对照组和过度训练＋巴戟天组（P〈0.05），安静对照组与过度训练＋巴戟天组无显著性差异。 结论：巴戟天可显著提高运动大鼠抗自由基氧化的功能，使大鼠运动能力明显增强。     

巴戟天对手机辐射致雄性大鼠生殖障碍的作用

目的：探讨巴戟天对手机辐射致成年雄性大鼠生殖障碍的作用。方法50只大鼠分为5组：假辐射组（不辐射,不给药）、辐射组（辐射,不给药）、阴性对照组（辐射,灌胃等体积双蒸水）、巴戟天水提物给药组（辐射,灌胃巴戟天水提物）和巴戟天醇提物给药组（辐射,灌胃巴戟天醇提物）。应用手机辐射2周后,两个给药组分别以巴戟天水、醇提取物灌胃2周。结果辐射组：捕捉潜伏期期显著延长,扑捉次数和交配次数显著减少;精子计数及活动率显著降低,畸形率显著升高;睾丸超微结构见损伤;两个给药组均见恢复效果,水提物给药组效果显著强于醇提物给药组。结论巴戟天水、醇提物对手机辐射致大鼠生殖障碍有修复功效,且水提物效果优于醇提物。     

HPLC测定不同产地巴戟天中5种茜草素型蒽醌的含量

目的:建立用HPLC同时测定不同产地巴戟天中5种茜草素型蒽醌含量的方法。方法:采用HPLC测定巴戟天中1-甲氧基-2-羟基蒽醌、1,2-二甲氧基-3-羟基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚、1,3-二羟基-2-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素的含量。色谱条件:Ecosil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.2%磷酸梯度洗脱,流速:0.8 m L/min,检测波长:277 nm,柱温:30℃。结果:1-甲氧基-2-羟基蒽醌、1,2-二甲氧基-3-羟基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚、1,3-二羟基-2-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素5种蒽醌质量浓度分别在0.2856~34.27μg/m L、0.3268~39.22μg/m L、0.3450~41.40μg/m L、0.1248~14.98μg/m L、0.0508~6.096μg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系,加样回收率分别为99.4%、100.2%、101.4%、97.2%、103.2%(RSD均小于3%)。对10个不同产地的巴戟天样品进行测定,1-甲氧基-2-羟基蒽醌、1,2-二甲氧基-3-羟基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚、1,3-二羟基-2-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素的含量变化范围为0.0025~0.0722 mg/g、0.0016~0.0658 mg/g、0.0022~0.0684 mg/g、0.0182~0.3965 mg/g、0.0014~0.0179 mg/g。结论:该方法准确、可靠,可同时测定巴戟天中5种茜草素型蒽醌成分的含量,为评价不同产地巴戟天质量提供了科学依据。     

巴戟天萃取物对环磷酰胺诱导睾丸损伤模型大鼠的影响

目的:观察巴戟天萃取物(MO)对环磷酰胺(CTX)诱导睾丸损伤模型大鼠的影响及可能机制。方法:雄性SD大鼠,随机分为空白对照组、CTX+NS组、CTX+MO不同剂量组。以环磷酰胺构建大鼠睾丸损伤动物模型;巴戟天水提物用乙酸乙酯萃取后取水层成分给予每组治疗组灌胃。观察各组大鼠睾丸微细结构,比较卵泡刺激素受体(FSHR)蛋白及mRNA表达的差异。结果:光镜下观察可见CTX+NS组明显病理改变,各治疗组的睾丸生精小管的结构明显改善,FSHR mRNA和FSHR蛋白表达明显高于CTX+NS组,差异具有统计学意义。结论:巴戟天萃取物对环磷酰胺诱导睾丸损伤模型大鼠具有修复作用,可能与巴戟天萃取物能促进睾丸FSHR高表达有关,并以30g·kg~(-1)·d~(-1)浓度效果最佳。     

探究不同炮制去心法对巴戟天耐斯糖含量的影响

目的探究不同炮制去心法对巴戟天耐斯糖含量的影响。方法分别采用润法、泡后蒸法、清蒸法、煮法、泡法以及盐蒸法对巴戟天进行处理,选择合适的色谱条件,并采用方法学对其进行考察,得出巴戟天耐斯的糖含量。结果经过上述炮制法处理后的巴戟天耐斯糖含量由低到高依次为:泡法、泡后蒸法、盐蒸法、清蒸法、煮法、润法。结论采用泡法去心进行处理巴戟天耐斯糖含量消耗丢失的最多,润法去心消耗丢失的最少。     

傅里叶红外光谱法鉴别巴戟天及其伪品的研究

目的:为了快速准确地鉴别巴戟天及其伪品。方法:采用傅里叶红外光谱法对巴戟天药材及其常见伪品羊角藤、铁箍散、假巴戟和恩施巴戟进行测定,通过比较一、二级红外谱图相似度和特定谱段相似系数对其真伪进行分析。结果:在一、二级红外谱图上均可根据特征峰比对分析法和特征谱段相似系数法快速鉴别巴戟天及其伪品。结论:红外光谱法用于巴戟天药材真伪鉴别准确、快速,可以作为巴戟天药材真伪鉴别的一种现代化检测方式。