稳定性冠心病血瘀证的血浆定量蛋白质组学探析＊

目的 基于数据非依赖性采集的定量蛋白质组学技术（data independent acquisition，DIA）对稳定性冠心病血瘀证患者的血浆蛋白质进行研究分析，初步探索冠心病血瘀证的关键生物学过程与核心靶点。方法 选择中国中医科学院广安门医院心血管科收治的5例稳定性冠心病患者作为疾病观察组，同时选取健康成人5人作为对照组，采用DIA蛋白质组学技术对受试者的血浆进行检测，确定蛋白质表达量后进行差异蛋白质表达分析、GO富集分析、KEGG信号通路图查询和蛋白质互作网络分析。结果 在差异倍数为1.5倍时，疾病观察组相比于健康对照组，共鉴定到22个蛋白质下调，9个蛋白质上调。进一步的生物信息学分析表明，冠心病血瘀证的生物学过程与补体参与的慢性炎症反应有关，关键信号通路是补体与凝血级联反应的信号通路，核心蛋白质为C反应蛋白、转甲状腺素蛋白、补体因子H、维生素D结合蛋白等。结论 冠心病血瘀证的生物学过程与补体参与的慢性炎症反应有关。     

基于唾液SIgA免疫防御探讨开雍刺血法治疗喉源性咳嗽疗效机制

目的:基于唾液SIgA免疫防御功能观察开雍刺血法治疗喉源性咳嗽的临床疗效,探讨其免疫机制。为开雍刺血法治疗喉源性咳嗽提供依据。方法:采用随机数字表法分组,将符合条件的70例患者分为开雍刺血法组(治疗组)和苏黄止咳胶囊组(对照组),各35例。治疗组给予开雍刺血法治疗,7 d行1次治疗,2～3次为1个疗程。对照组给予苏黄止咳胶囊治疗,每日3次,每次3粒口服,疗程为21 d。观察并记录治疗前后临床症状和体征情况以及唾液SIgA的变化情况,并记录不良反应。结果:经统计学分析,治疗组和对照组治疗喉源性咳嗽均有效,且两组治疗后唾液SIgA高于治疗前,差异有统计学意义(P0.05),治疗组治疗前后唾液SIgA差值以及总有效率均优于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗组治疗后症状体征总分以及各因子评分均低于治疗前,且明显优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:开雍刺血法能快速显著缓解或消除喉源性咳嗽的症状,同时可以通过提高唾液SIgA的水平,提升患者免疫力,该方法治疗喉源性咳嗽安全有效。     

基于蛋白质组学分析色胺酮抑制小鼠乳腺癌的作用机制

目的:采用非标记定量(Label-free)蛋白质组学技术研究色胺酮抗小鼠体内乳腺癌的作用机制。方法:采用超高效液相色谱-质谱联用技术检测色胺酮抗小鼠乳腺癌的表达蛋白,选择Ionoptics nano UPLC C18色谱柱(0.075 mm×250 mm,1.6μm),流动相0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液梯度洗脱,正离子模式,扫描范围m/z 100～1 700,使用MaxQuant 1.6.5.0进行数据库检索。采用Label-free高分辨质谱的蛋白质组学技术筛选4T1乳腺癌小鼠模型组与色胺酮(100 mg·kg~(-1))口服给药组之间的差异表达蛋白,进行色胺酮抗乳腺癌的蛋白质组学研究。结果:共鉴定出3 997个蛋白质,其中有2 911个蛋白可定量。模型组与色胺酮组共750个差异表达蛋白,其中286个蛋白上调,464个蛋白下调。基因本体分析表明,这些差异表达蛋白主要参与增殖、细胞迁移、凋亡、免疫、血管生成和炎症调节等生物学过程。京都基因与基因组百科全书通路分析进一步表明,这些蛋白主要集中于T细胞受体,B细胞受体,Toll样受体,核转录因子-κB(NF-κB),Ras蛋白,白细胞介素-17,肿瘤坏死因子,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路。结论:与色胺酮抗4T1乳腺癌作用密切相关的差异表达蛋白包括上调蛋白白细胞分化抗原14(CD14),前列腺素G/H合酶2(PTGS2),泛素蛋白连接酶E3和下调蛋白CD44,70 kDa热休克蛋白1A(HSPA1A),巨噬细胞移动抑制因子(MIF),NF-κB,核糖体蛋白S6激酶α-4(RPS6KA4)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1),提示色胺酮主要通过调节肿瘤炎症微环境来达到抑制小鼠乳腺癌的作用。     

基于蛋白质组学技术测定全蝎中β-肌动蛋白的含量

目的:通过蛋白质组学技术手段找到适用于药材全蝎含量测定的目标蛋白质及其特征肽段，用该特征肽段形成定量方法。方法:全蝎粉碎后经PBS缓冲溶液超声提取并过滤后，得到药材的蛋白质提取溶液。上述溶液经胰蛋白酶酶解后通过高分辨质谱进行分析，确定待测的目标蛋白质（β-肌动蛋白）和与之对应的特征肽段（IIAPPER），并进行特征肽段及其同位素内标物（IIA*(13C3，15N)PPER）的合成。用得到特征肽段做对照品，同位素内标物做内标进行含量测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8 μm)，流动相为0.1%甲酸溶液(V/V)-水和乙腈，梯度洗脱。质谱使用电喷雾离子源（ESI）正离子模式，采用多反应监测模式（MRM）进行信号采集。定量方法为内标法。结果:β-肌动蛋白的特征肽段在0.1~40 nmol/L浓度范围内线性良好，相关系数（r2）在0.999以上。方法检出限为0.04 mg/kg，定量限为0.13 mg/kg。加标回收率在87%～93%，重复性的RSD为5.2%，中间精密度的RSD为4.8%，供试品溶液在4 h内稳定。利用该方法对来自不同产地的37批次全蝎药材中的β-肌动蛋白进行含量测定，结果在4.66～100.26 mg/kg之间。结论:该方法灵敏度高，准确度较好和重复性较稳定，可以为全蝎药材药材的质量控制提供一种有效的手段。     

乳腺癌磷酸化蛋白质组学研究进展

乳腺癌是发生于乳腺上皮组织的恶性肿瘤,其病死率居女性肿瘤首位。近年来,磷酸化蛋白质组学研究广泛,与乳腺癌的发病、临床诊断和治疗等各个方面均密切相关。笔者系统性回顾了磷酸化蛋白质组学在肿瘤治疗中的研究和应用,并重点介绍乳腺癌磷酸化蛋白质组学的最新研究进展。     

康复新液结合臭氧对复发性阿弗他溃疡唾液表皮生长因子及血清IL-6、SOD、SIgA的影响

目的 探讨复发性阿弗他溃疡发病群体、发病部位和治疗的方法，同时对康复新液结合臭氧的治疗效果进行讨论，分析其对唾液表皮生长因子(EGF)及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的影响。 方法 选取2016年1月—2018年1月杭州师范大学附属医院收治的64例复发性阿弗他溃疡患者，应用抽签法将患者随机分为2组，对照组应用臭氧治疗，研究组在对照组的基础上应用康复新液治疗。比较2组治疗前后IgG、SIgA、SOD变化、VAS评分和溃疡持续时间及血清TNF-α、IL-6水平等。 结果 研究组治疗后IgG和SIgA变化大于对照组(均P＜0.05)，研究组IgG、SIgA、SOD值分别为(23.52±6.44)g/L、(64.62±11.23)g/L、(290.26±57.33)g/L；研究组VAS评分为(2.01±0.23)分和溃疡持续时间为(3.25±0.96)d，均低于对照组(均P＜0.05)；研究组治疗后TNF-α、IL-6及EGF水平分别为(134.02±20.15)ng/mL、(73.23±8.73)ng/mL、(3.2±0.6)ng/mL，均低于对照组，差异具有统计学意义(均P<0.05)。 结论 使用康复新液结合臭氧治疗复发性阿弗他溃疡，效果理想，并且对患者受损表皮的再生和修复起到了一定的促进作用，有效改善了患者唾液EGF及血清IL-6、SOD、SIgA水平。      

金菊利咽饮在脑卒中患者口腔护理中的应用效果观察

目的探讨金菊利咽饮在脑卒中患者口腔护理中的应用效果。方法选取我院(2015年1月至2017年1月)收治的90例脑卒中患者,根据不同口腔护理方法分为两组,观察组(n=45)给予金菊利咽饮护理,对照组(n=45)给予常规口腔护理,对比两组患者口腔异味好转率和口腔唾液pH值以及护理前后生活质量。结果观察组患者口腔异味好转率86.67%vs55.56%明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者口腔唾液pH值≤6.6、≥7.2比例6.67%、2.22%明显低于对照组20.0%、17.78%,口腔唾液pH值6.6～7.1比例91.11%明显大于对照组62.22%,差异具有统计学意义(P<0.05)。护理前两组患者SF-36评分对比差异不明显,无统计学意义(P>0.05);护理后两组患者SF-36评分均明显提高,观察组患者提升更为明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论金菊利咽饮可有效去除口腔异味,平衡口腔唾液pH值,促进患者生活质量提高,值得临床推广。     

运用液体芯片-飞行时间质谱技术建立类风湿关节炎及湿热瘀阻证血清多肽质谱分类模型

目的建立风湿性关节炎(RA)及其RA湿热瘀阻证的血清多肽质谱分类模型,为RA的临床诊断提供依据。方法 60例RA患者根据证型分为湿热瘀阻证(30例)及非湿热瘀阻证(30例),30名健康体检者为健康对照组。分别以RA患者与健康对照组相比较、RA湿热瘀阻证患者与非湿热瘀阻证患者相比较,收集患者血清标本,以磁珠法分离血清多肽后,进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行分析。通过ClinProt Tools软件进行差异分析,建立诊断模型。结果 RA血清多肽分类模型通过GA-5算法所建立分类模型为最优分类模型,由m/z分别为2 601.05、4 967.60、6 639.43、1 866.29、8 144.63的五个多肽组成,该模型识别率为94.74%,交叉验证率为81.96%,盲法验证准确率为97.50%。RA湿热瘀阻证血清分类模型由GA-7算法所建立分类模型为最优分类模型,由m/z分别为5 740.43、4 251.35、2 863.03、1 607.22、4 531.50的五个多肽组成,该模型识别率为97.50%,交叉验证率为80.05%,盲法验证准确率为90.00%。结论本研究所建立的诊断指纹图谱模型对于RA及湿热瘀阻证的临床诊治具有一定的参考价值。