化学物对毛发毒性的体外评价方法

目的本研究通过建立大鼠毛囊体外游离培养方法,探讨体外毛囊培养方法作为化学物毛发毒性损害评价系统的可行性,建立快速、简便的化学物对毛发毒性评价方法。方法本研究选用SD大鼠背部皮肤毛囊和触须毛囊,在Williams’E无血清培养基中进行体外游离培养,经过研究比较和统计分析,确定不同部位毛囊的选择、不同生长阶段的毛囊选取、观察时间、评价指标和样本量等要素,建立毛发毒性体外评价系统。在此基础上,以来氟米特、阿糖胞苷、米诺地尔、神经生长因子、表皮生长因子、环孢素A为受试物对该评价系统进行测试。结果通过研究比较和分析,评价系统选用出生后8~12d的SD大鼠背部皮肤毛囊为研究材料,以毛囊培养前4天为观察时间,以每日生长长度和4d净增长度为评价指标,以15枚毛囊为每组样本量。结果来氟米特平均4d净增长长度分别为(0.839±0.111)、(0.683±0.102)、(0.412±0.073)mm,与对照组比较,除2.5μg/ml组外差异均有统计学意义(P<0.05),25和50μg/ml则完全抑制毛发生长,未见毛发生长现象。阿糖胞苷平均4d净增长长度分别为(0.719±0.127)、(0.588±0.109)和(0.413±0.141)mm,与对照组比较,4d平均净增长长度差异都有统计学意义(P<0.05),而且25、50和75μg/ml3组之间,差异也都具有统计学意义(P<0.05)。对已知可促进毛发生长的受试物米诺地尔(Minoxidil)、环孢素A(cyclosporin A,CsA)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)进行观察。结果发现,米诺地尔在浓度为70、140和280μg/ml的对体外培养的毛囊具有促进生长的作用,毛囊4d平均净增长长度与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),在560μg/ml时毛囊4d平均净增长长度为(0.458±0.136)mm,对毛囊具有抑制生长的作用。其他受试物环孢素A(120μg/L)、神经生长因子(100μg/L)、表皮生长因子(20μg/L)均有促进毛发生长的作用,4d平均净增长长度与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论采用SD大鼠背部皮肤毛囊体外培养建立研究化学物对毛发毒性的评价系统是可行的。该系统简单易行,针对性强,周期短,取材方便,指标客观量化,经过进一步完善和验证有望成为一个化学物对毛发生长毒性和药理作用的评价方法。     

甘氨双唑钠的致突性研究

甘氨双唑钠的致突性研究第二军医大学卫生毒理学教研室２００４３３贺清玉，印木泉，陈耀富甘氨双唑钠（ＣＭＮａ）是一种亲电子辐射化疗增敏剂［１］，对肿瘤乏氧细胞有明显的辐射增敏作用，能浓集肿瘤组织和对肿瘤有定位作用，在脑内含量低，降低了神经毒副作用［２］。...     

可吸收止血敷料的细胞毒性和致突性研究

研究可吸收止血敷料的细胞毒性和遗传毒性，为临床应用的安全性提供依据。应用细胞培养法，Ａｍｅｓ试验和显性致死试验对可吸收止血敷料进行细胞毒性和致突性研究。结果：可吸收止血敷料对Ｌ－９２９细胞增殖的影响：细胞相对增殖率４ｄ时为５５．８５％，７ｄ时为１００．１３％，对细胞的形态发育基本没有影响。     

可溶性血管内皮细胞生长抑制因子基因的克隆与表达

目的：对可溶性人血管内皮细胞生长抑制因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＶＥＧＩ）基因进行克隆和表达,检测表达产物对血管内皮细胞增殖的抑制活性。方法：将可溶性人ＶＥＧＩ基因克隆入载体ｐＵＣ１９后测序;再将正确的ＶＥＧＩ基因亚克隆入表达载体ｐＰＲＯＥＸＨＴｂ,ＩＰＴＧ诱导表达;初步纯化表达产物,检测对新生牛主动脉内皮细胞增殖抑制活性。结果：可溶性人ＶＥＧ     

人单核细胞趋化蛋白受体5的基因克隆及该基因超家族成员氨基酸结构

目的：获取有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白受体５（ｈｕｍａｎ ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ５,ｈｕＣＣＲ５）。方法：从人ＰＢＭＣ中提取总ＲＮＡ和ｐｏｌｙ（Ａ）＾＋ＲＮＡ,而后经反转录合成ｃＤＮＡ第一链,再以ＰＣＲ扩增出ｈｕＣＣＲ５ ｃＤＮＡ并插入融合表达载体ｐｃＤＮＡ３．０的ＢａｍＨⅠ和ＨｉｎｄⅢ位点,转化大肠杆菌ＴＧ－１,挑取克隆,酶切鉴定,序列分析。结果：克隆出长度为１０５６ｂｐ,编码３５２个氨基酸的ｈｕＣＣＲ５ ｃＤＮＡ。并分析证明与该基因超家族氨基酸有８０％同源性,与国外发表资料比较有３个碱基突变。结论：克隆出人单核细胞趋化蛋白５受体,为今后基础研究提供了较有用的材料。     

烹调油烟对大鼠肺细胞的DNA损伤机制

目的：以大鼠肺Ⅱ型细胞为靶细胞,检测烹调油烟的细胞毒作用和对细胞ＤＮＡ的损伤。方法：烹调油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞染毒２４ｈ后,应用ＭＴＴ法、溴乙锭荧光法以及单细胞凝胶电泳技术检测烹调油烟对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞毒性和ＤＮＡ的损伤。结果：在受试剂量范围内,烹调油烟颗粒提取物具有细胞毒性,可致ＤＮＡ交联及断裂的作用随染毒剂量的增加而增强,并存在剂量－反应关系（ｒ细胞毒性＝－０．９４８,Ｐ＜０．０１;ｒ交联＝０．９７６,Ｐ＜０．０１;ｒ断裂＝０．９５７,Ｐ＜０．０１）。结论：烹调油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞具有细胞毒性作用和ＤＮＡ损伤作用,可使ＤＮＡ链间交联和ＤＮＡ单链断裂。     

五氧化二钒对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

本研究采用胚胎肢芽细胞微团培养法，通过体外直接染毒及经体内染毒后在体外观察两种方式，观察了Ｖ２Ｏ５对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果显示，Ｖ２Ｏ５对体外肢芽细胞的增殖和分化均有明显抑制作用，并有较明显的剂量—反应关系，其ＩＣ５０分别为１３．６４和４．７７μｍｏｌ／Ｌ。体内／体外结合试验结果，Ｖ２Ｏ５对细胞增殖无明显影响，但对细胞分化有明显抑制作用。结果表明，Ｖ２Ｏ５对大鼠胚胎肢芽细胞有特异分化抑制作用。     

亚硒酸钠和维甲酸对MNNG诱导人全血白细胞非程序DNA合成的影响

本文应用非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验，观察了亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）和维甲酸（ＲＡ）单独和联合作用对致癌物ＭＮＮＧ诱发的人全血白细胞ＤＮＡ损伤的影响。结果表明，Ｎａ２ＳｅＯ３和ＲＡ均具有抗诱变作用；当Ｎａ２ＳｅＯ３（０．１μｇ／ｍｌ）和ＲＡ（０．１μｇ／ｍｌ）联合作用时，也可明显降低ＭＮＮＧ诱发的ＵＤＳ值，其联合抑制作用大于Ｎａ２ＳｅＯ３的单独作用。实验结果还显示，Ｎａ２ＳｅＯ３作为抗癌剂，它在高剂量时又呈现遗传毒性。     

五氧化二钒对大鼠胚胎中脑细胞增殖和分化的影响

本研究采用微团培养观察了Ｖ２Ｏ５对大鼠胚胎中脑细胞增殖和分化的影响，旨在为进一步揭示其发育毒作用机理提供依据。结果显示，Ｖ２Ｏ５对体外中脑细胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明显的剂量－反应关系。Ｖ２Ｏ５抑制中脑增殖经的Ｉ Ｃ５０分别为９．１和６．８μｍｏｌ／Ｌ。体内／体外结合试验显示，Ｖ２Ｏ５在２．０ｍｇ／ｋｇ时对细胞分化有明显的抑制作用，而在５．０ｍｇ／ｋｇ时才对细胞增殖出现抑制作用，按照Ｒｅｎ     

转基因小鼠致突变试验的时间反应关系

转基因小鼠致突变试验的时间反应关系曹洁印木泉第二军医大学卫生毒理学教研室上海２００４３３自１９８９年Ｇｏｓｅｎ等（１）建立第一个转基因小鼠致突变检测模型以来，转基因动物已成为检测哺乳动物体内自发突变和诱发突变的一种新的研究系统。迄今为止，国内外学者应...