维生素D受体基因的多态性与检测方法

近年研究发现,维生素D缺乏除与骨软化相关外,还与高血压、糖尿病、代谢综合征等多种疾病相关。维生素D在体内经肝脏和肾脏两次羟基化后作用于其受体而发挥生理作用。笔者通过查阅国内外相关文献,介绍维生素D与疾病的关系及维生素D受体基因多态性研究现状,阐述检测维生素D常用方法的优缺点,提出检测维生素D的最佳方法及其受体基因多态性检测的重要性,从而指导临床医生合理用药。     

绞股蓝皂苷对鼠应激能力影响的效果评估

目的：观察在不同类型应激状态下，绞股蓝皂苷对鼠应激能力的影响，并与人参皂甙作用效果进行比较。 方法：（1）实验于2004—07／08在宜春学院生物工程研究所完成。选用昆明种小鼠90只，SD大鼠30只。②常压下缺氧应激模型：将30只小鼠随机分为3组：生理盐水组（给予相同容积的生理盐水）、绞股蓝皂苷和人参皂苷（100mg／kg分别灌胃绞股蓝皂苷和人参皂苷），各组均连续干预3d。均在末次给药50min后将小鼠置于250mL的盛有碱石灰10g的磨口广口瓶内，每瓶放小鼠1只，然后密塞涂以凡士林，造成瓶内氧气逐渐减少，形成缺氧环境，以呼吸停止为判断死亡指标。观察记录在缺氧应激状态下，小鼠存活的时间。③异丙肾上腺素作用下的缺氧应激模型：分组、给药同“常压下缺氧应激模型实验”。于在末次给药35min后，腹腔注射异丙肾上腺素15mg／kg，25min后，按“常压下缺氧应激模型实验”法观察记录小鼠在缺氧应激状态下存活的时间。强迫游泳应激模型：分组、给药同“常压下缺氧应激模型实验”。在末次给药50min后将小鼠置于25℃，水深35cm的恒温水箱中强制游泳，小鼠游泳至力竭时开始下沉，以小鼠下沉至水底为指标，观察记录小鼠自游泳开始至下沉水底的时间。④急性心肌缺血性应激模型：随机将SD大鼠30只分成为3组：生理盐水组（给予0．1mL/只）、绞股蓝皂苷组（给予绞股蓝皂苷30mg／kg）和人参皂苷组（给予人参皂苷30mg／kg），每组10只。15min后记录一次心电图。然后，舌下静脉注射垂体后叶素0．5μg/kg（药物浓度100μg／L），造成大鼠急性心肌缺血。并立即记录心电图的变化．若ST段较实验前抬高0．1mV或T波低平、双向、倒置或出现心律失常者，则为缺血阳性指标，否则为阴性，缺血指标阴性率高则对心肌缺血的保护作用强。⑤计量资料差异性比较采用方差分析，进行F检验和q检验；计数资料以百分数表示，进行r检验。 结果：昆明种小鼠90只和SD大鼠30只均进入结果分析。①常压缺氧应激实验结果：人参皂苷组和绞股蓝皂苷组小鼠应激存活时间均明显长于生理盐水组（P〈0．05）。②异丙肾上腺素作用下的缺氧应激实验结果：绞股蓝皂苷和人参皂苷对异丙肾上腺素作用下的缺氧应激小鼠无明显影响（P〉0．05）。各组小鼠应激存活时间差异不明显（P〉0．05）。③强迫游泳应激实验结果：各组动物平均游泳时间无差异（P〉0．05）。但人参皂苷和绞股蓝皂苷均能延长小鼠强迫游泳的泳时，泳时延长率分别59％和57％，显示其具有一定的抗疲劳作用趋势。④大鼠急性心肌缺血应激实验结果：绞股蓝皂苷和人参皂苷都可使缺血性心电图变化发生率减少（P〈0．01，0．05），表明两药均能部分对抗垂体后叶素所致的心肌缺血反应，对大鼠急性心肌缺血有保护作用。人参皂苷组和绞股蓝皂苷组缺血指标阴性率明显高于生理盐水组（P〈0．05，0．01）。 结论：绞股蓝皂苷能明显提高小鼠常压缺氧、异丙肾上腺素作用下的缺氧、强迫游泳应激能力及大鼠急性心肌缺血应激能力，且该种作用与人参皂苷类似。     

乌索酸对小鼠免疫功能影响的实验研究

乌索酸((Ursolic acid又名熊果酸、乌苏酸)是从忍冬科接骨木属植物陆英(Sambucus Chinensis Lindl)中提取得到的单一化合物[1].研究表明, 乌索酸对BCG LPS免疫性肝损伤有明显的保护作用[2],本实验为进一步研究乌索酸的保肝作用机理,建立不同的小鼠免疫模型,从多角度研究乌索酸对小鼠免疫功能的影响.     

乌索酸对小鼠急性免疫性肝损伤的影响

目的:观察乌索酸(UA)对小鼠急性免疫性肝损伤的影响.方法:建立卡介苗与脂多糖(BCG-LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤模型,测定血清ALT,AST活性,计算肝脏、脾脏、胸腺重量指数,并进行肝脏病理组织检查.结果:小鼠poUA15、30、60 mg·kg-1,连用7 d,可显著抑制免疫性肝损伤小鼠血清ALT,AST活性,减轻肝组织病理损伤程度.结论:UA对小鼠急性免疫性肝损伤有明显的保护作用.     

HPLC-PAD法测定市售六味地黄丸中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的:通过测定不同厂家六味地黄丸(熟地黄、山药、山莱萸、泽泻、等)中熊果酸、齐墩果酸的含量,探讨二者对控制该药质量的影响。方法:取市售不同厂家的六味地黄丸,采用超声提取法提取试样,以HPLC-PAD法测定其产品中熊果酸、齐墩果酸含量。色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇-水-磷酸(88:12:0.02),流速:1mL/min。结果:熊果酸进样量在6.462～0.718μg,齐墩果酸进样量在3.132～0.348μg时,呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.73和97.59,RSD分别为1.5和1.7;4个厂家产品其熊果酸、齐墩果酸含量之间存在显著差异。结论:本试验建立的方法简便,快速,可行。不同厂家的六味地黄丸产品,熊果酸、齐墩果酸含量存在显著差异,但熊果酸、齐墩果酸两者的含量,其高低呈一致性。     

黄毛楤木化学成分的研究

目的:为开发利用江西丰富的黄毛橡木资源提供科学依据.方法:采用火焰及石墨无焰原子吸收光谱法测定微量元素的含量;用氨基酸分析仪测定氨基酸含量;柱层析法分离测定楤木总苷含量;用大孔吸附树脂法分离皂苷,光谱分析鉴定其结构.结果:确定了楤木中微量元素、氨基酸、楤木皂苷的种类及含量.结论:楤木中微量元素、氨基酸含量丰富;皂苷含量随季节而变化;分离得到4个皂苷单体,其中两个为新化合物.     

乌索酸药理作用研究进展

乌索酸为五环三萜类药合物,资源广,毒性低、具有广泛的生物活性。有抗肿瘤、抗氧化、抗肝炎、抗炎抑菌,降血脂1抗溃疡等作用。尤其抗肿瘤、抗氧化、抗肝炎作用显,有望成为抗肿瘤,抗肝炎药物。     

南北五味子提取物对大鼠体内环磷酰胺代谢的影响

目的:探讨南北五味子提取物分别对环磷酰胺(CTX)及其代谢产物羧基磷酰胺(CPM)、4-酮基环磷酰胺(4-Keto CTX)、脱氯乙基环磷酰胺(DC-CTX)血浆药动学及尿排泄的影响,从药物相互作用影响环磷酰胺代谢的角度阐明南北五味子的减毒作用机制。方法:采用UHPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆或尿液中CTX及其代谢产物的浓度。将SD大鼠随机分组分别给药分别取样,采集不同时间点血浆样品,绘制药-时曲线,并用DAS2.0软件一室模型拟合药动学参数,使用单因素方差分析法比较组间药动学参数的差异性;采集不同时间段尿液样本,计算待测成分的累积排泄量。结果:CTX单独给药组、合并南五味子提取物(制剂五酯胶囊,WZC,300 mg·kg^-1)给药组,以及合并北五味子醇提物(BWWZ,750 mg·kg^-1)给药组,不同待测物的AUC(μg·h^-1·mL^-1)分别为:CTX:411.818±82.10,483.492±174.49,683.92±91.70;DC-CTX:683.97±91.70,35.95±70.51,8.44±3.96;4-Keto CTX:87.27±38.81,25.78±10.03,17.18±37.2;CPM:99.74±16.18,110.21±57.99,104.90±16.23。Cmax(μg·mL^-1)分别为:CTX:233.41±32.10,255.021±45.90,249.27±17.52;DC-CTX:3.63±1.25,1.21±13.48,1.31±0.72;4-Keto CTX:5.24±1.04,5.34±2.41,2.84±0.81;CPM:25.88±5.26,27.53±8.11,22.42±4.75。48 h内的累积排泄量(μg)分别为:CTX:1 455.36,3 829.16,4 830.69;DC-CTX:2 136.21,921.18,468.87;4-Keto CTX:759.18,1 348.54,338.38;CPM:9 268.06,17 386.18,8 902.05。结论:WZC和BWWZ对CTX的代谢产物DC-CTX的药动学及尿液排泄均有显著影响,均可通过抑制CYP3A4活性使得侧链代谢毒性产物氯乙醛的生成明显降低;结合血浆、尿液中的实验结果可知在血浆中浓度较高的待测物在尿液中排泄也较多,使用WZC和BWWZ均可促进CTX原型和CPM的排泄。     

乌索酸防治大鼠实验性肝损伤作用的研究

目的：研究乌索酸对动物实验性肝损伤的保护和治疗作用。方法：采用四氯化碳注射造成大嫌实验性肝损伤模型。观察乌索酸驿肝损伤的影响。结果：研究表明乌索酸能使乌性肝损伤大鼠血清SGPT及肝甘油三脂显下降,血清甘油三脂、β-脂蛋白及肝糖原含量增加,肝细胞变性、坯 煞费苦心明显减轻。结论：证实乌索酸对实验性肝损伤有明显的保护和治疗作用。     

抹药酒点穴配合药膏敷贴治疗膝关节炎

目的观察抹药酒点穴配合药膏敷贴治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法将60例膝关节炎患者随机分为两组,观察组30例在口服消炎痛和追风透骨丸的基础治疗上采用抹药酒点穴药膏敷贴治疗膝关节炎,对照组30例采用口服消炎痛和追风透骨丸治疗膝关节炎。结果观察组治愈率为96.7%,明显高于对照组治愈率76.7%,两组疗效比较差异有非常显著性意义(P0.05)。结论抹药酒点穴配合药膏敷贴治疗膝关节炎疗效好,提高了治愈率,改善了患者健康及生活质量。