LPS影响p38蛋白在单核细胞内定位

目的： 探讨 LPS作用下p38蛋白激酶激活的动力学特点及其在细胞内超微结构中的定位。方法： 应用激酶活性测定、胶体金标记的免疫电镜技术观察LPS刺激前后p38蛋白激酶的动力学特点及在单核细胞株Raw264.7中的分布特征。结果： 动力学检测结果显示，LPS作用后15 min，p38磷酸化活性明显升高，30 min达到高峰，2 h达基线水平；p38在LPS浓度为100 μg/L时达最大激活效应。超微定位结果显示，未受刺激的及EGF刺激的细胞，p38在胞浆和胞核中金颗粒呈弥散性分布，金颗粒弥散在细胞的各个部分，如细胞质中线粒体、内质网、溶酶体；单核细胞株受到LPS刺激后，细胞核区的金颗粒明显增多，而胞浆区域的金颗粒显著减少。结论： 单核细胞株Raw264.7受LPS刺激后，其p38蛋白激酶由胞浆移位到胞核。     

小儿脊髓脊膜膨出不同年龄的手术效果分析

目前,手术修复是先天性脊髓脊膜膨出治疗的最有效方法。为了探讨最佳手术时机,我们对我院1994-01～2001-06收治的66例小儿脊髓脊膜膨出患者的临床资料进行了回顾性分析。1临床资料1.1一般情况男31例,女35例。按手术时年龄分三组:其中新生儿组22例,年龄2～28d,平均19d;婴幼儿组37例,年龄1～35月,平均15个月;幼儿以上组7例,年龄3～10岁,平均5.5岁。膨出部位:腰骶部47例,颈部16例,胸背部3例。其中新生儿组腰骶部14例,颈部7例,胸背部1例;婴幼儿组腰骶部27例,颈部8例,胸背部2例;幼儿以上组腰骶部6例,颈部1例。膨出物大小(1/2左右径×上下径×前后…     

伊拉地平对 MPP＋损伤 PC12细胞保护作用的实验研究

目的：研究伊拉地平（ ISR ）对1-甲基-4-苯基吡啶离子（ MPP＋）损伤的PC12细胞的保护作用及可能机制。方法MPP ＋处理PC12细胞建立帕金森病细胞模型;4-甲基偶氮唑蓝（ MTT）比色法检测细胞存活率;双氯荧光黄乙酸乙酯（ DCFH-DA）染色流式细胞术检测细胞内活性氧（ ROS）的生成;JC-1染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位（ MMP）。结果1 mmol · L－1MPP＋处理PC12细胞24 h后能明显抑制细胞生长（P＜0．01）;降低线粒体膜电位;ROS含量增加。2μmol· L－1伊拉地平预处理后, PC12细胞存活率显著增加（ P＜0．01）;线粒体膜电位升高;ROS生成减少。结论伊拉地平对MPP＋损伤的PC12细胞具有保护作用,其作用机制可能与维持线粒体正常膜电位,稳定线粒体功能,阻止线粒体氧化应激发生有关。     

高效液相色谱-质谱联用法鉴定中药藤黄中桥环类化合物

采用液相色谱电喷雾离子阱质谱联用仪(HPLC-ESI/MS)研究新藤黄酸和藤黄酸在正离子检测方式下的一级质谱和多级质谱，归纳其ESI碎裂规律。采用C₁₈反相色谱柱分离并检测了藤黄中的16种化合物；通过二极管阵列检测器与电喷雾质谱联用获得了相应化合物的最大紫外吸收和相对分子质量信息，并利用质谱的源内碰撞诱导解离技术(CID)结合文献报道鉴定了10种化合物的结构。这种研究方法对其他天然产物特别是微量成分结构分析具有参考作用。     

HPLC法测定藤黄中藤黄酸和新藤黄酸的含量

目的建立藤黄中藤黄酸和新藤黄酸的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法，色谱柱为Hypersil ODS C18（4．6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-0．1％冰醋酸水溶液（93：7），流速1.0mL／min；检测波长为360nm，外标法定量。结果藤黄酸线性范围为2．45～49μg，回归方程Y=11334．8＋232781X（r=0．9999，n=5），平均回收率99．3％，RSD=1．02％（n=6）；新藤黄酸线性范围为2．55～51μg，回归方程Y=75197．5＋226301X（r=0．9997，n=5），平均回收率100．5％，RSD=1．48％（n=6）。结论本法精密度高，重复性好，简便、可靠，可作为藤黄的质量控制方法.     

细胞膜生物色谱法在中药研究中的应用

中药的效应——物质基础研究一直是中药研究重点和难点，细胞膜生物色谱技术近年来在中药中应用逐渐受到关注，本文对细胞膜生物色谱法的原理、特点、应用现状进行了阐述，对其在中药研究的优势、存在的问题及对策、应用前景进行了分析和展望。通过该方法在中药效应成分分析中的不断应用，以及在实验过程的对该方法不断的完善和优化，细胞膜生物色谱法一定会在中药效应成分的研究中发挥重要的作用。     

20例镇静催眠药中毒救治体会

本院自2002年3月至2004年3月共收治巴比妥(鲁米那)及安定中毒患者20例，都获得了较好治疗效果，现分析如下。     

加工前、后的亳州牡丹皮水提物对2型糖尿病小鼠血糖、血脂等的作用研究

目的:研究加工前、后的亳州牡丹皮水提物对2型糖尿病（T2DM）小鼠的血糖（GLU）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和游离脂肪酸（NEFA）的作用比较。方法:采用高脂饲料喂养雄性昆明小鼠1个月,再采用链脲佐菌素（STZ）120 mg·kg^-1进行腹腔注射,复制T2DM小鼠模型,然后,随机分配已建立成功的小鼠模型至模型对照组、阳性对照组、未加工丹皮给药组和已加工丹皮给药组,并以正常小鼠作为正常对照组。对造模成功的小鼠以各丹皮水提物进行28 d的持续灌胃,再解剖取血,测定T2DM小鼠血清中的各项生化指标。结果:已加工牡丹皮和未加工牡丹皮水提物均能显著的降低T2DM小鼠体内的GLU（P<0.01）、TC（P<0.01）、MDA（P<0.05）,并能使T2DM小鼠体内的SOD显著升高（P<0.01）。结论:加工前、后的牡丹皮水提物均能显著降低T2DM小鼠的血糖值,两者差异无统计学意义,并对血脂的代谢和抗氧化的能力在一定程度上有调节作用。已加工的牡丹皮外观上虽然更加美观,但是在药效上并未增强。     

新藤黄酸包合物冻干粉针制备及工艺优化

目的 优化新藤黄酸羟丙基-β-环糊精（HP-β-CD）包合物冻干粉针的制备工艺。方法 采用不饱和水溶液法,以L-精氨酸与新藤黄酸成盐助溶,制备新藤黄酸HP-β-CD包合物;采用冷冻干燥法制备新藤黄酸HP-β-CD包合物冻干粉针;HPLC法测定新藤黄酸的量;以包合率为指标,应用正交设计法优化制备工艺。结果 优化的制备工艺为HP-β-CD与新藤黄酸质量配料比为10∶1、20 ℃包合5 h;制备的包合物包合率高;包合物冻干粉色泽均匀、粉末蓬松、溶解性好。结论 工艺优化合理、重现性好。     

天麻钩藤饮抑制铁死亡-脂质代谢保护鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤

目的:研究天麻钩藤饮(TGY)对鱼藤酮(Rot)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤的影响及可能的机制。方法:采用Rot建立和培养PC12细胞神经损伤模型并利用MTT比色法测定细胞存活率,确定Rot的最佳造模浓度以及TGY的有效干预浓度。流式细胞仪检测细胞的脂质活性氧(ROS)水平并用荧光倒置显微镜观察细胞荧光强度的变化;生化试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽(GSH)的水平和活力变化以及丙二醛(MDA)含量的变化。透射电子显微镜观察细胞线粒体形态变化,蛋白免疫印迹法检测细胞内谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4),长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4),溶血卵磷脂酰基转移酶3(LPCAT3)蛋白表达。结果:0.6μmol/L Rot处理细胞24 h后,细胞存活率接近50%(56.7%±9.9%),TGY预处理12 h后可抑制Rot的损伤程度。同时,减少乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率,并呈现一定的量效关系。Rot处理后的细胞内脂质ROS含量升高,而给予TGY预处理后有效降低Rot损伤的细胞内脂质ROS的含量,降低Rot处理后的MDA水平,并提高SOD活力和GSH水平。通过透射电镜观察到与正常组相比,0.6μmol/L Rot处理后细胞的线粒体皱缩,TGY预保护处理后,PC12细胞的线粒体形态有一定程度的改善。Western blot的结果呈现出TGY预处理后可以在一定程度提高Rot损伤后GPX4的表达,下降ACSL4、LPCAT3的表达。结论:TGY可以上调GPX4蛋白的表达,下调ACSL4、LPCAT3蛋白的表达,抑制不饱和脂肪酸的氧化,降低脂质过氧化水平和ROS的含量,从而改善神经损伤。