三种西药制剂微生物限度检查方法适用性试验的研究

目的建立复方氨酚烷胺胶囊、复方盐酸普鲁卡因胶囊和诺氟沙星胶囊三种制剂的微生物限度检查方法。方法按照2015年版《中国药典》四部的规定测定三种制剂对5个试验菌株的回收比值,并进行控制菌检查的方法适用性试验。结果复方氨酚烷胺胶囊与复方盐酸普鲁卡因胶囊均采用稀释法(1∶100)+薄膜过滤法(500mL/膜)进行需氧菌总数的测定,诺氟沙星胶囊采用稀释法(1∶100)+中和剂法+薄膜过滤法(500mL/膜)进行需氧菌总数的测定;三种制剂均采用平皿法(1∶10)进行霉菌和酵母菌总数的测定;复方氨酚烷胺胶囊采用薄膜过滤法(1∶20,冲洗500mL)、复方盐酸普鲁卡因胶囊采用常规法、诺氟沙星胶囊采用中和剂法+薄膜过滤法(1∶20,冲洗800mL)进行控制菌大肠埃希菌的检查。结论上述方法可作为三种制剂的微生物限度检查方法。     

倍芪腹泻贴微生物限度检查方法的适用性试验

目的 建立倍芪腹泻贴微生物限度检查方法。 方法 按照《中国药典》2015年版四部﹝通则1105和通则1106﹞的具体规定,采用平皿法、稀释法、薄膜过滤法及方法联用对倍芪腹泻贴进行微生物限度方法适用性试验。 结果 需氧菌总数、真菌和酵母菌总数计数方法适用性试验中各试验菌回收比值均不小于0.9,控制菌方法适用性试验均检出金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。 结论 该试验方法可用于倍芪腹泻贴的微生物限度检查。     

头孢地尼胶囊微生物限度检查方法的验证

目的建立头孢地尼胶囊微生物限度的检查方法。方法采用平皿法、稀释法、薄膜过滤法及方法联用对样品进行微生物限度检查,通过比较加入已知阳性对照菌的回收率来确定适宜的检验方法。结果根据回收率实验得出,采用离心薄膜过滤法(500 r.min-1,5 min,100 ml/次,500 ml+1 ml青霉素酶/膜冲洗)进行细菌数测定,采用平皿法进行霉菌和酵母菌数测定,采用联合法[离心薄膜过滤法(500 r.min-1,5 min,100 ml/次,500 ml+5 ml青霉素酶/膜冲洗)+培养基稀释法200 ml/瓶]进行控制菌的检查。结论该方法可用于头孢地尼胶囊的微生物限度检查。     

紫草素逆转由肝细胞生长因子诱导的肺癌吉非替尼耐药

目的:研究肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)诱导人肺癌HCC827细胞对吉非替尼的耐药以及紫草素(shikonin)逆转此耐药作用的可能机制。方法:体外培养HCC827细胞,分别采用不同浓度的紫草素和吉非替尼单独/联合作用,MTT法检测细胞活力,并计算吉非替尼的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50)); Transwell小室实验检测紫草素对HGF诱导的吉非替尼耐药HCC827细胞侵袭能力的影响; Western blot检测HGF诱导的吉非替尼耐药HCC827细胞中上皮间质转化(EMT)及相关信号通路蛋白水平的变化。结果:随着给药剂量的增加,紫草素对HCC827细胞的生长抑制率显著上升(P 0. 05),并呈一定的剂量依赖关系,其IC_(50)为3. 06μmol/L。肺癌吉非替尼敏感细胞HCC827对吉非替尼的IC_(50)为0. 51μmol/L。利用不同浓度的HGF诱导吉非替尼耐药,发现20μg/L HGF诱导耐药最为明显,在外源性HGF存在的情况下,HCC827细胞对吉非替尼的IC_(50)为12. 71μmol/L。紫草素能逆转由HGF诱导的吉非替尼耐药(P 0. 05)。Transwell小室实验结果显示,与对照组相比,HGF组能显著提高肺癌HCC827细胞的侵袭能力;同时,紫草素联合吉非替尼作用组则明显抑制由HGF诱导的侵袭(P 0. 01)。Western blot实验结果显示,HGF可诱导HCC827细胞发生EMT,使细胞中E-cadherin蛋白表达下调,vimentin蛋白表达上调,紫草素则能逆转EMT的发生(P 0. 01)。此外,HGF组可激活细胞中AKT蛋白的磷酸化;紫草素联合吉非替尼作用组则能明显抑制由HGF激活的AKT蛋白磷酸化水平(P 0. 01)。结论:紫草素能逆转由HGF诱导肺癌HCC827细胞的吉非替尼耐药,其分子机制可能与逆转EMT和抑制AKT蛋白通路的磷酸化水平有关。     

HPLC法同时测定布洛芬混悬液中6种合成色素方法的建立

目的 建立一种布洛芬混悬液中合成色素的HPLC测定方法 .方法采用直接稀释法处理样品,采用HPLC测定含量.色谱柱为C18柱(250mm×4.6mm,5μm);以甲醇-0.02mol·L-1乙酸铵溶液为流动相,采用梯度洗脱;检测波长为254nm;柱温30℃;进样量:20μL;流速1.0mL·min-1.结果 苋菜红浓度在1.00~25.02mg·L-1、胭脂红浓度在1.15~28.70mg·L-1、柠檬黄浓度在1.23~30.64mg·L-1、日落黄浓度在0.99~24.77mg·L-1、赤藓红浓度在1.06~26.59mg·L-1、诱惑红浓度在1.23~30.64mg·L-1范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.9997),平均回收率分别为99.2%、99.4%、99.6%、100.2%、98.5%、99.1%(RSD≤2.2%;n=6).结论 该方法操作简便、快速、准确、重复性好、灵敏度较高,可用于布洛芬混悬液中的6种合成色素的同时测定.     

口服固体药用高密度聚乙烯瓶微生物限度检测标准修订的建议

目的 对口服固体药用高密度聚乙烯瓶微生物限度检测标准提出修订建议.方法 结合最新版药典以及日常检验中遇到的问题,有针对性地提出修订建议.结果 通过分析,提出新的参考标准.结论建议结合以上参考方案,尽快提出新的检测标准.     

两种规格匹伐他汀钙片的微生物方法验证与结果分析

为了建立适合匹伐他汀钙片微生物限度检查方法,消除匹伐他汀钙片在微生物限度检查法中的抑菌作用,采用稀释液加入增溶剂和促微生物生长物质后,用常规法及培养基稀释法(0.2 mL/皿和0.5 mL/皿)进行方法验证,结果表明细菌和大肠埃希菌可采用常规法,真菌可经过稀释液(2)稀释后,采用培养基稀释法(0.2 mL/皿),白色念珠菌和黑曲霉对匹伐他汀钙片非常敏感,可作为匹伐他汀钙片微生物限度检查方法的质控菌株。     

一次性无菌过滤器在无菌受控检验中发挥的作用及验证结果考察

目的探讨不同厂家不同规格的一次性无菌过滤器的质量。方法通过采用无菌检查的方法对其进行验证检查,以氟哌叮醇注射液为样品,根据试验结果对一次性无菌过滤器的质量进行分析、比较和评估。结果不同厂家相同规格的一次性无菌过滤器均通过ISO9001质量管理体系及ISO4001环境管理体系的认证,可以满足各类检品无菌试验的检查要求。结论不同厂家相同规格的一次性无菌过滤器按照《中国药典》2010年版"无菌检查首选方法",无菌质量控制可满足方法学的验证。