帕纳替尼及联合化疗治疗伴T315I突变的Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病4例

目的探讨帕纳替尼及联合化疗治疗伴T315I突变的Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia, Ph~+ALL)患者的临床疗效及不良反应。方法伊马替尼或达沙替尼联合化疗治疗后复发,且治疗期间发生T315I突变Ph~+ALL患者4例,均给予帕纳替尼30 mg/d或45 mg/d,口服,视治疗情况给予联合化疗,随访观察治疗效果,记录总生存期及并发症发生情况。结果 1例应用帕纳替尼45 mg/d治疗1个月达分子生物学完全缓解,后BCR-ABL基因转阳但处于完全缓解状态;1例应用帕纳替尼30 mg/d治疗25 d后达完全缓解,复发后联合鞘内注射甲氨蝶呤+阿糖胞苷+地塞米松治疗再次达完全缓解;2例应用帕纳替尼45 mg/d治疗1个月后达完全缓解,其中1例3个月后复发,帕纳替尼联合Hyper-CVAD(环磷酰胺+表阿霉素+长春地辛+地塞米松)治疗后仍为部分缓解,后失访;末次随访时3例未失访者中位总生存期为16.4个月;4例患者均出现Ⅳ级骨髓抑制,2例出现肺部感染,1例出现心功能不全,经对症治疗后缓解,无治疗相关死亡。结论帕纳替尼及联合化疗治疗伴T315I突变的Ph~+ALL疗效确切,不良反应可耐受。     

TCR Vα23-Vβ13 基因修饰T细胞及其特异性细胞毒活性研究

目的: 分析弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)抗原特异T细胞受体(TCR) Vα23-Vβ13 基因修饰T细胞后的体外特异性杀伤活性。方法:扩增并克隆已鉴定的DLBCL患者外周血中单克隆增殖T细胞的TCR Vβ13 和TCR Vα23 基因全长序列,构建TCR Vβ13 -IRES-TCR- Vα23 双基因重组质粒,经核转染的方法将其转染正常人T细胞,通过real-time PCR和Western blotting检测TCR Vβ13 和TCR Vα23 这2个外源基因在mRNA和蛋白水平的体外表达情况,并对TCR转基因T细胞进行体外细胞毒性检测。结果:经酶切分析和核酸序列测定证实重组质粒构建正确,转染正常人T细胞后,TCR Vβ13 和TCR Vα23 在mRNA及蛋白水平实现了共表达。转染后3 d,TCR转基因T细胞对DLBCL细胞株Toledo细胞的杀伤活性明显高于非特异细胞株Raji细胞和Molt-4细胞,显示出特异性细胞毒活性。结论:成功构建DLBCL相关抗原特异的TCR Vβ13 -IRES-TCR Vα23 双基因真核表达质粒;TCR基因修饰T细胞可获得特异性细胞毒活性。     

CAG方案联合培门冬酶治疗成年人难治性急性淋巴细胞白血病一例并文献复习

目的：观察CAG方案联合培门冬酶治疗成年人难治性急性淋巴细胞白血病（ALL）的疗效及患者不良反应。方法应用CAG方案联合培门冬酶治疗1例化疗5个周期未达完全缓解（CR）的难治性成年人ALL,对其临床资料进行分析并复习相关文献。结果该患者经CAG联合培门冬酶方案治疗1个周期获得CR,再行巩固治疗1个周期后行同胞全相合异基因造血干细胞移植,期间4度粒细胞缺乏期及血小板减少时间均较短,未出现严重感染,主要不良反应为胆红素、氨基转移酶升高。结论CAG方案联合培门冬酶治疗难治性成年人ALL效果良好,安全性高,但需扩大病例数进一步论证。     

bcl-2抑制剂联合地西他滨治疗慢性粒-单核细胞白血病转化型急性髓系白血病一例并文献复习

目的 提高对转化型急性髓系白血病(AML)及其治疗方法的认识.方法 报道1例慢性粒-单核细胞白血病(CMML)转化为AML患者的诊断及治疗过程,并进行文献复习.结果 患者为老年男性,初步诊断为CMML,并快速转化为AML-M4.初始给予小剂量地西他滨(10 mg/周,皮下注射)诱导分化治疗,3周后联合bcl-2抑制剂(venetoclax)治疗,取得了较好的疗效.但患者年龄较大,合并脏器功能受损,最终因呼吸衰竭,进而多器官衰竭死亡.结论 转化型AML目前尚无标准的治疗方案,预后差,长期生存率低,需要探索新的治疗方法来提高患者生存率.     

急性白血病患儿大剂量甲氨蝶呤后合并过敏诱发重度骨髓抑制临床观察及文献复习

目的 探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿应用大剂量甲氨蝶呤(HDMTX)后合并非MTX性过敏,导致重度骨髓抑制等并发症的临床特点、发生机制及相应处理措施.方法 总结我院4例2011年至2014年参照2006年儿童急性淋巴细胞白血病诊疗建议(第三次修订草案)诊疗的ALL患儿,维持治疗期间应用HDMTX后合并非MTX过敏出现严重并发症病例的临床特点,并复习文献.结果 4例ALL患儿既往均多次应用HDMTX,化疗均顺利.此次应用HDMTX 72 h后血常规、肝功能、肾功能、血药浓度均正常,但过敏后均发生MTX血药浓度轻度增高、重度骨髓抑制、黏膜炎、感染或胃肠道出血,经对症支持后疗效良好.结论 过敏因素增加MTX血药浓度,导致其体内代谢明显延迟,加重黏膜炎及延长骨髓抑制期,从而出现较严重的感染及出血并发症,但临床转归良好,不同于MTX过敏所致的持续高MTX血症患者.对儿童ALL应用HDMTX后应密切观察病情变化,定期监测血药浓度,及时加强对症支持治疗.     

Sweet综合征一例并文献复习

目的 分析Sweet综合征的临床特点、诊断与治疗,以及Sweet综合征与血液病的关系.方法 分析1例Sweet综合征的临床资料,并复习相关文献.结果 Sweet综合征临床症状无特异性,极易误诊.结论 Sweet综合征大多合并有血液系统疾病,应及早对其进行诊断与鉴别诊断,最终提高血液科医师对Sweet综合征的认识水平.     

抗原特异TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCRV β13-pIRES2-EGFP真核表达载体的构建及共转染研究

目的 构建携带弥漫大B型非霍奇金淋巴瘤(DLBL)相关抗原特异性的TCR Vα和TCR Vβ基因片段的真核表达载体TCR Vα-pIRES2.EGFP和TCR Vβ-plRES2-EGFP,将其共同转染Raji和Jurkat细胞.方法 前期研究从1例DLBL患者外周血T细胞中发现克隆性增殖T细胞受体(TCR)Vα6和Vβ13亚家族T细胞,在此基础上利用RT-PCR扩增TCR Va6和TCR Vβ13基因全长序列后,分别将其定向克隆入带有绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体pIRES2-EGFP,酶切和核酸序列测定分析方法鉴定重组质粒TCR Vα6-pIRKS2-EGFP和TCR Vβ13-pIRES2-EGFP的正确性;利用核转染技术(nueleofector)将其分别或共同转染Raji细胞和Jurkat细胞,24 h后利用激光共聚焦显微镜观察EGFP的瞬时表达情况,48h后利用实时定量PCR检测TCR Vα6和TCR Vβ13基因的表达情况,Western blot检测EGFP蛋白的表达情况.结果 获得来自DLBL患者的TCR Vα6和TCR Vβ13基因全长序列,酶切分析和核酸序列测定证实TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCR Vβ13-pIRES2-EGFP重组质粒构建正确;转染24 h后,激光共聚焦显微镜下可观察到EGFP的表达,40%以上细胞发出绿色荧光,单独转染和共转染组荧光产生情况相似;实时定量PCR在单独转染和共转染组均町检测到TCR Vα6和TCR Vβ13基因的表达,共转染组2基因的表达水平稍低于单独转染组;Western blot检测在单独转染和共转染组均显示EGFP蛋白的表达,2组的蛋白杂交带强度相似.结论 成功构建了DLBL特异性的TCR Vα6-pIRES2-EGFP和TCR Vβ13-pIRES2-EGFP真核表达质粒,两者可同时转染到细胞中,并实现了体外共表达.     

达沙替尼联合甲氨蝶呤和左旋门冬酰胺酶挽救性治疗费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病致重度药物性肝损伤一例并文献复习

目的提高对达沙替尼联合大剂量甲氨蝶呤（HD-MIX）和左旋门冬酰胺酶（L-Asp）方案挽救性治疗费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病（Ph^＋ALL）致重度药物性肝损伤的认识。方法报道达沙替尼联合HD-MTX及L-Asp方案挽救性治疗Ph^＋ALL致重度药物性肝损伤1例并文献复习。结果此例Ph^＋ALL患者在该方案化疗后第7天暴发重度药物性肝损伤,肝功能：总胆红素（TBIL）221．7μmol／L,直接胆红素（DBIL）156．1μmol／L,间接胆红素（IBIL）65．6μ mol／L,丙氨酸氨基转移酶（ALT）111U／L,天冬氨酸氨基转移酶（AST）131U／L,碱性磷酸酶（ALP）354U／L,谷氨酰转肽酶（GGT）256U／L,总胆汁酸（TBA）199．2μmol／L。经积极保肝治疗2周后,胆红素及氨基转移酶降至正常,且疾病达完全缓解。结论达沙替尼联合HD-MTX及L-Asp方案挽救性治疗Ph^＋ALL疗效显著,但三药均有明显肝脏毒性,联合使用时应注意暴发性药物性肝损伤的发生。     

T细胞受体Vβ基因谱系分析在血液肿瘤研究中的应用

分析T细胞受体(TCR)Vβ基因谱和CDR3长度可以确切了解TCR Vβ亚家族T细胞的表达和克隆性。目前TCR Vβ基因谱分析已广泛应用于判断血液肿瘤和免疫相关疾病患者的免疫功能状态及某些致病克隆的确定；评价不同造血干细胞移植后的免疫重建；探索性区分临床移植物抗白血病效应和移植物抗宿主病；以及为血液肿瘤的免疫靶向治疗提供依据等。