PNPLA3对肝细胞和肝癌细胞脂质代谢的影响*

PNPLA3基因在人类和哺乳动物体内都有表达,并且在肝癌细胞中也有表达。PNPLA3在人体和小鼠体内突变后可导致肝细胞内甘油三酯的蓄积,肝细胞发生脂肪变性。在人类和大鼠肝癌细胞使突变型PNPLA3过表达,与过表达野生型PNPLA3细胞比,也会导致肝癌细胞脂质的聚集。本文将归纳总结以往关于PNPLA3基因对肝细胞和肝癌细胞脂质代谢的影响,并分别讨论了PNPLA3对人类肝细胞和肝癌细胞、大鼠和小鼠肝细胞及其肝癌细胞的影响。     

Inhibition of fatty acid synthase (FASN) affects the proliferation and apoptosis of HepG2 hepatoma carcinoma cells via the β-catenin/C-myc signaling pathway

Introduction and objectivesResearch in the last few years has proven that inhibition of fatty acid synthase (FASN) suppresses the migration and invasion of hepatoma carcinoma cells. This study aims to explore the effect of fatty acid synthase knockdown on the apoptosis and proliferation of HepG2 cells.Materials and methodsThe human liver cancer cell line HepG2 was cultured and then transfected with FASN-specific siRNA and negative control RNAi. After 48 h, cells and protein lysates were used for western blotting, CCK-8 (cell counting kit-8) assays, flow cytometry and other tests. To assess cell apoptosis, Bax, Bcl-2 and caspase-3 were detected; to assess proliferation, CDK4 (cyclin-dependent kinases 4) and P21 were detected; and to determine the signaling pathway involved, β-catenin and C-myc were also detected.ResultsInhibition of FASN in HepG2 cells can decrease proliferation and promote apoptosis. Flow cytometry and CCK-8 assays demonstrated that the apoptosis rate of FASN-specific siRNA-transfected cells was significantly increased compared to that of the control cells (p < 0.01). In addition, the cell cycle analysis revealed that FASN-specific siRNA-transfected cells induced G1 phase arrest (p < 0.05), but an increasing trend in G2 (p < 0.05).Compared with expression in negative RNAi-transfected cells, the expression of Bcl-2 and CDK-4 was reduced and the expression of Bax, caspase-3 and P21 was increased in FASN-specific siRNA-transfected cells (p < 0.05). Regarding the signaling pathway, the expression of β-catenin and C-myc was significantly reduced when compared to that in negative control cells (p < 0.05).ConclusionsInhibition of FASN suppressed the cell survival of HepG2 cells by inhibiting the β-catenin/C-myc pathway. This result suggests the potential treatment value of FASN for hepatoma carcinoma (HCC).     

DCE-MRI诊断原发性肝癌效能和TACE术后评估肿瘤活性应用价值研究*

目的 探讨动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)检查诊断原发性肝癌(PLC)患者的效能及评价疗效的价值。方法 2017年1月～2021年6月我院诊治的肝占位性病变患者68例,均接受DCE-MRI检查,并行穿刺细胞学检查诊断,应用临床流行病学基本技术评估MRI诊断的效能。所有PLC患者接受经皮肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗,术后再次接受MRI检查,评估疗效。结果 DCE-MRI检查显示PLC患者肝内特征性恶性肿瘤表现,T1WI序列为低信号,T2WI序列为高信号,动脉期明显强化,门脉期快速消退,偶见明显的肿瘤包膜;在68例肝占位性病变患者,经穿刺细胞学检查,诊断PLC患者64例,非肿瘤病变4例;DCE-MRI检查诊断的灵敏度、特异度、准确率、阳性和阴性预测值分别为95.2%、75.0%、89.7%、93.8%和25.0%;在TACE术后,MRI检查发现肿瘤被完全灭活18例(28.1%),部分灭活25例(39.1%),肿瘤稳定15例(23.4%),疾病进展6例(9.3%)。结论 DCE-MRI检查在诊断PLC和治疗后疗效判断方面有独特的作用,可指导临床制定治疗方案,价值很大。     

ALPPS治疗巨大原发性肝癌患者近远期疗效研究

目的 探讨联合肝脏分隔和门静脉结扎的二步肝切除术(ALPPS)治疗巨大原发性肝癌(PLC)患者的近远期疗效。方法 2016年1月～2018年2月我院诊治的98例巨大PLC患者,其中20例接受ALPPS治疗(A组),38例在经肝动脉化疗栓塞术( TACE)治疗后手术切除肿瘤(B组),和40例接受直接手术切除肿瘤(C组)。术后,行CT增强扫描,应用IQQA-Liver肝脏CT解读分析系统进行肝脏三维重建,测量全肝体积( TLV)、残余肝脏体积(RLV)、术后3个月肝脏体积(FRLV),计算肝增生体积和肝增生率。结果 术后,A组FRLV为(366.3±31.7)mL,显著大于B组【(185.2±16.4)mL或C组(181.9±14.2)mL,P＜0.05】,肝增生率为(68.8±6.4)%,显著高于B组【(21.4±2.0)%或C组(22.6±2.3)%,P＜0.05】; 术后15 d,A组血清白蛋白水平为(37.0±2.7)g/L,显著高于B组【(34.1±2.9)g/L或C组(34.0±3.2)g/L,P＜0.05】;A组2 a总生存率为70.0%,无进展生存率为55.0%,B组分别为55.3%和36.8%,C组分别为52.5%和42.5%,三组之间无显著性差异(P＞0.05)。结论 ALPPS可使巨大PLC患者术后剩余肝脏体积在短时间内迅速增加,加快了患者术后肝功能的恢复。     

肝癌治疗的“消灭与改造并举”策略

<正>百年抗癌战(包括肝癌治疗)的目标是"消灭"肿瘤,虽取得进展,但距攻克癌症尚远。癌症的早诊早治(也主要是消灭肿瘤)虽大幅提高了疗效,但要进一步提高就十分困难。为此,光"消灭"不够,还要"改造"。2011年笔者出版了《消灭与改造并举–院士抗癌新视点》的高级科普书,正是为此目的而写。以下是此书提出的六个要点,下面打算结合文献和笔者单位研究的结果,作简单论述,供大家参考。1提倡"消灭与改造并举",以补充"斩尽杀绝"的     

核心岩藻糖化运铁蛋白测定在良,恶性肝病鉴别诊断中的初步应用

利用LCA-agarose固相亲和层析法分离血清中核心岩藻糖化的运铁蛋白（cFuc-Tf），再结合运铁蛋白免疫比浊法，测定了50例正常人、44例良性肝病患者以及19例肝癌患者血清中的核心岩藻糖化运铁蛋白。结果显示正常人、良性肝病患者以及肝癌患者血清中的CFCC-Tf分别为36±34.9mg／L、40．5±34．1mg／L和167．8±104mg／L。经统计学处理，肝癌患者血清中的cFuc-Tf含量较正常人及其它良性肝病患者有极显著的升高。以cFuc-Tf＞140．7mg／L为诊断上限时，诊断肝癌的特异性为98．9％，阳性率为579％，对伴有AFP升高（＞40pg／L）之肝癌，阳性率为100％。血清eFuc-Tf测定可作为肝癌鉴别诊断的一项新指标。     

超声靶向微泡破裂介导EGFP质粒转染肝癌细胞的研究

目的探讨超声靶向微泡破裂(Ultrasound Targeted Microbubble Destruction,UTMD)介导EGFP质粒转染肝癌细胞株HepG2的有效性、安全性并优化超声辐照参数。方法体外培养HepG2细胞,在不同治疗超声的声强、占空比和辐照时间作用下,观察pEGFP-N3质粒在HepG2细胞中的转染。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在HepG2细胞中的表达,流式细胞仪检测细胞的转染率,MTT法检测细胞活性。结果在超声声强为2 w/cm2、占空比为20%、照射时间为60 s时,HepG2细胞的7转染率最高,达到11.53%±2.15%,且细胞生存率大于85%。结论 UTMD是一种有效的基因转染方法,不同的超声转染参数对细胞活力和基因传输效率有较大影响,对其进行优化后可减少细胞损伤,增强基因转染。     

抑制IGF2基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用

目的:研究抑制人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用。方法:将重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控抑制IGF2基因的siRNA表达载体pGL3-h AFP-hTERT-siRNA3(简称siRNA3)转染Huh-7细胞和正常肝L-02细胞,另设阴性对照(载体p GL3-hAFP-hTERT)组和空白对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞转染48 h后IGF2 mRNA表达;酶标仪检测转染0、24、48、72 h后的细胞活性;流式细胞仪检测转染48h后细胞周期、细胞凋亡;Western blot法检测细胞IGF2、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)E2、Cyclin D2、Cdc2、Bcl-2蛋白表达水平。结果:与阴性对照组和空白对照组比较,转染siRNA3的Huh-7细胞中IGF2 mRNA表达明显减弱,转染48、72 h后Huh-7细胞活性明显降低,G1期Huh-7细胞明显增加,S期Huh-7细胞明显减少;Huh-7细胞早期、晚期及总凋亡百分比均明显增加,IGF2、PCNA、Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2和Bcl-2蛋白表达均明显减弱,以上差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。转染siRNA3表达载体的L-02细胞上述指标均无明显变化(P>0.05)。结论:重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF2基因的siRNA可特异性抑制Huh-7细胞IGF2表达及细胞增殖,其可能与下调IGF2 mRNA及蛋白表达,进而引起细胞增殖相关基因PCNA、细胞周期调控相关基因Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2及细胞凋亡调控相关基因Bcl-2蛋白表达下调有关。     

诱癌过程中鼠肝组织一氧化氮合酶的表达与改变

目的：研究ＮＯ合酶在肝癌发生过程中的表达与改变。方法：以化学致癌剂２－ＦＡＡ喂饲ＳＤ大鼠，对鼠肝细胞在癌变过程中的组织学改变、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的表达和动态变化进行了研究。结果：当肝细胞轻度损伤时，肝组织中ＮＯＳ活性与对照组相比明显下降；当肝细胞表现为癌前病变和肝细胞完全癌变时，肝组织中ＮＯＳ的合成增加其比活性仍低于正常对照鼠；肝组织中ＮＯＳ与ＮＯ水平呈明显正相关（ｒ＝０５７，Ｐ＜００１），而与总ＲＮＡ浓度无相关性。结论：研究资料提示ＮＯＳ在诱癌早期的表达处于抑制状态以对肝细胞起保护作用；而肝癌形成阶段，ＮＯＳ加速表达以杀伤肿瘤细胞     

肝癌特异性GGT的发生及其定量分析的临床价值

目的探讨肝癌特异性ＧＧＴ的动态变化及其定量分析的临床价值。方法以化学致癌剂２－ＦＡＡ（００５％）制备鼠肝癌模型，观察肝癌ＧＧＴ的产生及其肝组织内分布，并对不同肝病患者血清肝癌特异性ＧＧＴ区带（ＨＳＢ）进行定量分析研究。结果在实验性鼠的诱癌过程中，鼠肝脏癌变组织中ＧＧＴ大量表达，出现早并具有胎肝ＧＧＴ的特点；人血清中ＨＳＢ的定量检测发现：肝癌组明显高于其他肝病组，肝外肿瘤及正常对照组（Ｐ＜０００１）；ＨＳＢ在小肝癌中的阳性率为７５％，在ＡＦＰ阴性肝癌中为７８３％。结论研究资料提示ＨＳＢ的定量检测其临床价值优于ＨＳＢ的定性分析，且有助于小肝癌和ＡＦＰ阴性肝癌的早期诊断。